细胞色素C滴眼剂的制备及药效学

目的制备细胞色素C滴眼剂,并对其基本性质与对硒致白内障大鼠的抗白内障作用进行初步研究。方法对制得的滴眼剂进行pH与澄明度、黏度与渗透压及酶活力与药效学考察。结果与结论制剂各项指标符合2000年版《中华人民共和国药典》对滴眼剂的要求,且具有良好的抗白内障活性。     

荧光分子扩散动态测量在肥大细胞脱颗粒体外检测中的应用

 目的：建立基于荧光分子扩散动态测量的肥大细胞脱颗粒的体外快速评估方法。方法：分别采用β-己糖苷酶法、扫描电镜法及光栅图像关联光谱法（raster image correlation spectroscopy, RICS）对稳定表达CD63-绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的大鼠肥大细胞株RBL-2H3的脱颗粒过程进行评价,比较不同检测方法的灵敏度。结果：β-己糖苷酶法的检测灵敏度为5 mg/L,扫描电镜法的检测灵敏度均为3.9×10-2 mg/L,RICS方法也在3.9×10-2 mg/L即可检测到扩散系数的降低,并与未给药组有显著差异。结论：RICS方法比传统β-己糖苷酶法更灵敏,虽然与电镜方法灵敏度相当,但该方法较扫描电镜法简便易行成本低,易操作,且所观察的指标为扫描电镜所不能做到的活体动态观测,能在细胞脱颗粒早期即可判定过敏反应的发生,具有传统方法不具备的优势,有潜力成为制药企业质量控制的标准方法,或临床过敏性物质筛查的有利工具。     

山柰酚对人结肠癌SW48细胞增殖的抑制作用

目的为开发黄酮醇类抗肿瘤新药提供依据。方法采用噻唑蓝还原法检测山柰酚对SW48细胞生长的抑制作用,采用流式细胞仪分析山柰酚对细胞凋亡的诱导作用,采用免疫印记法分析山柰酚对凋亡通路相关蛋白表达的影响。结果山柰酚抑制SW48细胞的生长,上调了p53的蛋白表达量和磷酸化程度,改变了Bcl-2与Bax的蛋白含量比例。结论山柰酚通过诱导细胞周期阻滞和p53介导的线粒体凋亡通路抑制人结肠癌SW48细胞增殖。     

应用高效液相色谱法比较我国不同地区东亚钳蝎毒(ButhusmartensiiKarsch)

用胶过滤、离子交换高效液相色谱分离我国不同地区东亚钳蝎毒，其图谱表明：不同地区东亚钳蝎毒蛋白质的种类、含量存在一定差异，地区相近，差异较小，反之差异较大．     

医用钛材料表面改性研究进展

作为生物医用金属材料,钛及其合金具有良好的机械性能和抗腐蚀性能,广泛应用于人体硬组织的修复或替代。但钛植入体在制备过程中会形成惰性氧化层,在硬组织替换过程中,与周围骨组织之间的结合只是机械嵌合而非化学结合,植入体内后容易发生松动和脱落。表面改性技术可在保留钛及其合金原有优良机械性能的基础上,赋予其特殊的生物学功能,从而满足临床需求。本文就医用钛材料的表面改性技术作一综述。     

一种新型聚乙二醇化重组人生长激素的制备及性质考察

目的制备一种新型聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-(rhGH)2),并对其理化性质及药理作用进行研究。方法以分子质量为2×104u的聚乙二醇二丙醛(PEG-(ALD)2)对重组人生长激素(rhGH)进行修饰,采用Sephacryl S-200凝胶过滤色谱、Q Sepharose FF离子交换色谱对修饰产物进行分离纯化,SDS-PAGE鉴定各组分,通过SEC-HPLC、IEF、MALDI-TOF-MS等方法对目标产物进行分析,并采用去脑垂体大鼠模型研究其体内生物活性与长效作用。结果获得了一种新型聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-(rhGH)2)。其纯度质量分数达到97%以上,等电点为5.27,分子质量为6.6×104u。与未修饰的rhGH相比,PEG-(rhGH)2具有高效、长效的促进机体生长的药理作用。结论新型聚乙二醇化重组人生长激素PEG-(rhGH)2是一种具有开发前景的长效蛋白质药物,值得进一步深入研究。     

