羊膜贴敷联合碱性成纤维细胞生长因子治疗糖尿病下肢皮肤溃疡

目的评价羊膜贴敷联合碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）喷涂创面对糖尿病下肢皮肤溃疡的治疗作用，并观察其有效性。方法将30例糖尿病下肢皮肤溃疡患者随机分成两组：治疗组15例（羊膜贴敷联合bFGF）与对照组15例（仅用bFGF）。结果治疗组溃疡愈合时间平均（10.24±2.6）d，对照组平均（14.34±3.5）d，两组溃疡愈合时间比较差异有统计学意义（P〈0.01）。缓解疼痛方面也优于对照组，两组均无继发感染，无过敏及其他不良反应。结论应用羊膊贴敷联合bFGF治疗糖尿病下肢皮肤溃疡可加速溃疡愈合．有效缓解疼痛。     

以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉内皮细胞构建实验性角膜后板层

 目的： 探讨以异种后弹力膜/基质为载体诱导人脐静脉内皮细胞向角膜内皮细胞分化的可行性及移植术后在活体的生理功能。方法：体外分离培养脐静脉内皮细胞作为诱导移植的种子细胞;取当地质检合格的猪眼球以直径6.2 mm、厚100 μm、冷冻脱水进行角膜深板层载体的制备;接种经CM-DiI荧光标记的第2~3代人脐静脉内皮细胞于载体的后弹力层面,体外培养7~10 d行细胞形态、密度、组织学和扫描电镜观察,待细胞与后弹力层面融合形成单层后,用于兔角膜移植。受眼：正常健康新西兰大白兔24只（24眼）,实验组（人脐静脉内皮细胞移植组）12眼,对照组（单纯猪角膜深板层移植组）12眼,全角膜范围去除术眼内皮细胞,实施移植手术。结果：人脐静脉内皮细胞在猪后弹力膜/基质载体上贴附生长,形成紧密连接的单层,形态近似六角形,呈铺路石状分布,具有正常兔角膜内皮细胞的超微结构。术后8周实验组角膜基本透明,周边角膜略有水肿。对照组单纯猪角膜深板层移植后,移植角膜明显水肿、混浊。结论：以异种角膜后弹力膜/基质为载体培养的人脐静脉内皮细胞,行异种异体移植后,能够在活体上成活,并能维持角膜透明,具有正常角膜内皮细胞的生物学功能。深板层角膜内皮移植术是体外培养血管内皮细胞移植的一种有效术式。     

1α, 25-二羟维生素D3对早期角膜移植小鼠Th17细胞的免疫调控作用

 目的:观察在同种异体角膜移植的小鼠模型中,1α, 25-二羟维生素D3对Th17细胞及其相关细胞因子的影响。方法: C57BL/6 小鼠作为受体,BALB/c小鼠作为供体,建立小鼠穿透性角膜移植术模型。术后隔日对角膜移植小鼠腹腔注射1.0 μg 1α,25二羟维生素D3（维生素D3干预组）,模型组和正常对照组腹腔注射等量大豆油。在裂隙灯活组织镜下观察角膜移植物的透明情况,评估排斥反应的发生情况,并取角膜移植物做病理学检测。采用实时荧光定量PCR检测脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平,Western blotting分析外周血中RORγt及IL-17的蛋白含量,流式细胞术检测外周血IL-17和IFN-γ细胞因子的表达情况。结果: 1α, 25-二羟维生素D3显著地抑制了同种异体角膜移植排斥反应,同时减少了角膜移植物的炎性渗出。应用1α, 25-二羟维生素D3治疗后,小鼠脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平降低;外周血中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平被下调。结论: 1α, 25-二羟维生素D3抑制小鼠同种异体角膜排斥反应的作用与IL-17及相关细胞因子RORγt细胞调节密切相关。     

传统及改良纱布包裹冻存法对人血管内皮细胞保护的比较

背景：传统的细胞冻存多采用4,-20℃放置的阶梯式降温方法,程序复杂且浪费时间。目的：比较传统法与改良冻存法对血管内皮细胞的保护效果。方法：将常规培养的人血管内皮细胞用胰酶消化后,用配置好的冻存液（10%二甲基亚砜、体积分数60%胎牛血清、30%DMEM无血清培养基）调整浓度,将细胞悬液吸入冻存管,分组干预：实验组以纱布包裹,并直接投入-80℃冰箱;对照组按常规冻存法,4℃冰箱和-20℃冰箱分别预冷30min和1h后放入-80℃冰箱。1个月后快速复苏冻存细胞。结果与结论：复苏后实验组细胞存活率及生长曲线与对照组比较差异无显著性意义;复苏后实验组细胞贴壁率、形态学变化及增殖能力明显优于对照组。说明改良的纱布包裹法优于传统的细胞冻存法,且更加方便快捷。     

