用抗胎肝细胞抗原－1及抗系统分化抗原单克隆抗体分离纯化小鼠造血干细胞

本实验中，首先测定了胎肝细胞抗原－１（ＦＨＣＡ－１）在小鼠低比重骨髓细胞（ＬＤＢＭＣ）上的表达，并依据ＦＨＣＡ－１的表达和麦胚凝集素（ＷＧＡ）亲和力将低比重骨髓细胞分成３个亚群：ＦＨＣＡ－１￣（ｈｉｇｈ）ＷＧＡ￣－，ＦＨＣＡ－１￣（ｌｏｗ）ＷＧＡ￣＋和ＦＨＣＡ－１￣－ＷＧＡ￣＋细胞。在抗ＦＨＣＡ－１抗体加补体处理后，ＦＨＣＡ－１￣（ｈｉｇｈ）ＷＧＡ￣－细胞被清除。以此特性，分离纯化了低比重、分化抗原阴性、ＦＨＣＡ－１￣－细胞，该细胞群中ＷＧＡ￣＋细胞占９０％以上，且该细胞的第１２天脾结节数为全骨髓细胞的９５倍，表明该细胞为高度纯化的多能造血干细胞。     

用抗胎肝细胞抗原—1及抗系统分化抗原单克隆抗体分离纯化…

本实验中，首先测定了胎肝细胞抗原－１（ＦＨＣＡ－１）在小鼠低比重骨髓细胞（ＬＤＢＭＣ）上的表达，并依据ＦＨＣＡ－１的表达和麦胚凝集素（ＷＧＡ）亲和力将低比重骨髓细胞分成３个亚群：ＦＨＣＡ－１＾ｈｉｇｈＷＧＡ＾－，ＦＨＣＡ－１＾ｌｏｗＷＧＡ＾＋和ＦＨＣＡ－１＾－ＷＧＡ＾＋细胞。在抗ＦＨＣＡ－１抗体加补体处理后，ＦＨＣＡ－１＾ｈｉｇｈＷＧＡ＾－细胞被清除。以此特性，分离纯化了低比重、分化抗原阴性、ＦＨ     

肝脏的捕获效应与门脉耐受的关系

利用ＰｋＨ－２６体外标记全异基因脾细胞技术研究门脉或尾静脉注射后其在受体鼠内的早期存活动力学，并研究了枯否氏细胞与供体细胞早期存活动力学及门脉诱导免疫耐受的关系。结果表明，尾静脉注射３天内，供体细胞迅速被受体鼠排斥，而门脉注射后，供体细胞首先滞留在受体鼠肝脏内，然后逐渐向体循环转移，且滞留在肝脏内的供体细胞主要是Ｔｈｙ１．２￣＋细胞。在门脉注射后第５天，在受体鼠内仍可以测到ＰＫＨ－２６￣＋细胞。如果门脉注射前首先静脉注射枯否氏细胞阻断剂氯化铣，则不但可以阻断肝脏对门脉注射异基因供体细胞的捕获，且可阻断门脉耐受的产生。这些结果表明，受体鼠肝脏内枯否氏细胞对门脉注射异基因供体脾细胞的选择性捕获是门脉耐受诱导和维持的关键。     

门脉注射异基因脾细胞诱导免疫耐受机制的研究

本实验检查了门脉注射异基因脾细胞后，受体鼠耐受的诱导及其可能的机制。结果表明，门脉注射２×１０￣７个异基因脾细胞可以诱导供体特异性混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）及细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）耐受。接受异基因脾细胞门脉注射的受体鼠肝脏淋巴细胞可以非特异性地抑制ＭＬＲ，但却抑制供体特异性ＣＴＬ的产生，以ａ－Ｈ－２Ｋ￣ｂ单克隆抗体清除其中的供体细胞可以完全清除对供体特异性ＣＴＬ产生的抑制，但只能部分地（５Ｏ％左右）清除其对ＭＬＲ的非特异性抑制作用，这一结果肯定了“Ｖｅｔｏ”细胞及供体细胞中自然抑制活性在门脉耐受诱导中的作用。此外还观察到ＣＤ８￣＋脾细胞是抑制供体特异性ＣＴＬ产生的主要细胞。