缺氧对鼠胚大脑神经元c-Fos表达的影响及当归保护作用

目的:探讨宫内缺氧对胚胎大鼠大脑神经元内c-Fos表达的影响及当归注射液是否对缺氧鼠胚大脑神经元有保护作用。方法:将孕15d孕鼠采用低张性缺氧模型致鼠胚宫内缺氧,鼠胚大脑组织经c-Fos和神经元特异性标记物-神经元特异烯醇化酶(NSE)免疫组化双标染色后,进行图像分析。结果:三组鼠胚大脑中神经元特异烯醇化酶阳性细胞数量差异没有显著性;而缺氧组中c-Fos/NSE双染阳性细胞比对照组增多(P<0.05);当归组双染阳性细胞比缺氧组减少(P<0.05)。结论:缺氧可刺激鼠胚大脑神经元内c-Fos的表达。当归注射液对缺氧鼠胚大脑神经元可能有保护作用。     

改良PAS整块染色法显示肝糖原

目的:探讨PAS整块染色过程中固定与氧化同时处理与顺序处理对肝糖原显示效果的影响.方法:取成年家兔肝脏两小块,一块作固定与氧化顺序处理,另一块作固定与氧化同时处理,Schiff氏试剂染色,两组织块行石蜡切片,观察肝细胞内PAS反应阳性物质的深浅与分布特征.结果:两种方法均能显示肝细胞内糖原,PAS反应均为阳性,其中固定与氧化顺序处理法中PAS阳性强,阳性物质分布均匀,结构清晰.固定与氧化同时处理法中PAS阳性反应较弱,阳性物质分布不均.结论:PAS整块染色过程中固定与氧化顺序处理法优于固定与氧化同时处理法.     

组织学数字切片库及网络浏览平台构建的意义

为改进传统组织学教学手段,改变以教师为中心的传统教学观念,丰富学习资源和提供更多学习场地和学习机会,充分调动学生学习的积极性和创造性,将多媒体技术和网络技术相结合的组织学数字切片库及网络浏览平台的构建对于形态学科的教学显得非常必要。对组织学数字化切片库及网络浏览平台建设原则、方法及意义进行探讨,以期得到更好的建设和使用。     

巧妙设计组织学与胚胎学绪论,激发学生学习热情

组织学与胚胎学是一门重要的基础医学课程。讲好组织学与胚胎学的绪论可以帮助学生树立学习信心,建立融洽的师生关系。但繁复的内容应巧妙设计,在知识点过渡和细节安排上要环环相扣,才能引人入胜,更好地激发学生的学习热情。     

体外分离培养人皮下脂肪干细胞的生物学特性及影响因素

目的:研究证实脂肪组织提取物中存在脂肪源性干细胞,并表现出向多谱系细胞分化的特点.对来源于人皮下脂肪组织的脂肪干细胞进行体外培养,观察其形态特点、生物学特性及间充质来源细胞表面相关标志的表达.方法:实验于2005-11/2007-02在泸州医学院医学分子生物学实验室完成.①对象:行切疤植皮术的正常体质量患者8例,年龄16～45岁,均无传染性疾病,来源于泸州医学院烧伤整形科,实验前征得患者同意.②实验方法:人脂肪干细胞的分离、培养与传代:无菌条件下取患者新鲜的皮下脂肪,Ⅰ型胶原酶消化 贴壁法获取原代脂肪干细胞,生长至70%融合时传代,观察细胞的形态学变化.当原代细胞的胞质中出现较多透亮液滴后,行油红O染色.将第3代脂肪干细胞冻存,1个月后复苏,观察细胞的生长情况.选择生长状态良好的第3代脂肪干细胞,苏木精-伊红染色观察细胞形态,SABC法检测间充质来源细胞特异性标志波形蛋白的表达,SP法检测间充质干细胞表面相关抗原CD44的表达.取处于对数生长期的细胞,绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间.结果:①原代和传代过程中人脂肪干细胞的形态学变化:原代和传代培养的细胞均为长梭形贴壁生长.当原代细胞达到50%融合后,部分细胞由梭形逐渐变为多角形或椭圆形,胞质内出现油红O染色阳性的脂滴.传代细胞中此现象逐渐消失,且经冻存后复苏的活细胞率达80%以上,细胞生长、增殖能力未受影响.②间充质来源细胞表面标志的鉴定:第3代人脂肪干细胞的胞质丰富,HE染色弱嗜碱性,呈淡蓝色;波形蛋白阳性率为(97.1±2.3)%,CD44阳性率为(85.4±3.22)%.③人脂肪干细胞的生长曲线及倍增时间:传代培养的脂肪干细胞生长曲线呈"S"形,群体倍增时间为62.38h.结论:从人皮下脂肪组织分离培养出的脂肪干细胞,在体外扩增和冷冻保存后生物学特性稳定,且具有良好的增殖能力,表达间充质来源细胞表面标志波形蛋白和表面抗原CD44.     