早产儿视网膜病发病情况及高危因素的探讨

目的 探讨早产儿视网病（retinopathy of prematurity，ROP）的发病率、高危因素及防治措施。方法对194例早产儿生后72h内及生后4w开始定期检查眼底，发现ROP者密切随访至生后1年。结果72h内早期眼底检查眼底异常包括视乳头水肿、视网膜水肿、视网膜血管改变及出血等。生4w后检出ROP患儿12例（6．2％），高危因素分别为低出生体重，小孕周、长期或高浓度吸氧。结论建议出生体重小于2000g和／或孕周小于35w的早产儿，在生后第3w或胎龄达34w时常规行首次眼底检查，以早期发现ROP并给予及时治疗。     

脐带间充质干细胞对角膜内皮细胞增殖能力的影响

目的:探讨并优化人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)体外获取及培养增殖的方法并鉴定;观察兔角膜内皮细胞(cornea endothelial cells,CEC)与hUCMSCs共培养后增殖能力及细胞周期的变化.方法:用酶消化法体外分离培养hUCMSCs,流式细胞仪检测hUCMSCs免疫表型:将CEC分别与hUCMSCs、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化.结果:采用酶消化法能有效分离纯化hUCMSCs.接种24 h,贴壁细胞形态多为长梭形、多边形或成纤维细胞样形态,大小均一.流式细胞仪分析第3代细胞均表达CD29、CD44、CD105,不表达造血干细胞标记CD34、CD45和HLA-DR.与空白对照组CEC周期比较脐带间充质干细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加.G1期细胞比例下降,干细胞组增加幅度高于基质细胞组.干细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近17%,增殖能力显著提高.结论:经鉴定用酶消化法体外能成功分离培养出hUCMSCs,将其与CEC共培养能促进CEC增殖.     

奥拉西坦联合丹红注射液治疗前部缺血性视神经病变

目的观察奥拉西坦联合丹红注射液治疗前部缺血性视神经病变(AION)的临床疗效。方法将38例AION患者分为观察组和对照组,每组19例。观察组给予奥拉西坦3.0 g加生理盐水250 mL,丹红注射液20 mL加体积分数5%葡萄糖250 mL(糖尿病患者改为等量生理盐水),静脉滴注,每日1次;对照组应用香丹注射液20 mL,静脉滴注,每日1次;2组疗程均为2周。观察比较2组临床疗效及视觉诱发电位(VEP)。结果观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05)。2组治疗前VEP波幅、潜伏期比较差别均无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,2组治疗后波幅增加(P<0.05),潜伏期缩短(P<0.05);与对照组比较,观察组改善更为明显(P<0.05)。结论奥拉西坦联合丹红注射液治疗AION疗效肯定。     

种植人骨髓间充质干细胞的猪角膜板层移植治疗兔角膜损伤的初步研究

目的研究种植人骨髓间充质干细胞（MSCs）的猪角膜基质治疗兔角膜损伤的可能性。方法用全骨髓贴壁法分离纯化人MSCs并传代,流式细胞仪检测免疫表型及诱导成脂、成骨分化鉴定。12只新西兰白兔随机分为2组,实验组取第3代MSCs接种于去上皮的猪角膜基质上,培养4 d后移植到广泛损伤的兔角膜上,对照组单纯移植去上皮猪角膜基质。术后2、4、8周,取各实验眼行组织学检查,观察移植的MSCs及猪角膜基质的存活、转归及移植局部的反应。免疫组织化学、免疫荧光染色检测移植后角膜上皮细胞角蛋白12的表达。结果培养获得的MSCs中CD29阳性者占95.97%,CD44阳性者占96.49%,CD90阳性者占92.79%,CD105阳性者占94.66%,CD34阳性者占0.59%,CD45阳性者占0.36%,符合MCSs的免疫表型,并可以诱导成脂及成骨分化。实验组MSCs接种到去上皮猪角膜基质后贴附、生长迅速,术后植片在植床上存活良好,无排斥反应,角膜较对照组透明,新生血管少,而对照组在移植后发生排斥反应。实验组角膜免疫组织化学及免疫荧光染色均检测出CK12阳性细胞。结论种植MSCs的猪角膜基质移植到损伤兔角膜后可以存活,MSCs可以分化为角膜上皮样细胞,具有构建组织工程角膜的潜能。     

自体角膜缘上皮移植术治疗翼状胬肉的临床报告

目的比较单纯切除术及自体角膜缘上皮移植术治疗中度初发性翼状胬肉的效果.方法单纯切除组20例(24眼);自体角膜缘上皮移植组(简称移植组)18例(22眼).结果移植组平均追踪9.24±2.62月,复发率4.5%,明显低于单纯切除组33.33%的复发率(平均追踪8.68±2.83月).结论自体角膜缘上皮移植术治疗初发性翼状胬肉效果优于单纯切除术.