灵芝孢子油干预治疗6-羟多巴帕金森病大鼠模型的实验研究

[目的]研究灵芝孢子油对6-羟多巴(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型行为学及病理改变的影响,探讨该药对黑质多巴胺能神经元的保护作用.[方法]100只SD大鼠随机分为正常对照组20只、6-OHDA组40只、灵芝孢子油 6-OHDA组40只.通过脑部立体定向法将6-OHDA注射到SD大鼠一侧黑质致密部建立6-OHDA大鼠PD模型,灵芝孢子油 6-OHDA组在造模前3 d开始给灵芝孢子油每天500 mg/kg,连续10 d.6-OHDA组喂食生理盐水做对照.造模后每周给予阿朴吗啡观察大鼠旋转行为的变化,4周后用高效液相色谱法检测大鼠纹状体多巴胺及其代谢物含量,免疫组织化学法检测黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数量,western blot法对TH蛋白进行半定量测定.[结果]①灵芝孢子油 6-OHDA组出现旋转行为的大鼠比例为10%,6-OHDA组为45%,两组比较有显著性差异.②纹状体多巴胺及其代谢物含量在两组间存在差异,多巴胺手术侧含量/手术对侧含量在灵芝孢子油 6-OHDA组为(60.12±7.5)%,在6-OHDA组为(38.58±7.26)%.③在黑质致密带区灵芝孢子油 6-OHDA组的TH免疫阳性细胞及TH蛋白表达量均较6-OHDA组显著增多.[结论]灵芝孢子油能明显改善6-OHDA大鼠模型行为学,增加纹状体多巴胺及其代谢物含量并提高黑质多巴胺能神经元的残存率,提示灵芝孢子油可能具有减缓PD病变进程的神经保护作用.     

CLN5基因复合杂合突变致青少年型神经元腊样脂褐质沉积症的临床特征及基因分析

目的报道及分析CLN5基因复合杂合突变致青少年型神经元腊样脂褐质沉积症(JNCL)患者的临床特征和基因突变类型。方法观察分析1例JNCL病人的临床表现、影像学、脑电图改变,进行全外显子组基因测序,并对其家庭成员进行相关基因检测和临床检查。结果患者于6岁开始视力减退及智力倒退,9岁出现肌阵挛发作、行走不稳。头颅MRI显示小脑明显萎缩,大脑皮质和脑干轻度萎缩。视频脑电图显示弥漫性2.5~3.5 Hz慢活动及颞区尖波。全外显子测序发现患者CLN5等位基因上1个来源于父亲的错义突变:exon2 c.376TC,以及1个来源于母亲的无义突变:exon3 c.595 CT。患儿父亲及弟弟均有c.376 TC突变,两人体查均发现水平性及旋转性眼震,该位点突变目前尚未见报道。结论 CLN5基因c.376TC和c.595CT的复合杂合突变可以引起JNCL临床症状、影像学和脑电图改变。对于NCL可疑病例应该对患者及家族成员及早进行相关基因测序明确其基因型,并实施生育指导。     

6-羟基多巴大鼠中脑腹侧部Bcl-2、Bax mRNA表达及灵芝孢子油的调节作用

目的研究6-羟基多巴(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型中脑腹侧部凋亡调控基因的表达情况,探讨灵芝孢子油对6-OHDA引起的黑质区神经元凋亡的调节作用。方法SD大鼠被分为3组,组1:6-OHDA组、组2:灵芝孢子油+6-OHDA组、组3:正常对照组。通过脑部立体定向法将6-OHDA注射到组1和组2大鼠一侧黑质致密部建立大鼠PD模型。组2在造模前3天开始喂食灵芝孢子油500mg/(kg.d),连续10天,组1喂食生理盐水做对照。造模后10天取中脑腹侧组织,用荧光RT-PCR法检测Bcl-2、BaxmRNA表达量,Westernblot法检测Bcl-2蛋白含量。结果①半定量RT-PCR结果显示组1BaxmRNA的表达量比组3增多,而Bcl-2mRNA的表达量无明显变化,组2BaxmRNA的表达量比组3下降、Bcl-2mRNA的表达量增多,组1组2间比较有差异。②Western结果显示组2BcL-2蛋白相对含量比组1和组3增高,组组间比较差异显著。结论6-OHDA大鼠中脑腹侧部Bax表达增强,灵芝孢子油能有效地降低其表达,并使Bcl-2表达增加。     