关于加强组织学小专业实验课教学的几点体会

组织学与胚胎学是基础医学中的一门主干课程,对于初学者而言,其内容抽象,知识繁杂,且难学难记,许多学生都感到难于理解。今年我院2008级小专业入学学生有接近半数为文科生;以前从未学过生物;加之入学时间较晚,故教学学时相对不足（仅为14周）,教学进度较快,学生对于理论知识的理解就更不容易,因此,在实验教学中通过观察切片强化理论知识、增强形态观念、理论联系实际就成为了一项更加重要的环节。经过全体师生的共同努力,切片考试平均成绩显著提高,为此,实验教师总结了在小本科教学中的几点体会,希望能为提高教学质量提供一点思路。     

大鼠非酒精性脂肪肝模型构建的方法探讨

目的建立大鼠非酒精性脂肪肝动物模型,为深入探讨非酒精性脂肪肝的发病机制及药物治疗提供实验参考。方法取Wistar大鼠60只,随机分为对照组15只（常规饮食喂养）,模型组45只（高脂、高胆固醇饮食组）喂养,12周后处死动物取出肝脏,经H-E染色、组织化学与免疫组织化学染色观察造模情况。结果模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,eNOS免疫组化显示肝中央静脉和门管区内皮细胞呈强阳性。结论高脂、高胆固醇饮食是诱导非酒精性脂肪肝形成的重要诱因,降低其摄入是有效预防该疾病的重要措施,此外eNOS在病变早期起到减轻肝损伤的作用。     

组织学考试方法改革探索

为正确评价学生应用知识解决问题的能力,突出培养具有创新能力的医学人才,教研室通过平时阶段性考试、绘图作业、随堂抽问、综合性实验考试、理论闭卷考试等多元化考试形式,以基础知识为主、突出学生综合能力与创新能力的考核内容为导向,总成绩等于综合理论考试占70％（期末理论占60％,课堂提问10%）＋综合标本考试占30％（期末多媒体标本考试10％,组织芯片考试10％,平时随堂考核与绘图作业10%）的评价方式,创立了科学的组织学考试模式,使成绩结构多样化、考试形式多元化,能更真实地反映学生的学习情况,也提高了教学质量。     

提高组织学教学质量的几点思考

组织学是一门重要的医学基础课程,如何激发学生学习兴趣,提高教学质量,是组织学教学工作者面临的重要教学改革问题之一。笔者总结了提高组织学教学教学质量的几点方法与各位同仁交流学习,以促进组织学教学效果的提高。     

神经干细胞培养及其影响因素

背景：神经干细胞移植治疗是中枢神经系统损伤性、难治性疾病研究的热点。如何有效提高神经干细胞存活率、克隆形成率将是其应用的重要基础和前提。目的：探讨影响神经干细胞培养质量的可能因素,为神经干细胞的基础和临床应用研究提供参考。方法：①神经干细胞分离和培养：分离出生24h内SD大鼠的大脑,剪碎离心后以1×108L-1的浓度接种,经含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基预培养4h后改用无血清条件培养基（DMEM/F12,碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、B27）培养,2d或3d换液1次,6d时传代。②神经干细胞鉴定：倒置显微镜下观察细胞形态及生物学特性;免疫组化检测第3代细胞神经巢蛋白表达和诱导分化后神经元特异性烯醇化酶和神经胶质酸性蛋白的表达。结果与结论：出生24h的新生大鼠可获得足量的神经干细胞;血清预培养可提高神经干细胞的增殖和存活率;免疫组化结合血清诱导分化可对培养的神经干细胞进行定性鉴定。取材时间、细胞接种密度、传代时间、细胞因子、血清等多种因素都将影响神经干细胞的培养质量。