人卵巢颗粒细胞分离培养的优化及生物学特性

目的:建立原代人卵巢颗粒细胞(hGCs)的分离培养方法,观察其生物学特性。方法:取卵日,收集hGCs,分为对照组(DMEM培养基)和实验组(DMEM培养基∶卵泡液=1∶1)进行培养。比较2组hGCs的生长状态和雌激素分泌情况。利用RT-qPCR检测Nanog、Oct4、Sox2的表达,应用流式细胞术检测CD44、CD73、CD45的表达。结果:hGCs培养24 h贴壁良好,细胞间伸出伪足。对照组和实验组分别在培养14 d和21 d后出现凋亡。实验组雌激素的分泌显著增加,第9天出现高峰,第21天显著下降。培养第7天实验组Oct4和Nanog mRNA表达显著增加。培养7 d后,CD44、CD73表达阳性, CD45表达阴性。结论:该方法简单、有效,可获得大量hGCs。培养基中添加卵泡液有益于hGCs的生长,增加培养天数。同时hGCs可分泌雌激素并具有一定的干细胞特性。     

白藜芦醇干预缺血后处理对受损H9C2心肌细胞修复的研究

目的近年来研究发现白藜芦醇（Resveratrol,RSV）具有抗氧化、清除自由基、减轻缺血再灌注损伤等作用。将其与减轻缺血再灌注损伤的主要手段——缺血后处理（Ischemic Postconditioning,IPO）相结合,共同作用于体外培养的H9C2心肌细胞受损模型。方法采用免疫细胞化学、western blot以及RT-PCR等方法,观察这种共同作用对体外培养的H9C2心肌细胞受损模型细胞增殖的影响。结果 p38表达量随着RSV＋IPO的干预和时间的延长而增加;通过直观和检测cyclinA2发现H9C2细胞数量因加入干预手段有所增加,cyclinA2的表达量也有相同趋势。结论研究结果表明,该方法不仅可以抑制细胞凋亡,更具有促进细胞增殖的作用。     

原花青素联合缺血后处理对H9C2心肌细胞的保护作用

目的观察原花青素(procyanidine,PC)与缺血后处理(ischemic postconditioning,IPO)联合干预H9C2心肌细胞,对其凋亡率及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(P-p38MAPK)的作用。方法将培养的H9C2心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(IPO组)、原花青素+缺血后处理组(PC+IPO组)。利用AO-EB染色法检测H9C2心肌细胞的凋亡率;利用Western blotting方法检测H9C2心肌细胞P-p38MAPK蛋白表达情况。结果对细胞凋亡率的影响:IPO单独和联合PC干预H9C2心肌细胞0、12h、24h后,各时间点IPO组和PC+IPO组细胞凋亡率均低于I/R组(P<0.01)。12h时,PC+IPO组细胞凋亡率低于IPO组(P<0.05)。对P-p38MAPK表达的影响:12h时,I/R组表达高于C组(P<0.01);PC+IPO组和IPO组表达低于I/R组(P<0.01),同时PC+IPO组低于IPO组(P<0.05)。结论 IPO单独和联合PC干预均可通过减少心肌细胞凋亡起到心肌保护作用,并且PC联合IPO更有效。该保护作用机制可能与抑制p38MAPK有关。     

NIMA相关蛋白激酶7、Nod样受体蛋白3与多囊卵巢综合征炎症指标相关性研究

目的探讨卵巢颗粒细胞中NIMA相关蛋白激酶7(NEK7)和Nod样受体蛋白3(NLRP3) mRNA表达量与多囊卵巢综合征(PCOS)患者炎症指标的相关性及其预测价值。方法选取2018年8月至2019年3月来山西省儿童医院/山西省妇幼保健院生殖中心就诊的30例PCOS患者为研究组和同期由于男方因素或输卵管因素就诊的34例非PCOS不孕症患者为对照组。取卵日收集行IVF/ICSI-ET患者的卵泡液和颗粒细胞,检测卵泡液中炎症因子白介素(IL)-1β、IL-18的表达以及颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达,并将NEK7、NLRP3的mRNA表达量与各指标进行相关性分析。最后应用受试者工作特征曲线(ROC)分析NEK7、NLRP3 mRNA对PCOS的预测价值。结果研究组体重指数(BMI)和获卵数显著高于对照组,且LH、LH/FSH、睾酮(T)水平亦显著高于对照组(P均<0.05)。研究组卵泡液中炎症因子IL-1β、IL-18的表达显著高于对照组,卵巢颗粒细胞中NEK7、NLRP3 mRNA的表达亦显著高于对照组(P均<0.05)。相关性分析结果显示,研究组患者卵巢颗粒细胞中NEK7和NLRP3 mRNA水平与血清基础LH、LH/FSH、炎症因子IL-1β、IL-18均呈显著正相关(P均<0.05)。ROC分析结果显示,NEK7是PCOS的有效预测因子,预测炎症的曲线下面积为0.741,临界值为1.154。结论 NEK7、NLRP3可能通过促进IL-1β、IL-18的释放影响PCOS炎症的发生及发展,且NEK7是PCOS的有效预测因子,可能为PCOS的临床治疗提供新思路。     

