Adipophilin通过PI3K/Akt通路促进细胞内脂质蓄积

目的:探讨adipophilin促进细胞内脂质蓄积的可能机制,为动脉粥样硬化的防治提供参考。方法:分别通过q PCR、Western blot和油红O染色观察氧化型低密度脂蛋白(ox LDL)处理RAW264.7细胞不同时间后,细胞内Akt、p-Akt和adipophilin的蛋白水平及脂质蓄积情况;并检测PI3K/Akt抑制剂LY294002处理后,上述指标的变化;HEK293细胞过表达adipophilin后,检测Akt的活性;并用免疫共沉淀实验检测adipophilin与Akt之间的相互作用。结果:ox LDL处理细胞后,随着时间的延长,脂滴增多,Akt被活化,adipophilin表达增加,而LY294002处理则可抑制上述变化;过表达adipophilin后,p-Akt水平增高,但adipophilin与Akt之间未见直接相互作用。结论:Adipophilin可通过PI3K/Akt途径促进细胞内脂质蓄积,但可能不是通过直接相互关系发挥作用的。     

Daxx与雄激素受体结合的功能片段筛选

目的体外筛选出能与雄激素受体具有相互作用的Daxx结构域。方法应用聚合酶链反应扩增Daxx四个不同功能结构域,分别连接到带有GST标记的原核表达质粒pGEX-6p-1中,构建Daxx四个功能结构域的原核表达载体。经测序鉴定转化E Coli.BL21DE3菌株,经氨苄青霉素筛选并扩增阳性克隆,用IPTG诱导蛋白表达后纯化蛋白,采用GST pu ll-down体外筛选出与雄激素受体具有相互作用的Daxx功能结构域。结果 Daxx不同功能结构域的四个原核表达载体pGEX-6p-1/Daxx/DM1-240、pGEX-6p-1/Daxx/DM241-501、pGEX-6p-1/Daxx/DM502-625和pGEX-6p-1/Daxx/DM626-740经琼脂糖凝胶电泳和DNA测序分析,证实插入质粒的片段大小正确,无读码框移位和突变。IPTG诱导后蛋白表达具有明显差异性,表达蛋白与预期表达蛋白质分子量大小相当。纯化蛋白进行GST pu ll-down实验结果显示Daxx与雄激素受体具有相互作用。结论 Daxx通过第626-740位氨基酸序列与雄激素受体相互结合。     

高职院校同伴评价在基础护理操作技能考核中的应用

目的探讨同伴评价在基础护理操作技能考核中的应用效果。方法将2017级大专护理专业150人随机分为观察组和对照组,观察组采用同伴评价考核法,对照组采用传统教师评价考核法,学期结束对两组护生的基础护理操作技能考核成绩进行比较,并通过自行设计的调查问卷对两组护生的考核方法进行评价比较。结果观察组护生的操作技能考核成绩高于对照组(P<0.05);观察组护生对考核方法的评价效果优于对照组(P<0.05)。结论同伴评价应用于基础护理操作技能考核中,可提高护生学习积极性、技能操作水平及对考核的满意度。     

复杂避障能力训练用于预防高龄老人跌倒的效果

目的:探讨复杂避障能力训练方法对预防高龄老人跌倒的效果。方法:将75岁以上社区高龄老人86名,随机分为复杂环境组(multiple组,以下简称M组)和单一环境组(single组,以下简称S组),M组41名,S组43名。两组共同参加运动体操和身体灵活性训练后,再分别参与不同的避障能力训练,M组参加复杂环境避障训练,S组参加单一环境避障训练,3个月后对训练效果进行评价。结果:两组试验前后运动机制比较,配对t检验结果:10m行走时间缩短(P<0.001),10m步数减少(P=0.01),5s双脚触地次数增加(P<0.001),下肢肌力增加(P=0.04)。重复测量双因素双水平方差分析结果:经过功能训练后M组通过单一环境时间缩短(P<0.01),通过复杂环境时间缩短(P<0.01);S组通过单一环境时间缩短(P<0.01),通过复杂环境时间缩短(P<0.01)。两组试验前后障碍物触及次数比较Wilcoxon检验结果:M组在单一环境(P=0.019)和复杂环境(P=0.001),试验后触及障碍物次数均显著减少,S组仅在单一环境试验后触及次数减少(P=0.002),两组比较,试验后通过复杂环境时触及次数存在显著差异,M组明显减少(P<0.001)。结论:复杂避障训练能提高高龄老人的运动功能和回避障碍物的能力,对预防高龄老人跌倒有较好的效果。     

日本血吸虫虫卵分泌物小 RNA的高通量测序

目的 通过对日本血吸虫虫卵分泌物（ ｅｇｇ ｓｅｃｒｅｔｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，ＥＳＰ） 的小 ＲＮＡ 进行高通量测序， 分析、鉴定已知 ｍｉＲＮＡ 的表达水平。 方法 提取日本血吸虫虫卵 ＥＳＰ ｍｉＲＮＡ 进行高通量测序；通过对数据 分析包括统计长度分布与比对注释，鉴定已知 ｍｉＲＮＡ 的表达水平。 结果 将构建文库中日本血吸虫虫卵 ＥＳＰ 表达的 ｍｉＲＮＡ 与最新 ｍｉＲＢａｓｅ 数据库中的 ｍｉＲＮＡ 比对，发现在鉴定的 １２ 个 ｍｉＲＮＡｓ 中，ｓｊａ － ｍｉＲ － ３４８８ 为表达量最高的 ｍｉＲＮＡ，其次为 ｓｊａ － ｍｉＲ － ３６ － ３ｐ 和 ｓｊａ － ｍｉＲ － ７１ａ，上述三种 ｍｉＲＮＡ 表达量占比 ９１ ８％ 。 结论 日本血吸虫虫卵 ＥＳＰ 三个 ｍｉＲＮＡｓ（ ｓｊａ － ｍｉＲ － ３４８８、ｓｊａ － ｍｉＲ － ３６ － ３ｐ 和 ｓｊａ － ｍｉＲ － ７１ａ） 的鉴定为下一步探寻血吸虫病诊疗新靶标奠定了基础。     

Daxx分子特性与应激

Fas死亡结构域相关蛋白（Fas death domain-associated protein, Daxx）是一种高度保守核蛋白,具有4个不同结构域,在细胞凋亡和转录调控中发挥重要作用。Daxx存在两个与其生物学功能密切相关的核定位信号,为Daxx与多种蛋白相互作用所必需。Daxx与氧化应激、心肌缺血等病理生理过程密切相关,提示Daxx在心血管系统中的起重要作用。