尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光检测方法的建立及性能评价

目的建立定量检测尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的化学发光法并评价。方法以辣根过氧化物酶标记NGAL单抗、磁微粒包被NGAL单抗,基于化学发光平台,采用双抗体夹心法模式,建立尿液NGAL定量检测方法,并评价空白限、线性范围、精密度、干扰、回收率和方法学等指标。结果空白限为0.1 ng/mL,线性范围为10～1 500 ng/mL,分析内和分析间精密度(CV)均小于8%,血红蛋白100 mg/dL、三酰甘油3 000 mg/dL、胆红素50 mg/dL、抗坏血酸10 mg/dL、肌酐1 000 mg/dL、尿素12.5 g/dL干扰率小于10%;回收率为90.9%～103.1%;第95位百分位数法确定本方法参考区间为0～111.08 ng/mL;与Abbott NGAL检测试剂进行方法学对比,相关系数(r)为0.990 5,总符合率为96.1%。结论本研究建立的尿液NGAL定量检测方法性能良好,具有一定的临床应用价值。     

IL-6 磁微粒化学发光定量检测方法的建立和评价

目的:建立并评价基于磁微粒化学发光免疫分析(CLIA)平台的IL-6定量检测方法。方法:以抗人IL-6抗体包被的磁微粒、待检血清及辣根过氧化物酶标记的IL-6抗体组成分析体系,基于CLIA平台,采用双抗体夹心模式,建立IL-6抗原定量检测方法,并对其进行条件优化和性能评价。结果:该方法的LoB、LoD、FS分别为0.5 pg/ml、2 pg/ml、2.5 pg/ml;分析内、分析间变异及总不精密度分别≤7%、≤10%、≤12%;线性范围为3～1 000 pg/ml,最大稀释倍数为8倍;回收率在(100±15)%以内;标本中的血红蛋白、三酰甘油、胆红素浓度分别为200 mg/dl、2 000 mg/dl、45 mg/dl时,其检测结果无显著影响;本研究与罗氏同时检测临床标本,其结果的拟合曲线回归方程为:Y=0.955X+9.263,R~2=0.993 2。结论:本研究建立的IL-6磁微粒化学发光定量检测方法性能良好,具有一定的临床意义,可满足临床检测IL-6水平的需要。     

基于量子点免疫层析技术的IL-6定量检测方法建立

目的本研究建立了一种基于量子点标记技术和免疫层析技术的IL-6的检测方法,并对其性能及临床应用进行初步探讨。方法在偶联剂碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide,NHS)作用下,使抗IL-6单克隆抗体Ⅰ(Ab1,小鼠)与羧基量子点(CdSe/ZeS)偶联,制备量子点标记物;以抗IL-6单克隆抗体Ⅱ(Ab2,小鼠)作为捕获抗体,建立双抗体夹心量子点免疫层析法试纸条检测IL-6,依据建立方法制备IL-6试剂,并考核试剂的精密度、灵敏度和线性范围;应用该试剂检测重症监护室住院感染患者及健康人血清临床标本200份,与罗氏电化学发光法进行方法学比较。结果本研究建立的量子点免疫层析法试剂的分析内和分析间精密性均小于10%;空白检测限为0.27pg/mL,最低检测限为0.79pg/mL,功能灵敏度为2.0pg/mL;线性范围为2.0-5000pg/mL;与罗氏电化学发光法相比较,两种方法测定结果的回归方程为Y=0.9704X+4.685,相关系数R2=0.9963。结论本研究所建立的量子点免疫层析法IL-6试剂性能良好,该方法操作简便、检测快速、灵敏度高,适用于炎症及感染人群的早期鉴别诊断。     

基于磁微粒化学发光法的PCT检测性能评价

目的评估Autobio A2000 PLUS检测降钙素原(PCT)的检测性能,验证其是否满足临床检测。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件,EP5-A2、EP17-A、EP6-A2方案评价精密度、灵敏度和线性范围,与Roche电化学发光法平行测定197例线性范围内体表健康者和患者的PCT水平,比较两种方法的相关性和偏倚。结果 Autobio A2000 PLUS检测的精密度、灵敏度和线性范围能够满足临床需求。考核方法与参考方法对197例体表健康者和患者的PCT水平检测结果,相关性和符合率均较好。结论 Autobio A2000 PLUS对降钙素原(PCT)检测的分析性能良好,能够满足临床检测的要求。     

单纯疱疹病毒2型IgG抗体检测试剂临床对比分析

目的比较考核和参比两种HSV-2 IgG抗体测定试剂(酶联免疫法)的检测结果差异。方法用两种试剂平行对比检测企业样本库1328例样本,不一致样本用第三方试剂(酶联免疫法)复测。结果考核和参比HSV-2 IgG抗体检测试剂阳性符合率96.35%,阴性符合率99.92%,总符合率99.55%,差异无统计学意义(P0.05)。结论考核和参比HSV-2 IgG抗体测定试剂(酶联免疫法)临床性能接近,可以满足临床检测需求,适于临床推广应用。     

人血清淀粉样蛋白A磁微粒化学发光免疫分析定量检测方法的建立及性能评价

目的 建立人血清淀粉样蛋白A(human serum amyloid A,SAA)磁微粒化学发光免疫分析定量检测方法。方法 采用基于磁微粒化学发光免疫分析的双抗体夹心法定量检测人血液中SAA含量。评价该方法学的空白限、精密度、线性、回收率和钩状效应等分析性能指标,并用以上方法检测60例细菌或病毒感染患者血清和40例正常人血清,进行临床比对试验研究。结果 该方法的空白限为0.1 mg/L; 分析内精密度不高于5%,分析间精密度不高于10%; 在2～200 mg/L范围内,线性相关系数可达0.990; 准确度偏倚不高于15%; 回收率在100%±15%以内; 样本中SAA的含量为10 000 mg/L时,未发现钩状效应; 与西门子免疫比浊法试剂平行比对试验,回归方程为:Y=1.099 8X-2.673 9,相关系数r2为0.983 4。结论 该方法灵敏度高、精密度好、线性范围宽和临床相关性好,具有一定的临床应用价值。