类风湿关节炎患者RANTES及MCP-1的测定及其意义

目的 研究类风湿关节炎（RA）患者血清、关节滑液中调节活化正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）及单桂细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达水平，探讨其在RA致病中的作用。方法 用酶联免疫吸附法（ELISA）测定27例类风温关节炎患者血清及病变膝关节滑液中RANTES、MCP-1水平，井与外伤截肢者对照。结果 RA患者血清及滑液中RANTES、MCP-1水平明显高于时照组，且RA滑液中RANTES水平高于血清。结论 以上研究结果提示RA病变关节组织是RANTES产生的主要部位。     

重症手足口病患者气管插管吸出液中肠道病毒71型的分离与鉴定

目的分离鉴定重症手足口病患者气管插管吸出液标本的EV71病毒株。方法将采集的标本过滤除菌接种于MA104细胞,出现细胞病变效应(CPE)后提取培养上清液中的RNA,用国家标准检测引物进行RT-PCR鉴定;用特异性引物进行PCR获得VP1全序列,测序后以MEGA4软件与各血清型代表株VP1序列进行分析并构建分子进化树。结果接种标本3 d后细胞出现CPE,经RT-PCR鉴定为EV71,对其VP1全序列进行测定分析后,确定其为C4亚型,并绘制了分子进化树。结论手足口病患者下呼吸道分泌物EV71的分离鉴定,为手足口病肺损伤发病机制的研究提供了依据。     

护理本科生学习动机的研究

目的通过对护理专业本科生的学习动机进行调查分析,进而为提高学生的学习效果,实现教育目标提供建议。方法采用学习动机问卷对237名护理本科生进行调查,并分析其求知、发展、竞争或提升、职业、交往和表现动机6个因素。结果护理本科生学习动机中较强的4个因素分别为发展动机、职业动机、求知动机、交往动机;在职业动机比较中,北京地区的学生均显著高于外埠学生;表现动机的比较中,非独生子女的显著高于独生子女的。结论护理本科生注重个人的发展,也有为社会奉献的想法。但更加注重实用,关注当前,缺乏远景学习动机。建议学校进行学习目的教育,适当介绍护理专业的现状和前景,培养学生强烈的求知欲和浓厚的学习兴趣。     

烧伤瘢痕、先天畸形和美容手术患者的医学应对方式比较

随着医学模式的转变,医学研究已从单纯的生物模式转换为生物-心理-社会医学模式。由于整形和美容手术患者的病因和就医目的不同,心理的创伤程度和治疗的期待值有巨大的差异。特别是烧伤瘢痕和先天畸形患者的病变多在暴露部位,心理问题更为突出。本研究通过对不同类型的整形和美容外科手术患者的应对方式调查,了解手术患者对相关疾病的认知评价,为不同手术制定更加合理的心理干预及心理护理提供科学依据。1资料与方法1.1研究性质描述性研究1.2研究对象随机抽取中国医学科学院整形外科医院2004年8月至2005年1月住院1周以上的手术患者共158例,…     

呼吸道合胞病毒跨膜蛋白研究进展

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)属副粘病毒科肺病毒属,是引起小儿病毒性肺炎最常见的病原,其跨膜蛋白包括融合性F蛋白、吸附性G蛋白和小疏水SH蛋白,它们在病毒的吸附、穿入中具有重要作用,F和G蛋白还是刺激机体免疫应答的主要抗原,因此在疫苗研制中具有重要意义.     

不同毒力EV71济南分离株全基因组序列比较分析

目的研究EV71济南分离株的基因特点,寻找潜存的EV7l毒力决定位点。方法将6株EV71济南分离株（JN200803、JN200804、Jinanl002、Jinanl004、Jinan1005和Jinan1006株）分别接种1d龄BALB／c小鼠,确定其对小鼠的致病性程度。对6株EV71全基因组核苷酸、氨基酸序列进行比较,对非编码区进行RNA二级结构的预测和分析,对VPl区进行遗传进化分析。结果通过动物实验可将6株EV71济南分离株分为强、中、弱毒力株。小鼠感染强毒株（JN200804、Jinan1002、Jinanl004、Jinanl005株）的主要症状为后肢麻痹并死亡,感染弱毒株（Jinanl006株）的主要症状为后肢麻痹但能自愈,感染无毒株（JN200803株）未引起明显症状。不同毒力EV71分离株全基因组序列比对发现,共有40个核苷酸位点的差异,导致编码区8个氨基酸突变,其中第937位氨基酸（位于2A片段）在强毒株、弱毒株和无毒株间发生了连续突变（937aa：S→C→G）。非编码区RNA二级结构预测表明,5’UTR第115位核苷酸突变对内部核糖体进入位点（IRES）的结构有较大影响。遗传进化分析显示,与同内2003年以后的流行毒株相同,6株EV71济南分离株均属C4亚型的C4a进化分支。结论全基因组序列比较分析发现不同毒力EV71济南分离株之间存在差异位点,为采用反向遗传学方法鉴定EV71毒力决定位点奠定了基础。     

轮状病毒外壳蛋白VP4在大肠埃希菌中的表达

目的 克隆表达轮状病毒融合素蛋白VP4.方法 以轮状病毒SA11株细胞培养物提取总RNA为模板,经RT-PCR获得VP4全长基因片段cDNA,将其重组于pET-30a(+)表达载体,转化大肠埃希菌BL21(plysS),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定,并用镍柱纯化.结果 重组载体所含目的基因片段的序列与文献公布序列相符,IPTG诱导表达的目的蛋白主要以包涵体形式存在;SDS-PAGE检测表达产物与目的蛋白大小一致,为88 kD,Western blot检测发现目的蛋白所带组氨酸标签可与标签抗体反应;镍柱纯化获得RV SA11 VP4融合素蛋白,纯度达90%.结论 构建了表达载体pET-30a(+)-VP4,经诱导表达、纯化,获得了RV融合素蛋白VP4.     

重组腺病毒HBV preS2/S-AD5的构建及生物安全性初步研究

目的   构建重组腺病毒HBV preS2/S-AD5，并对其生物安全性进行初步评价 。 方法   应用clontech公司的第一代腺病毒载体构建重组腺病毒质粒HBV preS2/S-AD5，酶切线性化后分4次用脂质体方法转染HEK293细胞包装成复制缺陷型腺病毒HBVpreS2/S-AD5，分别命名为N1～4。扩增并滴定毒力后,接种Hep2、Hela和A549细胞，观察HBV preS2/S-AD5在非容许细胞的增殖情况；同时，用N1～4分别鼻腔接种SPF级BALB/C小鼠，每日观察小鼠一般情况，第10d取小鼠重要组织并用福尔马林固定，做病理学检查。  结果    4株重组腺病毒HBVpreS2/S-AD5第1代N1、第4代N2、第6代N3、第8代N4株接种的细胞未见病变，接种的小鼠无一般状况改变，组织病理也未见任何改变；而第11代N1株重组腺病毒能在非容许细胞增殖并致细胞病变，接种的小鼠出现严重腹泻，并且小鼠肠、肺组织有明显的病理改变。  结论   本实验室构建的重组腺病毒 HBV preS2/S-AD5有突变为复制型腺病毒的现象，并可导致小鼠出现腹泻和轻型肺部炎症。