HBV-DNA实时荧光定量PCR检测试剂盒性能验证

目的基于ISO15189:2012要求,对一种国产HBV-DNA实时荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒的性能参数进行验证,以评价其是否可应用于临床检测。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件对试剂盒的正确度、精密度、检测下限、线性范围、特异度和抗干扰能力进行性能验证。结果试剂盒正确度符合要求(靶值对数值±0.4)。低值和高值的批内精密度CV为4%、0.65%,标准差(s)为0.19、0.04;低值和高值的中间精密度CV为4.75%、1.33%,s为0.17、0.09。HBV-DNA定量的检测下限定为100IU/mL。线性范围为1.00×102~5.00×108 IU/mL。特异度符合要求。血红蛋白浓度不大于28g/dL、总胆红素浓度不大于30mg/dL、三酰甘油浓度不大于3 200mg/dL,对检测结果没有影响(靶值对数值±0.4)。结论试剂盒的性能参数符合厂家声明,可以应用于临床检测工作。     

PLCε特异性shRNA对人膀胱癌生物学行为的影响

目的探讨人源磷脂酶Cε(PLCε)特异性短发夹RNA(shRNA)对人膀胱癌增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响。方法用携带PLCεshRNA基因的真核表达质粒pGenesil-PLCε转染BIU-87细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞PLCεmRNA和蛋白的变化。分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术和免疫组化检测BIU-87细胞及裸鼠移植瘤增殖情况和细胞周期的变化;采用RT-PCR检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA的变化;采用Transwell小室体外侵袭法及明胶酶谱分析细胞的侵袭能力。结果转染pGenesil-PLCε质粒的细胞可明显抑制PLCε基因和蛋白表达水平(P<0.05);MTT、流式细胞术与免疫组化检测结果表明转染pGenesil-PLCε质粒的细胞生长明显受抑制(P<0.05),且细胞周期阻滞于G0/G1期;转染pGenesil-PLCε质粒的细胞Bcl-2/Bax mRNA明显降低(P<0.05);明胶酶谱及侵袭实验显示转染pGenesil-PLCε质粒的细胞侵袭、转移能力明显下降(P<0.05)。结论特异性shRNA干扰PLCε基因可抑制...     

5-氮-2′-脱氧胞苷逆转膀胱癌细胞hepaCAM基因的表达及对其生长的抑制

目的 研究5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-CdR)逆转hepaCAM表达及抑制膀胱癌细胞的生长.方法 MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR检测hepaCAM mRNA的表达.结果 在T24细胞中,3.0和10.0 μmol/L5-aza-CdR药物浓度的抑制率明显高于0.3和1.0 μmol/L 5-aza-CdR(P＜0.05),在BIU-87细胞中,5.0 μmol/L5-aza-CdR药物浓度的抑制率明显高于0.1和0.5μmol/L(P＜0.05),并且药物处理细胞72 h的抑制率明显高于24和48 h(P＜0.05);5-aza-CdR处理细胞后,T24和BIU-87细胞凋亡数明显增加(P＜0.05);并可逆转hepaCAMmRNA表达.结论 5-aza-CdR可使hepaCAM基因重新表达,并通过诱导凋亡而抑制膀胱癌细胞的生长.     

干化学法尿隐血检测的可靠性分析

目的探讨干化学法尿隐血检测的可靠性。方法收集843例泌尿外科住院患者及403名体检人员的尿液标本。分析干化学法尿隐血检测与显微镜检测尿沉渣红细胞(镜检)结果的相符性。结果 843份泌尿外科尿标本中,482份干化学法尿隐血检测阳性,431份(51.1%)镜检阳性;干化学法尿隐血检测阴性与镜检阴性的相符率为98.9%。在843例泌尿外科住院患者和403名体检人员的尿液标本中,干化学法尿隐血检测结果为±、+时,两种方法检测结果相符率远低于干化学法尿隐血检测结果为阴性、++、+++时两种方法检测结果相符率(P<0.05)。两种方法检测279例泌尿系统结石患者阳性相符率最低。结论干化学法尿隐血检测可靠性欠佳,当检测结果异常时,应结合镜检报告结果进行综合判断。     

糖尿病心肌病早期诊断标志物研究进展

糖尿病心肌病是糖尿病患者的重要并发症,以心脏僵硬、心肌纤维化等为主要特征,最终进展为心力衰竭而死亡.糖尿病心肌病患者在疾病后期并发症不可逆转前往往没有症状,因此探索可以识别早期糖尿病心肌病的生物标志物,对于降低糖尿病心肌病患者的死亡率具有重要意义.本文旨在通过文献计量学方法对近30年来糖尿病心肌病诊断的研究进行综述,预测该领域在全球的发展趋势,为开发临床糖尿病心肌病早期诊断标志物提供重要思路.