两种具有双功能活性蝎毒蛋白融合体的构建

目的首次报道利用东亚钳蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽-BmKAGAP产生两种不同的融合蛋白,目的是获得镇痛和抗肿瘤的双功能活性。方法融合蛋白是以嵌合毒素的形式进行构建,由三部分组成,包括促性腺激素释放激素(luteinizing hormone-releasing hormoneL,HRH),两种不同类型的柔性连接物,以及BmKAGAP。克隆编码两种融合蛋白的基因并在大肠杆菌中实现可溶性表达。通过金属离子螯合亲和层析和阳离子交换层析方法对融合蛋白分离纯化,采用小鼠醋酸扭体法和MTT法测定融合蛋白的镇痛活性与细胞抑制活性。结果融合蛋白在小鼠模型中体现出镇痛活性(rLHRH-Tag(His)AGAP>rTag(His)-LHRH-L8-AGAP>rBmKAGAP),同时对肝癌细胞株Hep3B具有细胞毒活性(rLHRH-Tag(His)-AGAP>rBmKAGAP>rTag(His)-LHRH-L8-AGAP)。结论得到优化的双功能融合蛋白候选者为嵌合毒素rLHRH-Tag(His)-AGAP。     

喉癌原代培养细胞及Hep-2细胞系染色体畸变研究

目的探索原发性喉鳞状细胞癌及喉癌Hep-2细胞系的特征性染色体异常，认识喉癌的细胞遗传学改变与其发病机理的相关性。方法对喉癌手术新鲜标本进行改良的原代细胞培养，G显带后核型分析；应用高分辨染色体分析法对喉癌Hep-2细胞系进行核型分析；应用6号染色体涂染探针对原发性喉癌及喉癌细胞系进行分子细胞遗传学研究。结果4例原发性喉癌原代培养细胞中，1例是四倍体范围，3例是三倍体范围。Hep-2细胞系染色体众数为68～75条，出现15条可识别的标记染色体。原发性喉癌及喉癌细胞系中染色体结构异常多为末端缺失、等臂染色体和不平衡易位，而且均存在复杂的6号染色体畸变。结论6q-，i（5p），17p-，5q-可能是人类喉鳞状细胞癌特征性染色体改变；荧光原位杂交法（fluorescence in situ hybridization，FISH）可以探求常规显带方法难以确认的复杂易位和标记染色体来源，为进一步确定喉癌特征性染色体畸变提供有价值的依据。     

胰岛素微粒剂的体外释药、小鼠体内分布与绝对生物利用度

采用放射免疫分析方法测定了胰岛素微粒剂的体外释药性 .用放射性标记技术制备了12 5Ⅰ 胰岛素微粒制剂 ,且以微粒剂中12 5Ⅰ 胰岛素的放射性计数为指标 ,研究了12 5Ⅰ 胰岛素在小鼠体内的生物利用度与组织分布 .研究表明 :微粒剂在不同pH值的磷酸盐缓冲液中 ,释药规律接近一级动力学方程 :ln(Q∞ -Q) =bt +A ,相关系数为rpH 2 5=- 0 .9398、rpH 7 0 =- 0 .9933,但更好地符合自拟释药方程 :Q =Q∞ bt/(1+bt) ,相关系数为rpH 2 5=- 0 .995 2、rpH 7.0 =- 0 .996 9.小鼠口服绝对生物利用度为 11.5 1%± 4.41% .12 5Ⅰ 胰岛素在小鼠脏器的同位素强度分布依次为肝、肾、心、肺、脾 .