可溶性HLA-G1与NK-92细胞表面ILT2及KIR2DL4受体相互作用的研究

 目的 探讨可溶性 HLA-G1（sHLA-G1）对人 NK-92 细胞杀伤活性的抑制与细胞表面免疫球蛋白样转录分子 2（ILT2）和杀伤细胞免疫球蛋白样受体 2DL4（KIR2DL4）受体的关系。 方法 ①通过原核表达技术获得 sHLA-G1 重组蛋白（重组蛋白），并采用蛋白质印迹法进行鉴定。②取 NK-92 细胞，加入终浓度 20 μg/ml 的重组蛋白分别培养 10、30 min，再分别加入抗 HLA-G1/G5、抗ILT2 和抗 KIR2DL4 抗体，采用流式细胞术检测各组 NK-92 细胞表面 sHLA-G1 和 ILT2、KIR2DL4 受体表达阳性率；以 NK-92 细胞单独培养作为对照组。③以人白血病 K562 细胞为靶细胞，以经不同方式处理的 NK-92 细胞为效应细胞，效靶比为5:1，共同培养 2 h，采用流式细胞术检测 NK-92 细胞对 K562 细胞的杀伤率。NK-92 细胞处理方式为单纯重组蛋白处理（分别加入终浓度为 0、10、20 μg/ml 的重组蛋白培养 30 min）和表面受体封闭 + 重组蛋白处理（分别加入抗 ILT2、抗 KIR2DL4、抗 LT2 + 抗 KIR2DL4 抗体培养 30 min，再分别加入终浓度为 0、10、20 μg/ml 的重组蛋白培养 30 min）。 结果 ①蛋白质印迹分析表明所获重组蛋白为带有组氨酸标签的特异蛋白。②NK-92 细胞与 20 μg/ml 重组蛋白共培养 30 min 后，sHLA-G1 表达阳性率明显高于而 ILT2、KIR2DL4 受体表达阳性率均明显低于对照组（均 P < 0.05）。③以终浓度 0、10、20 μg/ml 的重组蛋白处理的 NK-92 细胞对 K562 细胞的杀伤率分别为 39.79% ± 2.00%、27.79% ± 0.75%、21.36% ± 0.67%（两两比较，均 P < 0.01）；单独封闭 ILT2 受体，杀伤率分别为 23.09% ± 1.63%、21.13% ± 0.38%、18.42% ± 0.47%（两两比较，均 P < 0.01）；单独封闭 KIR2DL4 受体，杀伤率分别为 30.74% ± 0.44%、26.03% ± 0.38%、21.15% ± 0.35%（两两比较，均 P < 0.01）。 结论 sHLA-G1 通过与 NK-92 细胞表面 ILT2 和 KIR2DL4 受体直接结合而抑制 NK-92 细胞的杀伤活性。     

氧化应激在肝纤维化发生发展中的作用

肝纤维化是一种创伤愈合反应,它是由各种致病因素所致的慢性肝损伤后的纤维结缔组织沉积,若不及时治疗,会进展为肝硬化甚至肝癌,危害生命。肝星状细胞激活后转化为肌成纤维细胞进而分泌大量的细胞外基质是肝纤维化最重要的病理特征。越来越多的证据表明,氧化应激在肝纤维化的发生发展过程中发挥着重要作用,在各种疾病所致的肝纤维化过程中均有不同程度的氧化应激参与。多数情况下,氧化应激是与其他因素相互影响共同参与肝纤维化这一病理生理过程。因此,就氧化应激对肝纤维化的影响及其与其他因素如炎症、凋亡、自噬等相互作用共同影响肝纤维化的最新进展进行阐述。     

同型半胱氨酸通过内质网应激反应促进大鼠血管平滑肌细胞钙化

目的研究同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的影响及其可能的机制。方法Hcy、内质网应激抑制剂4苯基丁酸(PBA)和牛磺酸(TAU)处理VSMC,茜素红染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定确定细胞钙化;Western Blot检测其内质网应激相关蛋白表达。结果不同浓度的Hcy(50、100、200和400μmol/L)促进VSMC钙化,与钙化组相比,VSMC钙含量分别增加了2.5倍、4.17倍、5.83倍和8.33倍(均P0.05),ALP活性分别增加了1.56倍、2.18倍、2.56倍和3.13倍(均P0.05)。Hcy可以促进内质网应激相关蛋白表达增加,与钙化组相比,给予Hcy后,p-PERK、p-IRE1和ATF6分别升高了37.8%、27.5%和26%(均P0.05)。给予PBA和TAU后,Hcy所诱导的内质网应激相关蛋白表达增加被抑制,与钙化+Hcy组相比,p-PERK降低64%和76%(均P0.01)、p-IRE1降低65%和41.1%(均P0.01)、ATF6降低50%和47%(均P0.01)、CHOP降低47.4%和39.5%(均P0.01)、PERK降低58.6%和69%(均P0.01)、GRP78降低79.5%和72.7%(均P0.01)。应用内质网应激抑制剂PBA和TAU可抑制Hcy诱导的VSMC钙化,茜素红染色发现钙化结节减少、ALP活性和钙含量降低;PBA和TAU还可抑制Hcy刺激的VSMC由收缩表型向成骨样细胞表型转变,与钙化+Hcy组相比,PBA和TAU处理组SMα-actin分别升高了2.9倍和3.1倍(均P0.01)、SM22α分别升高了1.8倍和2.3倍(均P0.01)、OPN分别降低了2.73倍和4.2倍(均P0.01)。结论 Hcy通过激活VSMC内质网应激反应促进VSMC钙化。     

食品中食源性寄生虫的流行及检疫现状

随着我国经济的发展和居民饮食的丰富多样化,食源性寄生虫病已成为影响我同食品安伞、人民健埭和生活质量的主要因素之。近年来我国食源性寄生虫病的种类增多且流行区域扩大。本文综述了食源性奇牛虫病的流行趟势,食品中食源性寄生虫的种类及其流行概况,并概述了目前我同食源性寄生虫的检验检疫现状。     

Toll样受体在蠕虫感染中的作用

Toll样受体作为一类模式识别受体在免疫应答和炎性反应中发挥着重要作用。在寄生蠕虫感染中,Toll样受体同样发挥着重要作用。蠕虫可通过多种途径调节Toll样受体的表达和功能,从而调节宿主的免疫反应,影响疾病的发生发展,改善机体的免疫微环境。本文综述了Toll样受体的生物学特征,以及在蠕虫感染中对免疫应答调节作用的研究现状。