黄体中期降调节后睾酮水平在体外受精-胚胎移植治疗中的意义

<正>随着体外受精(IVF)技术的成熟及广泛使用,降低控制性超促排卵中促性腺激素(Gn)的用量、获得更多的成熟卵泡及更多的优质胚胎是大家追求的目的。如何有效预测卵巢的反应性,更好地指导促排卵的Gn用量是大家一直探讨的话题。曾有学者认为血清睾酮(T)水平与年龄、卵泡刺激素/黄体生成素(FSH/LH)比值以及超促排卵取卵数等卵巢储备评估指标有关联[1],但降调节后的睾酮水平与前述指标的关系尚     

经会阴骶前引流配合肠内营养治疗Dixon术后吻合口瘘

我国直肠癌发病率较高,其中低位直肠癌约占65%～75%[1],由于TME(全直肠系膜切除)技术的普遍实施,低位直肠癌的保肛率有了很大的提高,但是低位直肠癌保肛手术中吻合口瘘的发生率约为7%～11%[2].     

不同预处理对远志种子萌发的影响

目的:研究得出一种简便易行的促进远志种子萌发的方法.方法:药剂处理为用6-BA、H2O2、KMnO4、H2O和GA3对远志种子进行浸泡处理,低温冷冻处理为将远志种子放置冰箱冷冻(-6～-10℃),冷冻时间分别为1,3,5,7,9 d.结果:不同药剂处理对当年收远志种子萌发的启动日影响不大,高峰有不同程度的提前,其中以H2O处理的种子萌发高峰出现的最早,种子的萌发率以1.0 mg·L-1 6-BA为最高;但隔年远志种子,其启动日、高峰日和发芽率并没有明显变化,发芽率均低于25%.不同冷冻时间处理的当年采收种子,萌发的启动日没有明显变化,其发芽率较对照均有提高,但促进作用不大,冷冻3 d的效果最好,与对照相比,种子萌发的高峰日提前2 d,萌发率高8%;而隔年采收种子,萌发的启动日、高峰日和萌发率均明显好于对照,但其萌发率仍远远低于当年采收的种子.     

原花青素联合缺血后处理对H9C2心肌细胞的保护作用

目的观察原花青素（procyanidine,PC）与缺血后处理（ischemic postconditioning,IPO）联合干预H9C2心肌细胞,对其凋亡率及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（P－p38MAPK）的作用。方法将培养的H9C2心肌细胞分为正常对照组（c组）、缺血再灌注组（I／R组）、缺血后处理组（IPO组）、原花青素＋缺血后处理组（Pc＋IP0组）。利用A0－EB染色法检测H9c2心肌细胞的凋亡率;利用Westernb lotting方法检测H9C2心肌细胞P－p38MAPK蛋白表达情况。结果对细胞凋亡率的影响：IPO单独和联合PC干预H9C2心肌细胞0、12h、24h后,各时间点IPO组和PC＋IP0组细胞凋亡率均低于I／R组（P〈0．01）。12h时,PC＋IPO组细胞凋亡率低于IP0组（P〈O．05）。对P—p38MAPK表达的影响：12h时,I／R组表达高于C组（P〈0．01）;PC＋IPO组和IPO组表达低于I／R组（P〈0．01）,同时PC＋IPO组低于IP0组（P〈0．05）。结论IPO单独和联合PC干预均可通过减少心肌细胞凋亡起到心肌保护作用,并且PC联合IP0更有效。该保护作用机制可能与抑制p38MAPK有关。     

重症急性胰腺炎病人肠外营养的护理

重症胰腺炎（SAP）是外科的危重病人，并发症多，病死率高，表现为以能量消耗、糖异生、蛋白质降解和尿素氮升高为特征的高代谢状态。SAP病人由于肠道缺血、腹腔感染，肠壁水肿、粘连等，使消化道消化、吸收、分泌和蠕动能力受损。因此需要长期禁食。禁食时间长易导致营养不良及低蛋白血症。笔者将肠外营养（PN）应用于SAP病人治疗中，在护理上积累了较丰富的经验，现总结如下。[第一段]     

早期炎性肠梗阻肠外与肠内营养的护理

早期炎性肠梗阻（EPII）是术后常见的肠梗阻，多发生于早期，系指由于腹部创伤或腹腔内炎症等原因导致肠壁水肿和渗出，形成一种机械性与动力性同时存在的粘连肠梗阻。EPII病程在1个月左右，患者需长期禁食，患者多伴有消瘦、营养不良和低蛋白血症。仅靠普通静脉输液很难纠正营养不良状况，因此，应及时给予营养支持。早期应用肠外营养（PN）支持治疗，不仅能改善患者的营养，而且能抑制消化腺分泌，使胃肠分泌量减少50％-70％。减轻了梗阻近端肠液的淤积和肠壁扩张，有利于肠壁水肿消退，加快肠道再通。待患者肠功能恢复后及时转为肠内营养（EN）支持治疗。我们应用PN和EN治疗EPII患者24例，并取得满意效果，在护理中积累了经验。