回阳生肌膏治疗慢性难愈性皮肤溃疡疗效观察及作用机制探讨

目的 考察回阳生肌膏治疗脾肾阳虚型慢性难愈性溃疡的临床疗效,并在细胞,分子层次上探讨其作用机制.方法 将102例慢性溃疡患者随机分为治疗组(外用回阳生肌膏纱条)、对照组(外用洗必泰油纱条),2组均服用温补脾肾的玉肾胶囊,6周后总结疗效.取治疗前后慢性皮肤溃疡患者创面边缘组织,用图像分析软件分析Ⅰ型/Ⅲ型胶原,观察成纤维细胞生长因子2(FGF-2),血管内皮细胞生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(Fn)在伤口愈合过程中的表达情况.结果 治疗组愈显率为50.00%,对照组愈显率为33.33%,差异有统计学意义.回阳生肌膏可以改善慢性溃疡创面的局部炎症状态,促进新生血管生成;可促进胶原合成,尤其是Ⅰ型胶原形成;可使慢性皮肤溃疡边缘组织FGF-2表达和VEGF的表达有上升的趋势.结论 回阳生肌膏对慢性难愈性溃疡具有促进创面愈合的作用,促进新生血管生成和胶原合成是作用机制之一.     

糖尿病大鼠创面愈合过程中成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成减少

目的：观察链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病复合创伤修复过程中成纤维细胞增殖与胶原合成的变化。 方法： 实验采用Wistar大鼠112只，随机分对照组和模型组。模型组大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）55 mg/kg，3周后各组动物复合背部2.04 cm²全厚皮切除形成伤口。观察创面愈合时间和愈合率；采用HE染色和免疫组化法观察成纤维细胞和增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平；采用苦味酸-天狼星红染色和图像分析技术观察创面Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及Ⅰ/Ⅲ型比值。 结果： STZ诱发的糖尿病大鼠复合创伤后创面的愈合时间为(27.13±1.81)d，明显长于对照组（15.25±1.67）d，P<0.01；模型组在创伤第3、7和15 d创面愈合率明显低于对照组，分别P<0.01；在3、5、7和9 d模型组创面成纤维细胞数量和PCNA表达也明显少于对照组，分别P<0.05和P<0.01。两组创面在不同时点上Ⅰ型胶原分布均呈递增趋势，但对照组明显多于模型组，分别P＜0.05；尽管对照组在创伤3、7 d Ⅲ型胶原含量高于模型组，但在创伤3、7和11 d模型组Ⅰ/Ⅲ胶原比值都明显低于对照组，分别P＜0.01。 结论： STZ可能通过影响创面细胞增殖和创面胶原合成，从而导致创面愈合迟缓。     

三氧化二砷对皮肤成纤维细胞、中性粒细胞MMPs活性,TIMP-1及TGF-β1表达的影响

目的：砒石是化腐生肌的常用中药，其主要成分是三氧化二砷（As₂O₃）。本研究通过观察As₂O₃对基质金属蛋白酶（MMPs）活性、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）及转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达影响，探讨化腐中药能否调节胶原代谢，从而治疗慢性皮肤溃疡。方法:明胶酶谱法检测大鼠中性粒细胞（PMNs）来源的MMP-9活性、人成纤维细胞（hFb）分泌的MMP-1、MMP-2的活性，免疫细胞化学法检测hFb TIMP-1、TGF-β₁的表达。结果:As₂O₃浓度在50 mg/L时可以提高大鼠PMNs来源的MMP-9的活性（P<0.01）；在0.8 mg/L可以提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性（分别P<0.01）；同时As₂O₃作用于hFb 6 h、12 h、18 h后，TIMP-1、TGF-β₁表达持续降低（P<0.01）。结论:As₂O₃在一定范围内可提高PMNs来源的MMP-9的活性；也可提高hFb分泌的MMP-1、MMP-2的活性，同时抑制hFbTIMP-1、TGF-β₁的表达。提示砷类制剂可通过提高多种MMPs的活性，降低TIMP-1的表达从而发挥化腐作用。     

酸浆苦素B对活化多形核中性粒细胞化学发光及H_2O_2产生的影响

通过观察化学发光及检测H2O2产生，考察锦灯笼的主要成分酸浆苦素B（PhysalinB，PhB）对调理酵母多糖激活的多形核中性粒细胞（polymorphonuclearleukocyte，PMN）的影响。结果显示，不同浓度的PhB对活化的PMN化学发光呈剂量相关的抑制作用，同时对活化PMNH2O2的产生也有相同趋势的抑制作用。提示锦灯宠抗炎机理可能是抑制PMN氧自由基的产生和释放而发挥作用。     

酸浆苦素B对活化多形核中性粒细胞化学发光及H_2O_2产生的影响

通过观察化学发光及检测H2O2产生，考察锦灯笼的主要成分酸浆苦素B（PhysalinB，PhB）对调理酵母多糖激活的多形核中性粒细胞（polymorphonuclearleukocyte，PMN）的影响。结果显示，不同浓度的PhB对活化的PMN化学发光呈剂量相关的抑制作用，同时对活化PMNH2O2的产生也有相同趋势的抑制作用。提示锦灯宠抗炎机理可能是抑制PMN氧自由基的产生和释放而发挥作用。     

