抑制lncRNA LINC01503通过靶向调控miR-335-5p对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01503对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:将人肺癌H1299细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01503组(转染si-LINC01503)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01503组(转染pcDNA-LINC01503)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-335-5p组(转染miR-335-5p mimics)、si-LINC01503+anti-miR-NC组(共转染si-LINC01503和anti-miR-NC)、si-LINC01503+anti-miR-335-5p组(共转染si-LINC01503和anti-miR-335-5p)、miR-NC+WT-LINC01503组(共转染miR-NC和WT-LINC01503)、miR-NC+MUT-LINC01503组(共转染miR-NC和MUT-LINC01503)、miR-335-5p+WT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和WT-LINC01503)和miR-335-5p+MUT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和MUT-LINC01503)。采用RT-qPCR检测miR-335-5p和LINC01503的表达水平;Western blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞活力;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化;双萤光素酶报告基因实验验证LINC01503与miR-335-5p的靶向关系。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中LINC01503表达水平显著升高,miR-335-5p表达水平显著降低(P<0.05);与Ⅰ/Ⅱ期阶段相比,Ⅲ/Ⅳ期肺癌组织中LINC01503表达水平显著升高,miR-335-5p表达水平显著降低(P<0.05);LINC01503高表达的患者短期生存率显著低于LINC01503低表达的患者(P<0.05)。与正常支气管上皮细胞系BEAS-2B相比,肺癌细胞系H1299、A549和SPC-A-1中miR-335-5p的表达水平显著降低,LINC01503的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-335-5p、抑制LINC01503表达均可抑制H1299细胞的活力、迁移和侵袭,抑制细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。LINC01503靶向调控miR-335-5p的表达,干扰miR-335-5p表达能逆转抑制LINC01503表达对H1299细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论:抑制lncRNA LINC01503表达可抑制肺癌细胞的活力、迁移和侵袭,其机制可能与靶向调控miR-335-5p有关。     

不同超声检查方法诊断间质性肺疾病的可行性分析

目的 探讨不同经胸肺部超声检查方法(TLUS)在诊断间质性肺疾病(ILD)中的可行性。方法 收集本院呼吸内科、免疫内科住院的临床诊断为ILD的病人40例,所有患者均分别采用简化的前侧后胸壁14肋间隙扫查法、前侧胸壁28 肋间隙扫查法、前侧后胸壁72肋间隙扫查法三种方法对肺部进行扫查。计算每种超声检查方法的可重复性、一致性及扫查时间。结果 (1)同一医师/不同医师利用三种扫查方法对B线评价的可重复性及一致性均较高,其中同一医师利用14肋间隙扫查法的可重复性最高(ICC=0.9891,95%CI[0.9772,0.9948])、一致性最高(界限宽度=0.57±2.79,95%CI[-0.47,1.61])；不同医师利用14肋间隙扫查法的可重复性最高(ICC=0.9795,95%CI[0.9575,0.9902])、一致性最高(界限宽度=0.70±3.77,95%CI[-0.71,2.11])(2)同一/不同医师利用14肋间隙扫查法观察胸膜线严重程度的一致性高(Kappa值分别为0.948和0.895,P＜0.01)。(3)三种扫查方法的扫查时间对比,14肋间隙扫查法最短,72肋间隙扫查法最长(P＜0.01)。结论 利用简化的14肋间隙扫查法、28肋间隙扫查法和72肋间隙扫查法诊断ILD的可行性均较高,其中14肋间隙扫查法可重复性及一致性最高,且用时最短,临床中可以14肋间隙扫查法优先使用。     

肺部超声B线征与肺水肿病理的相关性研究

目的探讨肺部超声B线征与肺水肿病理严重程度的相关性。方法20只新西兰兔随机分为对照组5只和实验组15只,实验组经耳缘静脉注射油酸0.12ml/kg,制备肺水肿模型后打开胸腔根据肉眼观察将肺组织分为无病变区、轻度病变区、中度病变区和重度病变区,并于相应区域行直视下肺部超声检查,再分别留取相应的肺组织行病理组织学检查,分析肉眼观病变严重程度、B线数量与肺病理严重程度的相关性。结果随着肉眼观病变严重程度增加,直视下肺部超声B线评分增加(P<0.05),肺病理组织学评分增加(P<0.05);直视下肺部超声B线评分与肉眼观不同病变程度、病理组织学评分相关性高(r值分别为0.893、0.897,P<0.001),肉眼观不同病变程度与病理组织学评分相关性较高(r=0.735,P<0.001)。结论肺部超声B线征可反映肺水肿病理组织学严重程度,可用于半定量评估肺水肿。     

三种经胸肺部超声检查技术诊断间质性肺疾病的可重复性及一致性

目的 探讨3种经胸肺部超声检查（TLUS）技术诊断间质性肺疾病（ILD）的可重复性及一致性。方法 由2名超声科医师对40例ILD患者分别采用简化的14肋间隙扫查法、28肋间隙扫查法、72肋间隙扫查法行TLUS，对比同一医师及不同医师采用不同技术检测结果的可重复性、一致性及扫查时间。结果 同一医师和不同医师利用3种超声技术对B线评价的可重复性及一致性均较高，其中同一医师利用14肋间隙扫查法的可重复性[ICC=0.989 1，95%CI（0.977 2，0.994 8）]及一致性最高[界限宽度0.57±2.79，95%CI（-0.47，1.61）]，不同医师利用14肋间隙扫查法的可重复性[ICC=0.9795，95%CI（0.9575，0.9902）]及一致性最高[界限宽度0.70±3.77，95%CI（-0.71，2.11）]。同一医师、不同医师利用14肋间隙扫查法观察胸膜线严重程度的一致性高（Kappa值=0.948、0.895，P均<0.001）。3种超声技术扫查时间差异有统计学意义（P<0.001），其中14肋间隙扫查法时间最短，72肋间隙扫查法最长。结论 3种TLUS技术中，14肋间隙扫查法的可重复性及一致性最高，且用时最短。