O：9型小肠结肠炎耶氏菌分子流行病学特征初探

小肠结肠炎耶氏菌（Y．e）是一种肠道传染病，在我国分布广泛，在人和动物中引起腹泻及在猪中流行暴发已有报道，可造成重大的经济损失，对小肠结肠炎耶氏菌进行分于流行病学的研究，对控制我国小肠结肠炎耶氏菌的流行、减少经济损失具有现实意义。O：9型是引起人类Y．e菌病的最主要菌株之一，为人类常见的血清型，为了解0：9型Y．e各菌株之间的差异，本文应用毒力质粒DNA限制性内切酶酶切图谱分析的方法对各菌株之间的差异进行了初步的探讨，现将结果报道如下。一、材料与方法工．菌株：0：9型Y．e＊＊”菌4株＊15、w卫7、侣、12分别来…     

登革病毒Ⅱ型E基因片段在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析

目的分析登革病毒Ⅱ型（DEN2）重组包膜蛋白的免疫原性，为登革Ⅱ型亚单位疫苗的研制奠定基础。方法扩增DEN2E基因片段（254—395AA），与表达载体pET-30a连接，构建重组表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达重组蛋白。重组蛋白经高效液相色谱（HPLC）柱纯化后，进行阻断DEN2感染C6／36细胞试验，同时用重组蛋白免疫小鼠，采用中和实验法测定血清中和抗体效价。结果该基因片段在大肠杆菌中高效表达重组蛋白，重组蛋白可被抗DEN2多克隆抗体识别，纯化后的重组蛋白能有效地抑制DEN2感染C6／36细胞，经重组蛋白免疫的小鼠可产生中和抗体。结论表达的DEN2重组包膜蛋白具有良好的免疫原性，能诱导中和抗体的产生。     

恙虫病东方体Sta56抗原的原核表达、纯化及其在间接ELISA中的应用

目的　构建含恙虫病东方体sta5 6基因的重组表达质粒 ,在E .coli中表达Sta5 6重组抗原 ,纯化后用于间接ELISA检测恙虫病。方法　从含有恙虫病东方体Karp株sta5 6基因的重组质粒TOPO sta5 6扩增出截短的sta5 6 ,定向插入pET30a载体 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,用SDS PAGE及Westernblot进行分析 ;采用电洗脱方法纯化重组抗原并应用于间接ELISA检测恙虫病。结果　以截短的sta5 6基因片段构建了重组表达质粒pETOt95 7,重组的Sta5 6抗原可在E .coli中以融合蛋白的形式有效表达 ,SDS PAGE显示了一条相对分子质量 (Mr)为 4 0 .3× 10 3 的蛋白表达带 ,West ernblot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别。电洗脱纯化的重组抗原应用于间接法ELISA检测恙虫病 ,与间接免疫荧光法IFAT比较 ,其敏感性和特异性分别为 91.7%和 76 .5 %。结论　在大肠杆菌中表达的Sta5 6重组抗原具有免疫反应性 ,纯化后可用作免疫诊断试剂。     

福州市2004年登革热流行病学和病原学特征分析

目的对福州市2004年登革热疫情及病原学特征进行分析.方法调查和分析福州市2004年登革热流行病学特点及影响因素;用C6/36细胞分离患者血清标本中病毒,并用单克隆抗体鉴定型别;通过比对核苷酸序列,分析本次疫情可能的传染源.结果福州市2004年9月中旬起至10月底发生一起登革热暴发疫情,所确认的93例病例消长情况基本与当地的蚊媒消长情况相一致.从病例的10份血清标本中分离出6株病毒,经单克隆抗体鉴定均为登革热病毒1型,病毒基因的核苷酸序列比对证明同源性与柬埔寨分离株（DENV-1/KHM/2001;GenBank Accession No.L0904278）最为接近.结论福州市2004年登革热疫情为感染登革1型病毒所引起;疫情的发生主要为输入性病例流行引起.     

恙虫病东方体56kDa抗原基因片段在不同载体的表达

目的 构建恙虫病东方体56kDa表面抗原基因(sta56)片段在不同载体的重组表达质粒，在E．coli中表达sta56重组抗原并比较不同表达系统对sta56的表达效果。方法 从含有恙虫病东方体Karp株sta56基因的重组克隆，扩增出不同长度的截短的sta56片段．定向插入pPROEX HTb及pET30a载体，转化大肠埃希菌DH5a或BL21(DE3)，IPTG诱导表达，应用十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察重组蛋白表达情况。应用蛋白印迹(WB)方法分析重组抗原的活性。结果 成功构建含sta56不同长度片段的重组表达质粒pHTbOt957、pHTbOt498、pHTbOt342和pETOt957、pETOt498、pETOt342，各重组子均可在E．coli中以融合蛋白的形式有效表达，SDS-PAGE显示各表达重组子表达不同分子量的重组蛋白，WB证实各重组蛋白均能被恙虫病患者阳性血清所识别。结论 恙虫病东方体Karp株sta56基因可在大肠埃希菌获得高效表达，pET30a对sta56的表达效果优于pPROEX HTb；重组蛋白具有免疫反应性，纯化后可用作免疫诊断抗原。     

