Egr-1基因剔除减少炎性相关因子在实验性胰腺炎中的表达

目的：探讨Egr-1基因剔除对实验性胰腺炎小鼠胰腺组织中炎性相关因子表达的影响。 〖HTH〗方法：利用Egr-1基因剔除小鼠，采用大剂量雨蛙素诱导的实验性胰腺炎模型，观察Egr-1基因剔除后，胰腺组织水肿、MPO水平、血清淀粉酶水平、肺组织MPO水平的改变。并利用定量PCR的方法，检测胰腺组织中炎症相关因子组织因子（TF）、纤维蛋白溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）、单核细胞趋化吸引蛋白1（MCP-1）、Gro-1、IL-6和细胞间黏附分子-1（ICAM-1） mRNA的表达。 〖HTH〗结果：Egr-1基因剔除小鼠胰腺组织水肿明显轻于野生型，但组织MPO水平与血清淀粉酶与野生型组间相比无明显差异；肺组织MPO水平明显低于野生型。定量PCR检测结果表明， Egr-1基因剔除组，胰腺组织中TF、PAI-1，以及MCP-1、ICAM-1和IL-6　mRNA的表达，明显少于野生型组。 〖HTH〗结论：Egr-1基因剔除可明显减轻急性胰腺炎的严重程度，其作用可能通过减少胰腺组织中TF、PAI-1，以及MCP-1、ICAM-1和IL-6的表达而实现。     

体外拼装凋亡素基因

目的 以凋亡素基因为例,探讨用寡核苷酸片段体外拼装基因的方法。方法 按已知的凋亡素基因序列(GeneBank登录号:AY171617),设计40bp的凋亡素基因寡核苷酸片段,并将其中的172位(BglII,agatct→agatcc)和306位碱基(HindIII,aagctt→aatcct)进行同义突变,Taq消除这两个酶切位点。在pfu酶的PCR系统中,对寡核苷酸片段进行拼装和扩增。产物稀释后进一步纯化扩增,在Tag酶存在的条件下对产物两末端加T,然后TA克隆于pGEM-Teasy载体中。阳性克隆经测序鉴定。结果 凋亡素基因寡核苷酸片段第1次PCR拼装后,产物呈拖尾状。但产物经进一步稀释,并用两未端引物进行2次扩增后,即可见明确的产物带及其他梯形带状产物。目的产物TA克隆后,筛选得到阳性克隆,其经测序鉴定,与设计的凋亡素基因序列完全一致。结论 体外基因拼装法是一种非常有效的基因克隆方法,可用于基因或载体的合成,及一次性对基因进行广泛的突变。     

Egr-1基因剔除对雨蛙素诱导小鼠胰腺炎的影响

目的:探讨Egr-1在实验性胰腺炎发病中的作用.方法:利用Egr-1基因剔除小鼠,采用大剂量雨蛙素诱导的实验性胰腺炎模型,观察Egr-1基因剔除后,胰腺组织水肿,组织髓过氧化物酶(MPO)水平,血清淀粉酶水平,肺组织MPO水平,以及胰腺与肺组织学改变.结果:与野生型相比,Egr-1基因剔除小鼠胰腺组织水肿明显减轻[(166.0±13.5)%vs(132.3±17.7)%,P＜0.05],但组织MPO水平与血清淀粉酶与野生型组间相比无明显改变;肺组织MPO水平与野生型组相比明显降低[(168.1±41.7)%vs(274.0±98.7)%,P＜0.05].在组织学上,Egr-1基因剔除组胰腺和肺组织学明显改善,但胰腺腺泡仍有空泡变性及轻度肿胀.结论:Egr-1基因剔除可明显减轻实验性胰腺炎胰腺和肺组织的损伤.     

两种方法治疗类风湿性关节炎效果分析

目的客观评价寒痹康胶囊治疗类风湿性关节炎的疗效及安全性。方法类风湿性关节炎患者100例，按治疗方法不同分为：中西医结合治疗组（观察组）50例，年龄35～56岁；病程0．5～5年；西医治疗组（对照组）50例，年龄37～58岁；病程0．8~6年。观察组用寒痹康胶囊治疗，对照组用西药（尼美舒利）治疗，两组均以4周为1个疗程，观察2组疗效及有无不良反应。结果观察组治愈率、显效率、有效率均明显高于对照组（P〈0．05），无效率明显低于对照组（P〈0．05），观察组总有效率88．0％明显高于对照组70．0％（P〈0．05）；2组治疗后ESR、CRP、RF、IgG、IgA和IgM含量均低于治疗前（P〈0．05）；观察组治疗前后差值明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01）；对照组不良反应者15例（32．0％），观察组3例（6．0％），观察组较对照组不良反应发生率低（P〈0．01）。结论寒痹康胶囊治疗类风湿眭关节炎安全有效，减少不良反应发生。