RNA干扰对膀胱移行细胞癌BIU-87细胞株端粒酶活性及其增殖的影响

目的 探讨针对人端粒酶RNA(hTR) 及其催化亚基(hTERT) 的小干扰RNA (siRNA) 对膀胱移行细胞癌细胞株BIU-87端粒酶活性及其增殖的影响. 方法 根据人TR mRNA和TERT mRNA的序列,分别设计合成3对不同的且能干扰TR和TERT基因表达的siRNA(TR-siRNA, TERT-siRNA),通过脂质体法将其转染膀胱移行细胞癌BIU-87细胞株,采用荧光定量PCR分析TR、TERT mRNA 表达,TRAP-ELISA检测端粒酶活性,MTT 法检测细胞增殖. 结果 3对TERT-siRNA和3对TR-siRNA中,pRNAT-TERT-Ⅲ和pRNAT-TR-Ⅲ可以特异性抑制BIU-87细胞株中TERT和TR表达(分别减少67%和41%,P<0.05),且BIU-87细胞株的生长和端粒酶活性明显受到抑制. 结论 TR-siRNA和TERT-siRNA能特异且高效阻断各自基因表达,降低端粒酶活性,进而抑制BIU-87细胞的增殖.     

Adipophilin通过PI3K/Akt通路促进细胞内脂质蓄积

目的:探讨adipophilin促进细胞内脂质蓄积的可能机制,为动脉粥样硬化的防治提供参考。方法:分别通过q PCR、Western blot和油红O染色观察氧化型低密度脂蛋白(ox LDL)处理RAW264.7细胞不同时间后,细胞内Akt、p-Akt和adipophilin的蛋白水平及脂质蓄积情况;并检测PI3K/Akt抑制剂LY294002处理后,上述指标的变化;HEK293细胞过表达adipophilin后,检测Akt的活性;并用免疫共沉淀实验检测adipophilin与Akt之间的相互作用。结果:ox LDL处理细胞后,随着时间的延长,脂滴增多,Akt被活化,adipophilin表达增加,而LY294002处理则可抑制上述变化;过表达adipophilin后,p-Akt水平增高,但adipophilin与Akt之间未见直接相互作用。结论:Adipophilin可通过PI3K/Akt途径促进细胞内脂质蓄积,但可能不是通过直接相互关系发挥作用的。     

紫花牡荆素对人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 研究紫花牡荆素(Casticin)对人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 建立人卵巢癌HO一8910细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成5组,每组3只:生理盐水组、多西紫杉醇组(0.5rng/kg)、低剂量Casticin组(5 mg/kg)、中剂量Casticin组(10 rng/kg)和高剂量Casficin组(20 mg/kg).观察各组裸鼠移植瘤生长情况和裸鼠体重的变化;观察裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数的变化;FCM测定瘤组织细胞凋亡率;Western Blot分析瘤组织细胞凋亡的分子生物学机制.结果 Casticin对移植瘤生长有明显抑制作用.呈剂量和时问依赖性;而对裸鼠体重、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酐值和外周血白细胞计数均无影响.经Casticin作用16d,裸鼠移植瘤细胞表现出剂量依赖性增加的亚二倍峰,Bd-2蛋白表达降低.caspase-3蛋白表达增高.结论 Casticin具有抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的作用,并通过降低Bcl-2蛋白表达,活化Caspase-3蛋白表达诱导瘤组织细胞凋亡.     

碳酸酐酶Ⅱ与肿瘤

碳酸酐酶（Carbonic Anhydrase,CA）是一族含锌金属酶,迄今在哺乳动物中已发现13种催化性质不同、组织分布各异的CA同工酶。其中CAⅡ在细胞内的分布、分子的理化特性、生理功能都有不同于其他CA的特点,参与机体气体运输、酸碱调节和组织的分泌等功能,在维持内环境的稳定方面发挥重要作用。在肿瘤中,CAⅡ被认为可能参与了细胞外微环境的酸化,从而利于肿瘤的侵袭;也有人认为CAⅡ是一种肿瘤血管内皮相关抗原,其表达利于表皮生长因子受体（EGFR）的扩增,但CAⅡ在肿瘤中的确切机制有待于进一步研究。     

护理硕士不同临床培养方式效果分析

目的 探讨不同的临床护理培养方式对护理学硕士在妇产科护理中的培养效果。方法 随机把护理硕士按临床培养方式的不同分为4组,A组护理硕士单独培养、B组护理硕士带教高职生、C组护理硕士带教本科生、D组护理硕士带教本科生和高职生;分别予以标准化病人行护理实践,最后用客观结构化临床考试对护理临床实践效果进行考核并比较。结果 D组在病史采集、护理体检、急救技能操作、书写护理病历和综合能力等考核明显优于A组、B组和C组,差异有统计学意义(P＜0.05);护理硕士对不同培养方式在促进教学内容的掌握、提高交际合作能力、增强分析解决问题能力等方面的反馈D组优于A组、B组和C组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 护理硕士带教本科兼高职生的培养方式优于护理硕士单独培养,护理硕士带教本科以及护理硕士带教高职,护理硕士带教本科兼高职生的培养方式在护理硕士培养中值得提倡。     

siRNA抑制cortactin基因表达对Hep-2细胞增殖和侵袭的影响

背景与目的:皮层肌动蛋白(cortactin)是一种微丝肌动蛋白结合蛋白,其主要参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程,研究表明cortactin与肿瘤的侵袭和转移有关.因此,本研究旨在探讨siRNA(small interfering RNA)抑制cortactin基因表达对喉痛Hep-2细胞增殖和侵袭的影响.方法:构建含有cortactin基因的siRNA表达载体,转染Hep-2细胞,同时以转染空载体和空白细胞组作为对照(3组细胞分别命名为psilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2、psilencer3.1/Hep-2和Hep-2),G418筛选稳定转染的细胞;Western blot检测siRNA对cortactin蛋白表达的影响;MTT和平皿隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞迁移侵袭能力.结果:成功构建获得cortactin缺陷型稳定转染细胞系pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2;与Hep-2细胞比较,pSilencer3.1-cortactin-siRNA/Hep-2组细胞中cortaetin含量为11.22%(P<0.01),增殖被抑制,克隆形成率降低为21.47%(P<0.01),迁移、侵袭能力显著降低(p<0.01).结论:cortactin表达下调能抑制喉癌Hep-2细胞的增殖和侵袭.