中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化

目的：获得原核表达的中国版纳猪ＳＬＡＩ类Ｐ１蛋白质分子。方法：ＰＣＲ扩增去信号肽的ＳＬＡＩ类Ｐ１ｃＤＮＡ序列，亚克隆至ｐＧＥＭＴ载体，测序。将亚克隆的Ｐ１　ｃＤＮＡ片段插入表达载体ｐＥＴ４２ｂ（＋），构建重组表达质粒ｐＥＴ－４２ｂ（＋）／ｓｌａ－ｐｌ，转化Ｅ·ｃｏｌｉ表达菌 ＢＬ２１－ＣｏｄｏｎＰｌｕｓ（ＤＥ３）－ＲＩＬ，ＩＰＴＧ诱导 Ｐ１－８ ｘ ｈｉｓ融合蛋白表达，经包涵体洗涤，８ ｍｏｌ／Ｌ尿素变性溶解，Ｎｉ２＋亲和层析，梯度透析后，定量保存。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果：目的蛋白（分子量３９．５ ｋＤ）表达量占细菌总蛋白 １５％，每升表达菌获得纯度９５％的目的蛋白 ４０ ｍｇ～６０ｍｇ。结论：成功建立猪 ＳＬＡ分子全长原核表达、纯化体系，为建立间接识别猪移植抗原ＳＬＡＩ类分子的人Ｔ细胞系及表位分析打下基础。     

基因芯片法和线性探针法在HCV基因分型的应用比较

目的　评价基因芯片技术在丙型肝炎病毒 (HCV)基因分型中的临床应用价值。方法　对HCVRNA阳性血清用基因芯片法和线性探针法进行基因分型。结果　基因芯片法和线性探针法的符合率是 10 0 %。结论　基因芯片法的准确率与国外第二代线性探针法试剂盒相同 ,而操作简单 ,特别是能准确地检出HCV混合感染 ,具有良好的应用前景。     

尿有形成分分析仪与尿路感染的实验研究

目的评价UF-100细菌定量计数在尿路感染诊断中的价值.方法 226例病人的清洁中段尿标本分别做细菌培养、UF-100尿细菌计数和尿干化学试带检测.结果与中段尿培养相比,UF-100细菌数>8000个/μl时,诊断尿路感染的敏感度为63.08%,特异性为94.41%,阳性预示值为82%,阴性预示值为86.36%,准确度为85.40%.结论 UF-100能快速、直接的计数细菌,是尿路感染筛检的良好方法.     

急性心肌梗死溶栓治疗时血浆凝血酶抗凝血酶复合物水平的变化

目的观察急性心肌梗死(AMI)患者溶栓治疗后凝血系统的变化.方法对临床确诊的34例AMI患者和33名正常对照者,采用ELISA法检测血浆凝血酶抗凝血酶复合物(TAT),对其中6名患者溶栓前、溶栓6 h及溶栓12 h血浆TAT进行动态观察并与正常对照组进行比较.结果 AMI患者的TAT[(13.10±6.70) μg/L]较正常对照组[(6.96±3.60) μg/L]显著升高(P<0.01).6例患者TAT在溶栓治疗前[(11.60±5.10) μg/L]较正常对照组显著升高.溶栓治疗6 h后,TAT[(15.10±7.60) μg/L]较治疗前均有显著升高.溶栓治疗12 h后,TAT[(13.75±5.80) μg/L]下降接近治疗前水平,但仍高于正常人.结论 AMI患者的凝血酶活力增加,溶栓治疗后,导致TAT短时间内进一步提高.     

G 蛋白偶联受体激酶 3 在口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及其可能的机制

[ 摘 要 ] 目的：探讨沉默 G 蛋白偶联受体激酶 3（G protein-coupled receptor kinase 3,GRK3）对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法：利用 Oncomine 数据库分析 GRK3 在正 常口腔组织及 OSCC 组织中的表达水平。用 RNA 干扰技术敲降 GRK3 在 OSCC 细胞 WSU-HN6 和 CAL27 中的表达,用 qPCR 法验证干扰效率后,采用 CCK-8 法和流式细胞术分别检测敲降 GRK3 对 OSCC 细胞增殖和凋亡的影响,Transwell 小室 法检测对 OSCC 细胞迁移、侵袭能力的影响,qPCR 法检测对 OSCC 细胞周期、上皮间质转化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）和基质金属蛋白酶（matrix metallopeptidase,MMP）相关分子 mRNA 水平表达的影响,WB 法检测 EMT 及 MMP 相关分子的蛋白表达水平变化。结果：OSCC 组织中 GRK3 的表达水平显著高于正常口腔组织（P<0.01）。转染 si-GRK3 后,OSCC 细胞中 GRK3 mRNA 表达水平均下调 70% 以上。敲降 GRK3 可显著抑制 OSCC 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均 P<0.01）,对细胞凋亡无显著影响（P>0.05）。敲降 GRK3 表达后,OSCC 细胞的 G0/G1 期比例显著增高（P<0.01）,细胞周期蛋白 D1（Cyclin D1）、Cyclin D3、细胞周期蛋白依赖性激酶 2（cyclin-dependent kinases 2,CDK2）和 CDK4 基因的 mRNA 表达降低 （均 P<0.05）;EMT 相关分子波形蛋白（Vimentin）、Zeb1 和 Slug 表达降低,E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达升高（均 P<0.05）; MMP3 和 MMP9 表达降低（均 P<0.05）,MMP2 和 MMP7 表达无明显变化（均 P>0.05）。结论：GRK3 可通过调节细胞周期促 进 OSCC 细胞的增殖能力,并通过调控 EMT 和 MMP 增强细胞的迁移和侵袭能力。     

