高敏肌钙蛋白Ⅰ、同型半胱氨酸、炎症因子在急性加重期慢性阻塞性肺疾病中的诊断价值

目的探讨高敏肌钙蛋白Ⅰ(hs-cTnI)、同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的诊断价值。方法收集AECOPD患者96例,以50例体检健康者为健康对照组,采用电化学发光法测定hs-cTnI水平、循环酶法测定Hcy水平、免疫比浊法测定hs-CRP水平、胶体金印迹法测定PCT水平,相关性分析采用Pearson相关分析,分析各指标与AECOPD之间的相关性、利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析hs-cTnI、Hcy、hs-CRP、PCT诊断COPE急性加重期的曲线下面积(AUC)。结果 AECOPD组hs-cTnI、hs-CRP和PCT水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05),AECOPD组Hcy水平低于健康对照组,差异无统计学意义(P0.05);Pearson相关性分析中,hscTnI、hs-CRP和PCT水平与AECOPD呈正相关(r分别为0.346、0.401、0.509),Hcy水平与AECOPD相关性较差(r=0.078);ROC分析中,hs-cTnI、hs-CRP和PCT的AUC分别为0.825、0.834、0.922,最佳诊断界值分别为0.082、18.25、3.075,灵敏度分别为0.823、0.802、0.781,特异度分别为0.92、0.62、0.94,约登指数分别为0.743、0.422、0.721,kappa值分别为:0.699、0.423、0.664。结论 Hcy检测对AECOPD诊断价值低,hscTnI、hs-CRP和PCT检测在AECOPD具有一定的诊断价值,可作为AECOPD的辅助诊断指标。     

上海市奉贤区儿童钙和微量元素检测结果分析

目的 了解上海市奉贤区儿童钙、铜、锌、铁、镁5种元素的缺乏状况及变化趋势,为防治儿童钙和微量元素的缺乏和指导合理膳食提供参考依据。方法 选取2 219例于本院儿科门诊就诊的儿童,使用原子吸收光谱法测定全血铜、锌、钙、镁、铁5种元素的水平。将儿童分为5个年龄组:婴儿组(1~<12个月),幼儿组(1~<3岁),学龄前组(3~<7岁),学龄期组(7~<12岁),青春发育期组(12~18岁)。分析不同年龄段和不同性别儿童钙和微量元素的水平及变化趋势。结果 5种元素中锌、铁和钙的缺乏在不同年龄段都较为常见,钙、铁和锌水平的异常率分别为21.94%、22.08%和26.81%。男、女性别间的差异无统计学意义(P>0.05),各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。2011~2013年锌的平均水平在不同组儿童中有不同程度的上升趋势,其他元素没有明显的变化趋势。结论 上海市奉贤区儿童锌、铁和钙存在不同程度的缺乏,应定期检测钙和微量元素并及早制定补充措施。     

术前外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值在乳腺癌诊断中的作用

目的探讨术前外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)在乳腺癌诊断中的最佳临界值及其在临床诊断中的作用。方法选取131例行手术治疗的乳腺癌患者(乳腺癌组)和120例乳腺良性病变患者(乳腺良性疾病组),并以95名女性体检健康者作为正常对照组。采用SYSMEX XT-800i全自动血液分析仪计数中性粒细胞(NE)和淋巴细胞(LY),计算NLR;采用电化学发光法检测外周血糖类抗原15-3(CA15-3)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)水平。根据受试者工作特征(ROC)曲线确定最佳临界值。结果乳腺癌组术前NLR、NE、LY、CA15-3明显高于正常对照组和乳腺良性疾病组(P0.05)。NLR的曲线下面积(AUC)为0.935,最佳临界值为1.995,敏感性为85.2%,特异性为87.1%。以NLR为检测基础,联合CA15-3诊断乳腺癌的敏感性为98.0%,特异性为92.6%。结论 NLR诊断乳腺癌的最佳临界值为1.995,联合CA15-3能增加乳腺癌诊断的敏感性和特异性,对乳腺癌的诊断、病情评估具有指导意义。     

膝关节镜下关节清理术加腔内注射透明质酸钠治疗骨性关节炎

目的探讨关节镜下清理术加腔内注射透明质酸钠治疗膝骨性关节炎的疗效。方法对78例88膝，膝关节骨性关节炎患者先用关节镜行清理术，待冲洗液清亮后向腔内注射透明质酸钠3ml。结果按疼痛、肿胀、关节活动度、步行能力、日常生活能力五项综合评分，随访8月-3年，优良率79．5％。结论关节镜下清理术可明确膝骨性关节炎的病变程度，有针对性的操作，同时注入透明质酸钠，可营养软骨，改变关节内环境，对治疗骨性关节炎具有肯定的疗效。     

区域内HPV亚型分布特点及其与宫颈病变的关系

目的了解上海市奉贤地区妇女生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)的感染状况及其分布特点,分析其与宫颈病变的关系,为区域内HPV防治提供初步建议。方法以2011年1月至2015年12月于上海市第六人民医院南院接受HPV检测的16岁以上女性为研究对象,对其宫颈分泌物进行HPV的21个亚型分型检测,其中1 374例经阴道镜下定点宫颈活检,确定病理分级,数据录入并应用SPSS20.0软件进行统计学分析。结果研究病例中HPV的21个亚型均有检出,HPV阳性率为17.54%(6 313/35 977),奉贤区5年间HPV感染率较高型别依次是HPV18、HPV52、HPV16、HPVCP8304、HPV58、HPV53;在1 374例宫颈病变中HPV的阳性率为82.75%(237/1 374),在宫颈病变患者中常见型别分布为HPV16、HPV58、HPV52、HPV18、HPV31。结论上海市奉贤地区的HPV感染情况具备一定的地域特征,可根据研究结果制定符合奉贤地区的HPV防治策略。     

