牙龈卟啉单胞菌诱导的耐受对小鼠牙槽骨吸收的影响

目的:研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)诱导的耐受对小鼠骨吸收相关因子白细胞介素-1β(IL-1β)、骨保护素(OPG)/NF-κB受体激活蛋白配体(RANKL)表达水平,以及牙槽骨吸收的影响。方法:采用1×10~9CFU P.gingivalis口内涂布给菌5 d,磷酸盐缓冲液(PBS)洗脱后,再次口内涂布P.gingivalis给菌2 d,构建Balb/c小鼠牙周组织耐受模型。10 d后收集新鲜牙龈组织,采用western bolt检测牙龈组织中IL-1β、OPG和RANKL表达水平的变化。6周后,收集上颌骨,采用亚甲基蓝染色法检测牙槽骨吸收水平的改变。结果:耐受组小鼠牙龈组织中IL-1β表达水平较非耐受组降低,OPG/RANKL比值较非耐受组升高。亚甲基蓝染色结果显示,耐受组小鼠釉牙骨质界至牙槽嵴顶(ABC-CEJ)的距离小于非耐受组(P<0.01),说明耐受组小鼠牙槽骨吸收较非耐受组降低。结论:P.gingivalis诱导小鼠牙周组织耐受后,小鼠牙龈组织中骨吸收相关因子IL-1β分泌降低,OPG/RANKL比值升高,抑制了牙槽骨吸收。     

内毒素耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP⁃1、MMP⁃7及细胞迁移能力的影响

目的：观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）?1和MMP?7的影响,以及耐受巨噬细胞对小鼠成纤维细胞L929迁移能力的影响。方法：采用1 μg/mL P.gingivalis LPS重复刺激小鼠腹腔巨噬细胞,构建内毒素耐受模型,并以1 μg/mL大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）LPS作为阳性对照。收集细胞条件培养液上清,采用ELISA技术检测MMP?1和MMP?7表达水平。观察耐受巨噬细胞条件培养液对L929细胞划痕创伤构建后细胞迁移能力的影响。结果：P. gingivalis LPS重复刺激后,巨噬细胞MMP?1分泌水平较单次刺激组降低（P < 0.05）,MMP?7分泌水平无明显变化（P > 0.05）。P. gingivalis LPS诱导的耐受巨噬细胞培养液上清刺激12、24 h后,L929细胞划痕修复面积大于单次刺激组培养液上清刺激后（P < 0.05）。结论：P. gingivalis LPS诱导的耐受能抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP?1,促进L929细胞迁移。