纳米粒摄取机制的研究进展

随着纳米技术的发展,纳米材料在药物传输领域有着潜在的应用空间.研究细胞对纳米粒的细胞摄取机制,有助于从细胞层次上理解生命体的生理过程和药物的作用机制,掌握细胞治疗的机理;同时也可为构建更加安全有效的纳米药物载体提供依据.综述了纳米粒摄取机制的最新研究进展,在简要介绍纳米粒内吞途径的基础上着重讨论了影响内吞的因素,同时详细介绍了纳米粒内吞途径的常用研究方法.     

载紫杉醇聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯胶束的制备及药代动力学研究简

目的制备新型可注射用载紫杉醇聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯（PCl-PEG-PCL）胶束,并评价和比较其与市售紫杉醇注射液在大鼠体内的药代动力学性质。方法以PCL-PEG-PCL为载体材料,通过薄膜-水化-超声法制备出载紫杉醇PCl-PEG-PCL胶束,并对其进行表征。以市售紫杉醇注射液为对照．采用SD大鼠尾静脉注射后观察载紫杉醇PCL-PEG-PCL胶束的体内药代动力学．并用DAS2．0药代动力学数据软件计算相关参数。结果载紫杉醇PCL-PEG-PCL胶束呈大小均匀的球形,具有明显的核壳结构;平均粒径为93nm,多分散系数为0．19;载药量为28．98％,药物包封率为94．36％。体外释放研究表明．载紫杉醇PCL-PEG-PCL胶束具有缓释效果。药代动力学研究表明．两种制剂均符合二房室模型．市售紫杉醇注射液和紫杉醇聚合物胶束消除半衰期（t1/2）分别为（1．96±0．27）h和（12．65±1．77）h,平均滞留时间（MRT）分别为（0．93±0．19）h和（11．18±1．41）h,体内总清除率（CL）分别为（0．44±0．05）L·kg／h和（0．10±0．01）L·kg／h,药-时曲线下面积（AUC0-∞）分别为（17．15±2．35）mg·h／L和（73．82±10．38）mg．h／L。结论成功制备了新型可注射用载紫杉醇PCL-PEG-PCL胶束．药代动力学研究表明．所研制的载紫杉醇PCL-PEG-PCL胶束明显延长紫杉醇在血液中的循环时间及消除半衰期．显著提高生物利用度,是一种有潜力的紫杉醇缓控释新剂型。     

人p66Shc重组腺病毒抑制Hela细胞增殖的体外研究

目的 探讨人p66Shc重组腺病毒抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的作用及机制.方法 Hela细胞分为空白对照组(不感染腺病毒)、阴性对照组(感染Adeno X-LacZ)和实验组(感染AdenoX-p66Shc).通过细胞生长曲线、MTT检测分析观察细胞的生长状态;DHE染色法检测细胞内活性氧生成;流式细胞仪检测细胞周期;Western Blot法检测细胞内相关蛋白的表达.结果 p66Shc重组腺病毒能够抑制Hela细胞增殖,且随着p66Shc重组腺病毒处理时间延长和剂量增加其抑制作用增强.与空白和阴性对照组比较,p66Shc重组腺病毒感染48 h后,G2/M期细胞比例明显升高,其差异具有统计学意义(P＜0.01);同时引起Hela细胞活性氧水平显著上升,p53、CyclinB1蛋白表达显著升高,其差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 p66Shc重组腺病毒能够显著抑制Hela细胞增殖,并诱导其发生G2/M期阻滞.     

紫杉醇聚合物纳米囊泡的制备和体外释放研究

Objective To develop paclitaxol (PTX)-loaded polymersomes based on poly (ε-caprolactone)-block-poly (ethylene glycol)-block-poly (ε-caprolactone)(PCL-b-PEG-b-PCL, PCEP) amphiphilic triblock copolymers. Methods A series of PCEP copolymers was synthesized by ring-opening polymerization of ε-caprolactone initiated by PEG. The block copolymers were characterized by FT-IR、1H NMR and GPC. PTX-loaded polymersomes were prepared by thin-film and ultrasonic dispersion method and characterized in terms of morphology,particle size and size distribution, encapsulation efficiency and in vitro release. The effect of different hydrophilic and hydrophobic chain length on the drug-loading content, entrapment efficiency, size and size distribution and in vitro release were also investigated. Results The PTX-loaded polymersomes showed nanometer size and spherical morphology with core and shell. The sizes of PTX-loaded polymersomes increased with the increasing of the molecular weight of PCEP. The PTX-loaded polymersomes showed a continuous and steady release of PTX without initial burst release. The release rate increased with the increasing of hydrophilic PEG chain content and decreased with the increasing of hydrophobic PCL chain content. Conclusion For the first time, a novel PTX-loaded polymersomes was developed based on PCL-b-PEG-b-PCL amphiphilic triblock copolymers. The PTX-loaded polymersomes showed nanometer size, narrow size distribution and high drug encapsulation efficiency.These results indicate that PTX-loaded polymersomes could be a promising novel controlled release dosage form to increase therapeutic effect with decreased toxic and side effect of PTX.     