中西医结合外治疗法治疗角化型手足癣41例临床观察

目的：观察中西医结合外治疗法治疗角化型手足癣的临床疗效。方法：将61例患者分为中西医结合治疗组（治疗组）41例,以中药浸泡结合0．25％盐酸阿莫罗芬乳膏外涂患处;西药治疗组（对照组）20例,仅用0．259／6盐酸阿莫罗芬乳膏外涂。观察5项主症及真菌学检查等指标。结果：治疗组愈显率为88．2％,对照组愈显率60．0％,两组愈显率比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：中西医结合外治疗法治疗角化型手足癣疗效明显优于单纯西药治疗。     

苦参总碱体外抗柯萨奇B病毒3型作用测定及其机理的初步研究

苦参总碱体外抗柯萨奇Ｂ病毒３型作用测定及其机理的初步研究陈福祥，等。中华实验和临床病毒学杂志１９９５；９（２）：１１５先用酸水浸泡、氯仿萃取等处理提取苦参总碱，然后通过微量细胞培养法，病毒蛋白质Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，分析了不同浓度苦参总碱对病毒增殖...     

中国猪种SLA-DR基因的克隆及序列分析

为探讨SLA DR基因结构及其在猪 人异种器官移植中的作用 ,本研究采用RT PCR扩增三个中国猪种SLA DRcDNA ,然后克隆入测序载体 ,进行双向测序 ,获得了具有完整阅读框架的三个结构和已有序列不同的新DRB等位基因 ,其长度为80 1个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 6 6个氨基酸残基 ;三个中国猪种DRA基因和已报告的NIH小型猪DRA基因结构相同 ,其长度均为 75 9个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 5 2个氨基酸残基。分析还揭示 ,(1)中国猪种SLA DR基因及其推导的氨基酸序列与人相应基因的同源性明显高于小鼠I E基因 ;(2 )中国猪DR分子 (DRα链和β链 )存在和人CD4分子相结合的HLA同源序列 ,但个别关键氨基酸残基发生改变 ,其改变幅度明显低于小鼠I E分子。人 猪MHC显示较高的同源性 ,在分子水平为人体T细胞同时采用直接和间接方式识别猪SLA这一免疫学现象提供了依据。     

一次性封装袋用于两种灭菌方法的效果比较

目的　比较和确定Eurosteril一次性封装袋在高温高压和环氧乙烷灭菌后的无菌有效期。方法　将 96 0把11号刀片用一次性封装袋通过专用封口机 (Euroseal)进行标准包装。随机分成A和B两组 ,分别经高温高压和环氧乙烷灭菌后 ,定期抽样对刀片进行细菌培养。结果　高温高压组绝对无菌期为灭菌后 7周 ,环氧乙烷组为灭菌后8周。两组间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,高温高压总体灭菌效果优于环氧乙烷。结论　使用Eurosteril一次性封装袋在高温高压和环氧乙烷灭菌后均能达到至少 7周的无菌有效期 ,但高温高压总体灭菌效果稍优于环氧乙烷     

碱性磷酸酶同工酶对原发性胆汁性肝硬化的诊断价值初探

目的初步探讨血清碱性磷酸酶(ALP)同工酶对原发性胆汁性肝硬化(PBC)的辅助诊断价值.方法用Sebia琼脂糖凝胶电泳分离30名正常人、23例PBC患者和25例其他肝胆疾病患者的血清ALP同工酶,经光密度扫描仪扫描后,分析各型同工酶的相对含量.结果血清ALP同工酶经电泳后可分为肝型、胆汁型、肠型和骨型4个区带.PBC患者的肝型ALP的相对含量最高,约为56%～70%,显著高于正常对照及乙肝后肝硬化患者(P＜0.05),而其胆汁型ALP的相对含量显著低于肝外阻塞性黄疸患者(P＜0.05).结论ALP同工酶分析可辅助诊断PBC.