福建省2013-2018年人感染H7N9禽流感病例流行病学特征分析

目的 分析福建省人感染H7N9禽流感(H7N9)的流行病学特征,为防控提供依据。方法 收集福建省2013年3月— 2018年7月H7N9病例相关资料,采用描述性流行病学方法分析其流行病学特征。结果 福建省共确诊H7N9病例108例:因病毒性不明原因肺炎确诊的病例(肺炎病例)占84.26%(91/108);发病集中在12月至次年4月,合计占95.37%(103/108);发病具有一定程度的地域集中性。肺炎病例中,男性占81.32%(74/91),发病年龄为54.9± 17.1岁,发病前有禽类接触史者占91.21%(83/91);病例预后与病例发现方式关系密切,与其发病时间、发病地点、发病年龄、发病-诊疗的时间间隔间均无显著关联。结论 加强福建省H7N9防控工作应结合其流行病学特征着重加强不明原因肺炎病例的监测、检测工作。     

我国首次发现的HIV-2型病毒的分子生物学证据

「目的」从分子生物学角度进一步证实我们发现的１例ＨＩＶ感染者为国内首例ＨＩＶ－２型病毒携带才。「方法」从Ｇｅｎｅｂａｎｋ查询已知的ＨＩＶ－２核酸序列,通过序列比较以及酶切位点分析查找ＨＩＶ－２基因组中保守区,应用套式ＰＣＲ扩增出ＨＩＶ－２基因组ＬＴＲ－ＧＡＧ区的￣３３０ｂｐ的核酸片段,并经限制怀酶切位点和序列分析证实扩增片段为ＨＩＶ－２特异性片段。「结果」实验表明,扩增片段为ＨＩＶ－２特异性片段,     

福建省发现1例登革3型病毒感染者

[目的]对福建省2006年发现的1例登革热病例进行实验室检测并鉴定病毒型别。[方法]应用免疫层析及ELISA方法检测感染者双份血清中病毒IgM和IgG抗体,逆转录-套式PCR方法扩增登革病毒特异性核酸片段,并与1～4型病毒特异性产物比较,判定其型别。[结果]双份血清标本均检出病毒IgM抗体,恢复期血清中IgG抗体出现阳转。使用通用引物和型特异性引物,在急性期标本中检出血清3型登革病毒特异性核酸,其他型别为阴性。流行病学调查表明该病人系从菲律宾回国,在当地有蚊虫叮咬史。[结论]该登革热病例为血清3型病毒感染。结合流行病学调查,其感染地可能为菲律宾,为防止病毒暴发流行,应对其进行密切监测。     

福建省登革病毒感染的型别鉴定

[目的]应用RT－PCR方法鉴别福建省登革热感染及型别的判断。[方法]从血清中提取病毒RNA，行RTPCR，再用型特异性引物扩增出特异性片段，电泳后观察判断其型别。[结果]从6份早期病人血清扩增出4份登革热2型特异性条带。[结论]该方法可用于登革热感染的鉴别诊断并判断其血清型。     

异源双链泳动分析法在人类免疫缺陷病毒1基因亚型分析中的应用

目的 运用异源双链泳动分析法（HMA）进行人类免疫缺陷病毒1（human immunodeficiency virus-1,HIV-1)基因亚型分析。了解福建省HIV-1亚型的流行情况。方法 收集细胞培养中HIV-1感染的外周血单个核细胞（PBMC），聚合酶链反应（PCR）扩增HIV-1膜蛋白基因（env)区的核酸片段，与标准亚型的对照质粒的PCR产物进行杂交，形成异源双链二聚体，根据其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率确定其亚型，并进一步对标本进行序列测定和系统树分析，结果 15份标本中，80.00%为E亚型，6.67%为B亚型，2份不能确定其亚型，比较异源双链泳动法和序列测定法的结果，显示两种分析方法对HIV-1病毒基因分型有较高的一致性，其亚型一致率为86.67%。结论 福建省流行的HIV-1毒株以E亚型为主，亚型分析5法具有快速，简便，经济和高特异性的特点，可用作对HIV流行毒株进行长期监测的重要手段。