生物大分子药物洗脱冠状动脉支架

生物大分子药物洗脱支架是指载有核酸、抗体、酶、细胞因子等活性生物大分子的冠状动脉支架.生物大分子可针对再狭窄的分子机制,作用于指定环节的特定靶点,具有高度特异性,因此生物大分子药物洗脱支架可望成为解决支架内再狭窄和晚期血栓的根本途径.文章就目前生物大分子药物洗脱支架国内外最新研究进展作一综述.     

紫杉醇PCL—PEG—PCL温敏性缓释凝胶的制备及性能研究

目的利用聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯（PCL1250-PEG1500-PCL1250）两亲性聚合物温敏凝胶作为载体材料,构建疏水性抗肿瘤药物紫杉醇的载药体系。方法以辛酸亚锡为催化剂、聚乙二醇为引发剂,引发己内酯单体开环聚合,合成PCL1250-PEG1500-PCL1250三嵌段共聚物。通过核磁共振氢谱及凝胶渗透色谱对其组成、结构及分子量进行表征;制备不同凝胶浓度及初始载药量的载药温敏凝胶,并对其相转变性能、体外药物释放行为以及体内的生物降解性能进行考察。结果核磁共振及凝胶渗透色谱测定结果表明：合成的共聚物组成与初始投料比一致,符合设计的PCL1250-PEG1500-PCL1250嵌段聚合物结构;该凝胶在15％～30％浓度区间内,具备温敏性溶胶-凝胶相转变能力;该温敏凝胶对紫杉醇具有可控的药物缓释能力,通过改变凝胶浓度及初始载药量可凋节药物释放速率和维持释放的时间。小鼠背部皮下注射PCL1250-PEG1500-PCL1250溶胶后在体内迅速原位凝胶化,凝胶随植入时间逐渐降解至45d时基本降解完全。结论PCL1250-PEG1500-PCL1250温敏凝胶作为紫杉醇载药体系具有良好的药物控释能力和体内生物降解性能。     

紫杉醇聚合物纳米囊泡的制备和体外释放研究

目的 以聚己内酯-b-聚乙二醇-6-聚己内酯（PCEP）两亲性三嵌段共聚物为载体研制紫杉醇聚合物纳米囊泡.方法 以不同分子量的聚乙二醇（PEG）引发合成不同亲水段、疏水段链长的PCEP并进行FT-IR、1H NMR和GPC表征,以合成的嵌段聚合物PCEP为载体,通过薄膜-超声分散法制备紫杉醇聚合物纳米囊泡,用透射电子显微镜（TEM）表征其形态和构造,用粒度分析仪测定其粒径及分布,用高效液相色谱（HPLC）法测定其载药量及包封率,用透析袋法研究药物体外释放;同时,研究不同亲水链长、疏水链长对紫杉醇聚合物囊泡载药量、包封率、粒径及体外释放紫杉醇药物的影响.结果 研制的紫杉醇聚合物囊泡呈核-壳结构球形,粒径为纳米级,随着PCEP共聚物相对分子质量的增加而增大;紫杉醇聚合物囊泡体外释放无突释现象,能稳定缓慢释放紫杉醇,且释放速率随共聚物中亲水段PEG含量增加而增大,随疏水段PCL含量增大而减小.结论 以PCEP两亲性三嵌段共聚物为载体制备的紫杉醇聚合物纳米囊泡,其粒径小且分布均匀,包封率较高,有望成为一种用于提高紫杉醇的药效且降低不良反应的新的紫杉醇缓控释剂型.     

