肝癌高表达转录本调控microRNA613促进肝癌细胞增殖的机制研究

目的:研究肝癌高表达转录本(highly up-regulated in liver cancer,HULC)调控微小RNA613(micro RNA613,mi R-613)促进肝癌细胞增殖的作用机制。方法 :1在Hep G2肝癌细胞株中,过量或抑制表达HULC,通过实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和荧光素酶报告基因系统检测mi R-613的表达量和活性,分析HULC与mi R-613之间的相互关系;2通过高通量表达芯片筛查mi R-613作用的靶基因,在Hep G2细胞株中应用化学合成的mi R-613模拟剂(mimic)和抑制剂(inhibitor),用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法分别检测靶基因和靶蛋白的表达情况;3HULC和mi R-613协同作用于肝癌细胞后,用流式细胞仪和软琼脂克隆形成试验观察肝癌细胞周期变化和克隆形成能力。结果:1在肝癌细胞中,HULC可调控mi R-613的表达,随着HULC表达量的增加,mi R-613表达和活性均降低;2Src基因是mi R-613作用的下游靶基因之一;3高表达HULC或抑制mi R-613表达可促进肝癌细胞周期改变和克隆形成。结论:肝癌细胞中HULC可调控mi R-613表达,通过Src基因相关的细胞信号转导途径,改变肝癌细胞的细胞周期等生物学特性。