皮质下缺血性脑血管病患者脑萎缩程度与认知功能的相关性研究

目的 探讨皮质下缺血性脑血管病(SIVD)患者不同脑区脑萎缩程度与认知功能的相关性。方法 收集2018年6月至2021年4月在广州医科大学附属第二医院神经内科住院的年龄≥60岁SIVD患者570例，根据全脑萎缩程度分为无萎缩组27例、轻度脑萎缩组207例、重度脑萎缩组336例。采用简易智能状态检查量表(MMSE)对认知功能进行评估。结果 重度脑萎缩组年龄明显高于无萎缩组和轻度脑萎缩组(P<0.05)。重度脑萎缩组记忆力、注意力和计算力明显低于轻度脑萎缩组，定向力、回忆能力、语言能力、MMSE总分明显低于无萎缩组和轻度脑萎缩组(P<0.05)。高龄(95%CI:1.004～1.059,P=0.022)、重度脑萎缩(95%CI:1.943～39.234,P=0.005)是SIVD患者发生认知功能障碍的危险因素。结论 SIVD患者脑萎缩程度与认知功能有关，脑萎缩程度高会增加SIVD患者发生痴呆的风险。     

过表达Nurr1基因的骨髓间充质干细胞的诱导及移植治疗帕金森病的研究

目的:探讨Nurr1基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,rMSCs)脑内移植对帕金森病(parkinsondiseasePD)大鼠的治疗作用。方法:用脂质体转染法转染PcDNA3.1(+)-Nurr1入rMSCs并稳定表达.然后移植大鼠PD模型纹状体内;观察行为学变化并用免疫组化、RT-PCR等方法检测移植细胞的Nurr1、DAT和TH表达;利用高效液相色谱检测多巴胺(DA)、二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量。结果:Nurr1-rMSCs组和rMSCs组移植治疗8周内PD大鼠旋转行为均得到一定的改善(P<0.05);移植后2～4周Nurr1-rMSCs组较rMSCs组改善程度更为显著(P<0.05),但第8周时二组行为学差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化显示Nurr1-rMSCs能够稳定表达Nurr1且少量细胞表达DAT,但未发现TH阳性细胞。而rMSCs组和对照组则均未发现有Nurr1、DAT、TH表达;RT-PCR检测显示移植后2～8周,Nurr1-rMSCs组移植区有Nurr1和DATmRNA表达,但未发现THmRNA表达;两治疗组DA、DOPAC和HVA含量均较对照组增高(P<0.05)。结论:Nurr1基因转染大鼠骨髓间充质干细胞移植大鼠纹状体可以在一定时期内存活并有效表达,同时可提高纹状体DA含量,改善模型鼠症状,为治疗PD的研究提供了实验依据。     

脑梗塞与院内感染的初步探讨

目的：探讨脑梗塞与院内感染两之间的关系。方法：采用回顾性调查方法,系统全面地阅读病历,确认院内感染,填写院内感染调查表。结果：脑梗塞院内感染发生率17．97％,明显高于献报道的7．74％,是我院平均院内感染率7.37%的2．44倍,其中重症脑梗塞（伴意识障碍）患院内感染率79．55％,感染部位主要呼吸道,占57．95％;其次泌尿道占14．77％;第三消化道占13．07％;第四皮肤软组织感染占11．93％,脑梗塞院内感染发生时机;平均发生在住院后10．26天,3－14天内发生在266例占75．57％。住院时间1周,院内感染累计发生率10．72％,住院时间2周,院内感染累计发生率13．58％,住院时间3周,院内感染累计发生率16．23％,住院时间4周和4周以上,院内感染累计发生率17．97％,院内感染后脑梗塞死亡数51,占脑梗塞全部病人死亡数62．20％,院内感染后脑梗塞死亡率16．04％,较无院内感染脑塞死亡率1．89%有明显增加（P＜0．0001）。病史中有糖尿病的脑梗塞患的院内感染率为79．58％,无糖尿病的脑梗塞患院内感染率为11．31％,两在统计学上有显差异性（P＜0．001）。结论：脑梗塞是院内感染的高发人群,院内感染主要以呼吸道为主,随着住院时间的延长,其累计发生率有明显增加趋势,有糖尿病的脑梗塞患更易致院内感染,感染后直接影响病人的治疗效果及预后,表明脑梗塞患特别是有糖尿病史的脑梗塞患应列入院内感染重点监测对象,有效地预防和治疗院内感染将有望于降低脑梗塞的死亡率。     