ROC曲线在HLA-B27界值设置中的应用

人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）是机体内具有高度多态性的抗原系统,其中HLA-B27是HLA B位点上的一个重要的等位基因。有研究发现,90%以上的强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）患者携带HLAB27,由于二者的强相关性,HLA-B27的检测已成为临床筛查AS的重要辅助手段^[1-3]。然而目前国内没有根据特定地域专门设置的HLA-B27     

EZH2及DNMT1在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的探讨EZH2及DNMT1在三阴性乳腺癌中的表达特点及与主要临床病理参数的关系。方法采用免疫组化SP法,检测131例三阴性乳腺癌、78例非三阴性乳腺癌及65例癌旁组织中EZH2及DNMT1的表达情况。采用多因素logistic回归分析EZH2及DNMT1阳性表达有关的因素,Spearman等级相关分析三阴性乳腺癌中EZH2及DNMT1表达的相关关系。结果 EZH2蛋白在三阴性乳腺癌组织、非三阴性乳腺癌组织和癌旁组织的阳性表达率分别为86.3%、89.7%和40.0%;DNMT1蛋白在三种组织中的阳性表达率分别为63.4%、66.6%和44.6%;两种蛋白在乳腺癌组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.05);两种蛋白在三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织间表达差异无统计学意义。在三阴性乳腺癌中,EZH2阳性表达与肿瘤组织学分级、肿瘤直径、淋巴结是否转移有关(P<0.05),DNMT1的表达与肿瘤组织学分级、淋巴结是否转移有关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,肿瘤组织学分级为影响EZH2及DNMT1表达的最主要因素;三阴性乳腺癌中DNMT1与EZH2的表达呈正相关(r=0.34,P<0.01)。结论 EZH2与DNMT1的高表达与三阴性乳腺癌的分化、生长、转移有关,且两者在三阴性乳腺癌中的表达呈正相关,其联合检测可能对三阴性乳腺癌的预后判断更有价值。     

人乳腺癌上皮细胞miR-217对DNMT1调控作用的研究

目的 验证在乳腺癌上皮细胞系中,miR-217通过直接作用于DNMT1 3′UTR调控DNMT1表达,为后期动物实验和临床试验提供实验基础.方法 利用瞬时转染技术,在对应细胞系中,过表达、抑制miR-217,Western blot检测各实验组中DNMT1蛋白表达,并用含有miR-217野生型及突变型识别位点的DNMT1 3′UTR载体质粒分别转染293T细胞,检测相对荧光素酶活性改变.结果 过表达miR-217,DNMT1表达下降;抑制miR-217,DNMT1表达增高;双荧光素酶检测实验,DNMT1-UTR-WT的相对荧光素酶活性显著低于DNMT1-UTR-MUT,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 在乳腺癌上皮细胞系中,miR-217对DNMT1表达具有调控作用,且miR-217通过直接作用于DNMT1 3′UTR调控DNMT1表达.     

人EZH2基因编码区及3’非翻译区融合蛋白重组慢病毒表达载体构建及其在293T细胞中的表达

目的构建携带人EZH2基因编码区(coding region,CDS)及3’非翻译区(3’untranslated region,3’UTR)融合红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)重组慢病毒表达载体,使mCherry-EZH2融合蛋白在293T细胞中稳定表达。方法运用In-Fusion定向克隆技术构建人EZH2基因CDS区及3’UTR融合蛋白重组慢病毒表达载体,测序无误后抽提质粒,转染293T细胞,包装病毒,测定病毒滴度。Western blot检测mCherry-EZH2的表达。结果测序证实重组慢病毒表达载体基因序列完全正确;病毒颗粒包装成功,滴度为1.59×109IU/ml;Western blot检测293T细胞中可以表达mCherry-EZH2融合蛋白。结论成功构建人EZH2基因CDS区及3’UTR融合蛋白重组慢病毒表达载体及病毒,其mCherry-EZH2可以在293T细胞中稳定表达。为进一步分析可能调控EZH2基因CDS区及3’UTR表达的miRNA奠定前期实验基础。     

miRNAs慢病毒文库筛选靶向EZH2 3’非翻译区的新型miRNAs及其在乳腺癌中的表达

目的重组过表达EZH2基因3’非翻译区的MCF-7细胞株中筛选靶向miRNAs,并进行细胞和组织定量分析。方法重组
细胞株感染慢病毒文库,利用细胞毒性药物筛选后抽提细胞基因组,以此为模板PCR扩增出miRNA前体,测序确定miRNAs名
称,并对其进行PCR定量分析。结果在重组细胞株中共筛选出7种miRNAs,依次为miR-15b、miR-16-2、miR-181b2、miR-217、
miR-224、miR-329-1、miR-487b,这些新型miRNAs用生物信息学软件PicTar 和TargetScan 无法预测。Real-time PCR发现,与
乳腺癌细胞MCF-7 相比,正常乳腺细胞株HBL-100 中miR-217、miR-329-1、miR-487b 高表达;乳腺癌组织中仅miR-15b 及
miR-16-2表达增加,与癌旁组织相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论在重组过表达EZH2 3’-UTR的乳腺癌MCF-7细胞株
中结合慢病毒文库可筛选出用生物信息学软件未预测的新型靶向miRNAs,这些新型miRNA在正常乳腺细胞与肿瘤细胞及组
织中存在差异表达。