紫杉醇聚合物纳米囊泡的制备和体外释放研究

Objective To develop paclitaxol (PTX)-loaded polymersomes based on poly (ε-caprolactone)-block-poly (ethylene glycol)-block-poly (ε-caprolactone)(PCL-b-PEG-b-PCL, PCEP) amphiphilic triblock copolymers. Methods A series of PCEP copolymers was synthesized by ring-opening polymerization of ε-caprolactone initiated by PEG. The block copolymers were characterized by FT-IR、1H NMR and GPC. PTX-loaded polymersomes were prepared by thin-film and ultrasonic dispersion method and characterized in terms of morphology,particle size and size distribution, encapsulation efficiency and in vitro release. The effect of different hydrophilic and hydrophobic chain length on the drug-loading content, entrapment efficiency, size and size distribution and in vitro release were also investigated. Results The PTX-loaded polymersomes showed nanometer size and spherical morphology with core and shell. The sizes of PTX-loaded polymersomes increased with the increasing of the molecular weight of PCEP. The PTX-loaded polymersomes showed a continuous and steady release of PTX without initial burst release. The release rate increased with the increasing of hydrophilic PEG chain content and decreased with the increasing of hydrophobic PCL chain content. Conclusion For the first time, a novel PTX-loaded polymersomes was developed based on PCL-b-PEG-b-PCL amphiphilic triblock copolymers. The PTX-loaded polymersomes showed nanometer size, narrow size distribution and high drug encapsulation efficiency.These results indicate that PTX-loaded polymersomes could be a promising novel controlled release dosage form to increase therapeutic effect with decreased toxic and side effect of PTX.     

叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡的制备及其抗肿瘤活性研究

 目的 制备新型叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡,研究其理化性质、细胞毒性和体内抗肿瘤活性。方法 以两亲性三嵌段共聚物聚己内酯-b-聚乙二醇-b-聚己内酯（PCL-b-PEG-b-PCL）、甲氧基聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（mPEG2000-DSPE）、偶联叶酸的磷脂DSPE-PEG(2000) Folate共混物为载体材料,通过薄膜-超声分散法制备出叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡并对其进行形态、粒径及其分布、Zeta电位、载药量及包封率、体外释放等表征,用CCK-8法研究了聚合物纳米囊泡对H1299肺癌细胞的细胞毒性,并评价其在BALB/c小鼠EMT-6乳腺癌模型中的抗肿瘤效果。结果 叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡呈球形,具有明显的核-壳结构,粒径均匀。随着紫杉醇投药量的增加,纳米囊泡的粒径增大,包封率降低。载药30%的叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡的平均粒径为311 nm,多分散系数为0.171,Zeta电位为-30.3 mV,包封率为91.16%。体外释放研究表明,载紫杉醇聚合物纳米囊泡基本无药物突释现象,具有缓释特性。细胞毒性研究表明,当紫杉醇浓度为25 μg·mL-1时,叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡的细胞毒性低于相应浓度的紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂。体内抗肿瘤活性实验研究表明,叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡对小鼠EMT-6乳腺癌具有明显抑制作用,具有与紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂相似的抑制肿瘤作用。结论 叶酸靶向紫杉醇聚合物纳米囊泡具有高载药量及包封率、均匀的粒径及分布、缓释特性、低毒和较好的抗肿瘤作用,是一种有潜力的紫杉醇缓控释新剂型用于提高紫杉醇的药效并且降低不良反应。     

聚乳酸-羟基乙酸共聚物-壳聚糖单向缓释膜制剂的研究

目的研制一种可以携带药物单向作用患处的膜型缓释制剂,避免对周围正常组织产生不良影响。方法昆明小鼠30只,鼠龄6周,雌性,体质量20 g左右。利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)和壳聚糖分别制作外层膜和释放膜,通过交联层将2层结合,利用单向释放实验、蛋白释放、淫羊藿苷释放(测定其光密度值)确定膜的单向缓释放性。分别取不同释放时期的膜做扫描电子显微镜观察,确定其在不同释放时期膜微观结构的变化。利用降解率确定膜的物理性质,通过细胞实验和动物实验[苏木精-伊红(HE)染色],了解材料的生物相容性和载药后对治疗的有效性。结果通过释放实验、载药实验,证明单向膜可以包载不同溶解性质(水溶性、脂溶性)的药物,具有单向缓释作用。在释药过程中膜微观结构有明显变化,15 d后降解率达到96%左右。生物相容性实验和HE染色实验证明单向膜具有良好的生物相容性。细胞实验证明包载淫羊藿苷的膜可以使骨髓间充质干细胞产生一定量的碱性磷酸酶,发生分化。结论通过以上实验,确定单向膜具有良好的生物相容性、单向释放性和缓释性,载药后有一定疗效。