MPTP所致帕金森病模型黑质区TNF-α、IL-1 β的表达及灵芝孢子油的调控作用

目的 研究1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病模型中脑黑质区的免疫应答情况,探讨灵芝孢子油对MPTP引起的神经炎症反应的调节作用.方法 C57BL 小鼠分为MPTP组(组1)、灵芝孢子油 MPTP组(组2)、正常对照组(组3).组1皮下注射MPTP 30 mg/kg,连续6 d.组2在注射MPTP前两天开始鼻饲灵芝孢子油每日1.5g/kg,连续8 d.于末次注射MPTP后第8天用Western免疫印迹法检测中脑腹侧部肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白含量;用荧光半定量RT-PCR法检测中脑腹侧部TNF-α、白细胞介素-1 β(IL-1β) mRNA表达量.结果 ①TNF-α蛋白的相对含量:组1比组3明显增多,组2比组3略高,三组组间比较有明显差异(P＜0.01).②TNF-α mRNA、IL-1 β mRNA的表达量:组1比组3明显增高,组2比组3减少,组1与组2比较有显著性差异.结论 MPTP所致帕金森病模型黑质区炎症因子表达明显增高,灵芝孢子油能有效下调MPTP引起的神经炎症反应.     

美满霉素对脂多糖诱导帕金森病模型多巴胺能神经元保护作用的研究

目的 探讨美满霉素（Mino）对脂多糖（LPS）诱导小胶质细胞（Mic）激活的抑制作用和对黑质多巴胺能（DA）神经元的保护作用。方法 20只雄性SD大鼠随机分为单纯LPS干预组和LPS＋Mino干预组（n=10）。并设5只生理盐水注射作为对照组。于不同时间点观察各组大鼠行为学改变．并采用免疫组织化学、原位杂交、Western blot等方法观察Mic的激活情况以及酪氨酸羟化酶（TH）神经元、mRNA、蛋白的表达水平。结果 LPS＋Mino组在LPS诱导后7d、14d的旋转次数均较单纯LPS组明显减少：两组均以激活型Mic为主，LPS＋Mino组“阿米巴样”Mic数目较单纯LPS组明显减少，尚存有少许“分枝样”Mic；LPS诱导后两组术侧中脑OX-42蛋白水平较对照组均明显增高。LPS＋Mino组增加水平显著低于单纯LPS组（P〈0．01）；2组术侧中脑TH阳性神经元数量、mRNA、蛋白水平均较对照组明显下降，单纯LPS组下降水平显著高于LPS＋Mino组（P〈0．01）。结论 Mino干预可显著抑制LPS诱导的Mic激活，减轻LPS对黑质DA能神经元的毒性作用。     

广东中山古镇健康中老年人体质指数与血脂水平的流行病学研究

目的 探讨体质指数(BMI)和肥胖率以及血脂变化趋势。方法 分别于1992年和1996年在广东中山古镇进行了两次心脑血管病危险因素的调查。结果 调查显示：人群BMI和肥胖率均以1996年为高，呈上升趋势且上升幅度明显；人群TC和LDL—C水平及异常率呈下降趋势；HDL—C亦有所下降，但仍高于全国水平，特别是45—54岁的男性TG异常率有所升高；多元线性逐步回归方程所示：BMI与腰围＼臀围(WHR)、TG、SBP呈正相关。结论 保持适中的体重成为当前预防心脑血管病重点之一，同时继续加强对高脂血症者的预防及控制仍十分必要。