重组人TGF-β1对TGF-β1基因启动活性的影响

目的：探讨TGF-β1对人TGF-β1基因自身启动子活性的影响。方法：以人全血基因组DNA为模板，PER扩增获得TGF-β1基因转录起始位点上游5′端-1328～ 812bp和 227～ 812bp的片段，以此作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因而不含启动子的pCAT-enhancer质粒构建成重组质粒，并将其转染至大鼠星状细胞株nFSC中，细胞在DMEM培养基中进行培养，用不同浓度的TGF-β1进行干涉，测定并比较细胞的CAT表达水平。结果：不同浓度的TGF-β1对大鼠的肝脏星状细胞的增殖具有抑制作用，而且这种抑制作用在实验用的浓度范围内具有剂量依赖关系；浓度为2．5ng/ml TGF-β1可以使转染phTGF0．585、phTGF1．120、phTGF1．423、phTGF1．680、phTGF2．140质粒的大鼠肝星状细胞的CAT活性分别增加2～5倍。结论：TGF-β1在大鼠nFSC细胞中对TGF-β1启动子活性具有自身促进作用，为进一步研究TGF-β1的调节机制提供了依据。     

HPVl6L1蛋白血清学诊断宫颈癌临床效果观察

目的：探讨基因重组人乳头瘤病毒（HPV）16L1蛋白的血清学诊断宫颈癌的临床意义。方法：选择63例宫颈癌患者，采用PCR方法检测宫颈癌组织的HPV型别；并采用重组原核表达系统制备HPV16L1蛋白，检测其血清HPV16L1抗体。结果：宫颈癌HPV通用型DNA阳性率50．8％，HPV16DNA阳性率46％，HPV18DNA阳性率3．2％。宫颈癌组血清HPV16L1抗体阳性率44．4％，与健康对照组和尖锐湿疣组比较，差异非常显著（P〈0．01）。HPV16DNA检测法与HPV16L1ELISA血清抗体检测法两者间相关显著（P〈0．05）。结论：宫颈癌患者以HPV16感染为多见，HPV16L1血清ELISA抗体检测可用作HPV16感染的血清学诊断和宫颈癌的免疫学研究。     

微波对聚合酶链反应检测血内乙型肝炎病毒基因的改进

为了研究微波处理微量全血标本进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因的可行性，我们对１７２例临床和病理血清学诊断为慢性活动性肝炎的患者进行了检测。分别采取１７２例患者的末梢血２０μｌ，每人两管，同时采集肘静脉血分离血清备用，应用微波处...     

两种浓度抗凝剂检测凝血酶原时间比较

凝血酶原时间(PT)是检测维生素K(Vitamin K)依赖因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ及Ⅴ和纤维蛋白原活性的指标。它不仅适用于外源性凝血途径的先天性凝血疾病及获得性出血性疾病的诊断,也可用于判断肝病病情,同时还是临床上口服抗凝剂治疗监测的首选指标。     

肿瘤患者血液中自由基检测及意义

自由基在生物体系中的作用 ,目前已成为很热门的研究领域 ,自由基的产生和消除存在着动态平衡 ,它可以参与 ATP及前列腺素的合成、巨噬细胞的吞噬作用 ,同时也能引发机体组织损伤如衰老、癌症、组织再灌流的自身免疫性疾病 [1 ]。随着自由基检测和研究方法的不断改进 ,从而进一步探讨自由基引发的各种病理现象 ,推动医学从分子水平向电子水平发展 ,逐渐形成以量子论为基础的氧自由基病理学 [2 ]。1　对象和方法1.1　对象　 40例经胃镜检查临床确诊为胃癌的本院患者 ,男2 8例 ,女 12例 ,年龄 45～ 5 5岁 ,病程 2～ 3a。1.2　分组　分 3组 ,…     

两种温度保存尿试纸带对结果的影响

两种温度保存尿试纸带对结果的影响包广宇（中国人民解放军第２１１医院，哈尔滨１５００８０）我们把尿液自动分析仪剩余试纸带放置在两种不同温度条件下保存，连续观察其质量变化情况，对两行结果进行对比分析，发现两种保存方式所测结果有明显差异。现将结果报告如下。...     

α-L-岩藻糖苷酶对无机磷测定的干扰及排除

目的探讨由于全自动生化分析仪试剂探针污染携带使得α-L-岩藻糖苷酶（AFU）试剂对无机磷（P3＋）检测结果的影响。方法用无溶血、无乳糜的混合血清先单独地测试P3＋（对照组）;用同样的血清先测AFU紧接着测P3＋（测试组Ⅰ）;调整项目的测定顺序后,再用同样的血清先测P3＋紧接着测AFU（测试组Ⅱ）。结果测试组Ⅰ的P3＋含量与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）;测试组Ⅱ的P3＋含量与对照组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论试剂针携带污染AFU试剂对P3＋测定有干扰,使结果偏高,调整测试项目顺序可以消除干扰。     

HPV16 L1重组蛋白的纯化及免疫原性的实验研究

人乳头瘤病毒 (HPV) 16、18型感染与宫颈癌的发生密切相关。本研究通过包涵体提取、溶解、变性、复性、纯化 ,获得GST HPV16L1融合蛋白 ,同时检测GST HPV16L1蛋白在体外复性过程中自我组装成病毒样颗粒 (VLP)的情况。通过动物实验验证HPV16L1融合蛋白的免疫学作用。材料 :pGEX4     

多种细胞因子对转化生长因子β1转录的调控作用

目的探讨细胞因子TNF-α、IFN-γ、IFN-α、PDGF-BB、bFGF对TGF-β1启动活性的影响.方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增获得含有人TGF-β1基因启动子序列的-1 328～+812 bp片段,与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因构建重组体phTGF2.14, 将其瞬时转染大鼠nFSC细胞,加入细胞因子进行干预,测定CAT活性.结果10 ng/ml TNF-α可以使重组体的CAT活性升高3.24倍;浓度为1 000 U/ml的IFN-γ、IFN-α使phTGF2.14的CAT活性分别降低至对照的(42±12)%、(58±6)%;浓度为10 ng/ml的PDGF-BB、bFGF对TGF-β1基因启动子的活性没有影响;IFN-γ、IFN-α和TNF-α联合应用TGF-β1基因启动子的活性分别为对照的1.32和1.46倍.结论TNF-α可促进TGF-β1基因启动子的活性;IFN-γ、IFN-α则对TGF-β1基因启动子的启动活性有抑制作用;IFN-γ、IFN-α可以阻断TNF-α对TGF-β1基因启动子的促进作用;PDGF-BB、bFGF对TGF-β1基因启动子的启动活性无影响,此研究为进一步研究细胞因子在纤维化疾病的相互作用机制提供了依据.