回阳生肌膏提取物对人慢性皮肤溃疡创缘成纤维细胞体外促增殖研究

目的:观察回阳生肌膏水、醇提取物对人慢性皮肤溃疡创缘成纤维细胞(uHFB)增殖的影响,并探讨其对c-fos、c-myc表达的影响.方法:组织块法培养uHFB;alarmar blue摄入法检测回阳生肌膏水、醇提取物对uHFB的增殖作用;免疫细胞化学方法检测二者对c-fos、c-myc表达的影响.结果:与对照组比,回阳生肌膏醇、水提取物分别在0.027～0.213 mg/L和0.15～1.2 mg/L浓度范围内对uHFB有促增殖作用(P＜0.05或P＜0.01);醇提物组c-fos蛋白在2 h达峰值,水提物组c-fos蛋白在1-3 h内持续增加至醇提物组2 h时水平;水、醇提物组c-myc蛋白在2-3 h内均增加,但醇提物组的表达强度高于水提物组.结论:回阳生肌膏可能通过上调核转录因子表达正向调控修复细胞增殖,加速创面愈合.     

回阳生肌膏对慢性皮肤溃疡成纤维细胞c-fos、c-myc表达的影响

慢性皮肤溃疡缠绵难愈，治疗棘手，其发生发展与成纤维细胞增殖障碍有关。多年来有关其发病机理以及成纤维细胞的增殖与修复为国内外研究的热点。目的：建立慢性皮肤溃疡创缘成纤维细胞（uHFB）细胞系，观察回阳生肌膏水、醇提取物对成纤维细胞增殖的影响，并探讨c-fbs、c-myc及增殖细胞核抗原（PCNA）表达在回阳生肌膏调控创面愈合中的信号转导作用。方法：组织块法培养并建立uHFB细胞系；alarmar blue摄入法检测回阳生肌膏水、醇提取物对uHFB的增殖作用；免疫细胞化学法检测回阳生肌膏水、醇提取物对uHFB c-fos、c-myc及PCNA表达的影响。     

血余蛋黄油对表柔比星致慢性皮肤溃疡疮面愈合及氧化应激反应调节作用的实验研究

目的 探讨血余蛋黄油对表柔比星致小鼠表皮溃疡及疮面氧化应激反应的影响.方法 Balls/c雄性小鼠72只,表柔比星2 g/L皮内注射制备慢性皮肤溃疡动物模型,随机分为4组:模型组、重组人表皮细胞生长因子组(生长因子组)、维生素E衍生物Trolox组(Trolox组)、血余蛋黄油组,每组18只,隔日换药1次直至溃疡愈合,造模后第13天、第27天每组各取材6只,另设正常对照组10只.采用Image Pro-plus图像软件分析疮面面积,分光光度计法检测疮面组织超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物(MDA)水平,HE、Massen、天狼星红染色观察疮面组织形态学及胶原变化.结果 血余蛋黄油能够促进疮面结痂,缩短溃疡愈合时间,平均愈合时间由对照组的29.75 d缩短至26.16 d,与生长因子组26.29 d接近;并能够促进溃疡疮面的表皮细胞及胶原修复;造模后13 d疮面组织氧化应激损伤明显,SOD活力为(9.67±2.80)U/mg,MDA为(15.48±3.72)gunol/g,血余蛋黄油治疗后SOD活力提高为(16.64 4-5.20)U/mg,MDA水平降低为(10.86±1.30)μmol/g,与对照组比较差异显著,P<0.050造模后27 d疮面组织基本愈合,各组SOD活力及MDA水平接近正常水平.结论 血余蛋黄油能够促进皮肤溃疡小鼠疮面结痂,缩短愈合时间;其作用机制与其能够促进疮面表皮细胞及胶原修复,降低疮面组织脂质过氧化损伤,提高抗氧化能力有关.     

桂皮醛对小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子β1表达的影响

目的 研究桂皮醛刺激小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白在不同时相点表达的规律,探讨桂皮醛促进成纤维细胞增殖及胶原合成的机制.方法 采用MTT法观察不同质量浓度桂皮醛对NIH3T3细胞增殖的影响;利用羟脯氨酸(Hyp)测试法测定细胞上清中胶原水平;利用免疫细胞化学技术检测桂皮醛对NIH3T3细胞bFGF、TGF-β1蛋白表达的影响.结果 桂皮醛作用NIH3T3细胞48 h后,细胞增殖速度和细胞上清中的胶原量均较对照组明显增加.桂皮醛刺激后,bFGF和TGF-β1蛋白表达增加,其中bFGF蛋白表达高峰在18 h,TGF-β1蛋白在刺激后12 h达到峰值.结论 桂皮醛可以上调内源性生长因子bFGF、TGF-β1蛋白的表达,这可能是桂皮醛体外促进NIH3T3细胞增殖及胶原合成,以及在创伤愈合、组织修复方面发挥作用的分子生物学机制.     

中药珠香散治疗慢性难愈合性下肢溃疡的临床研究

慢性难愈合性下肢溃疡是临床常见病,易反复发作,经久难愈,给患者带来极大痛苦。西医治疗本病多采用局部或全身抗菌药物,而抗菌药对细胞的增殖、分化有抑制作用,延缓伤口愈合。中药治疗本病有其独特的优势,通过化腐生肌、活血生肌等不同途径促进溃疡愈合。中药珠香散是我院多年临床实践的总结,对慢性难愈合性下肢溃疡有显著疗效,现归纳总结如下。一、资料和方法 1.病例选择标准:凡由下肢静脉曲张及外伤