Molecular cytogenetic detection of trisomy 21 in interphase nuclei and metaphase chromosomes

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙｉｎｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｎｕｍｅｒｉｃａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅａｂｅｒｒａｔｉｏｎｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｐｒｅｎａｔａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＤｏｗｎ’ｓｓｙｎｄｒｏｍｅＭｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅｐｒｉｍｅｄｉｎｓｉｔｕｌａｂｅｌｌｉｎｇ（ＰＲＩＮＳ）ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｂｙｉｎｓｉｔｕａｎｎｅａｌｉｎｇｏｆｓｐｅｃ…     

短寡核苷酸原位标记和乳头状瘤病毒分型

近年来有关人乳头状瘤病毒 (ＨＰＶ)的研究有了长足的进步 ,特别是在ＨＰＶ的分型以及分型与病理变化的关系上的研究越来越深入[1,2 ] 。目前已经发现有 1 0 0多种不同的ＨＰＶ亚型 ,其中 40种见于肛门和生殖道 ,包括与肿瘤和瘤样病变相关的高危险性ＨＰＶ亚型 (如 1 6、1 8等 )和低危险性ＨＰＶ亚型 (如 6、1 1等 ) [3 ,4 ] 。研究ＨＰＶ分型、定位与宫颈和外阴病变的相互关系 ,对于这些疾病的诊断、治疗和预后判断均具有十分重要的意义。在ＨＰＶ的分子病理检测方面 ,已经建立了几种检测方法 ,包括斑点印记杂交、液相杂交、原位杂交、聚合…     

建立PCR产物的新检测体系

建立ＰＣＲ产物的新检测体系钟镐镐衡万杰吴秉铨ＰＣＲ技术，在遗传病的异常基因分析、肿瘤分子标志物的判定以及疾病病原体的检测上已广泛应用。在实践中我们发现有三个问题急待解决：（１）ＰＣＲ产物的污染；（２）ＰＣＲ产物自动化的检测手段；（３）ＰＣＲ模板的定量...     

庆大霉素的肾毒性与溶酶体病变

用雄性杂种灰兔每天一次肌肉注射硫酸庆大霉素150mg/kg,每天杀检3只共7天。电镜下可见近端肾小管上皮细胞的细胞器肿胀、变性,溶酶体增多伴有髓样小体形成,乃至细胞崩解坏死,肾小球上皮细胞和内皮细胞也有类似病变。主要由于庆大霉素沉积于溶酶体内,使磷脂酶受到抑制造成,为继发性溶酶体贮积病。     

人胃粘膜上皮细胞的原代培养及其特性观察的初步报道

体外培养的胃粘膜细胞为研究胃粘膜细胞的功能以及致病因子、药物、激素对细胞的损伤、保护和对细胞功能的调控提供了简单而优越的模型。国外学者对大鼠、狗、兔以及人胃粘膜细胞的分离、纯化和培养方法都有报道,并在此基础上进行了一系列深入的研究。国内尚无此项工作的报道,本实验的目的是建立一套人正常胃粘膜细胞原代培养的方法,并对     

家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变的研究

目的 分析中国儿童家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体基因突变,并建立筛查该基因突变的方法。方法 以一家两患儿及其父母的基因组DNA为模板,用聚合酶链反应（PCR）及增该基因的启动子和全部18个外显子。用温度梯度凝胶电泳（TGGE）分析检测PCR产物,对电泳结果异常者进行DNA测序。结果 平行TGGE发现,两患儿第13外显子存在一纯合突变,其父母此外显存在杂合突变。DNA测充证实两患儿第13外显子发生Ala^606→Thr纯合错义突变,其父母均为此Ala^606→Thr杂合突变。结论 此家系家族性高胆固醇血症患者的LDL受体 基因存在Ala^606→Thr突变。TGGE结合DNA测序法的建立可用本症的基因诊断。     

聚合酶链反应技术中关键环节的探讨

聚合酶链反应技术中关键环节的探讨钟镐镐，衡万杰，方伟岗自１９９０年我们的实验室开展了ＰＣＲ技术，并遇到了许多实际问题，如：完全相同的试剂，在不同的实验室对同一目的基因作扩增时，却出现不同的结果。还有，相同的ＰＣＲ反应体系和反应条件对同一细胞系细胞内存...     

实时荧光PCR分子信标检测耐利福平结核分枝杆菌印rpoB基因

目的 应用实时荧光PCR分子信标技术,建立快速检测临床标本中结核分枝杆菌利福平rpoB相关耐药突变点方法,探讨其缩短耐药实验报告时间的临床应用价值.方法 以分枝杆菌药物敏感性实验绝对浓度法为标准,12株非结核分枝杆菌、4株非分枝杆菌作对照,对174例结核患者临床分离株应用实时荧光PCR分子信标方法,检测利福平rpoB核心区域的耐药突变点并将结果与直接测序进行比较.结果 (1)实时荧光PCR分子信标方法:82例结核分枝杆菌利福平敏感菌株中,3例发生rpoB基因突变,特异度为96.3%;92例结核分枝杆菌利福平耐药菌株中,82例检出耐药突变,敏感度为89.1%;准确性为92.5%.(2)DNA直接测序分析:82例结核分枝杆菌利福平敏感株中,1例发生rpoB基因突变,特异度为98.8%;92例结核分枝杆菌利福平耐药菌株中,83例发生:rpoB基因突变,敏感度为90.2%;准确性为94.2%.检测174株结核分枝杆菌临床分离菌株,与实时荧光PCR分子信标方法检测一致性为98.3%(171/174).结论 实时荧光PCR分子信标方法检测耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变点可作为结核患者快速耐药检测的初筛方法之一.     

引物介导的原位标记技术在先天愚型诊断中的应用

先天愚型也称唐氏综合征（Ｄｏｗｎ′ｓｓｙｎｄｒｏｍｅ），是人类最常见的常染色体异常疾病，约占染色体病的６３％，是先天性智力低下的主要原因之一，其发生率为１／７００。９５％的病人为２１三体，其余为易位或嵌合型。传统的诊断方法是通过染色体显带技术进行核型...     

新月体性肾小球肾炎的病变发生机制

对22例新月体性肾小球肾炎用光镜、电镜、免疫病理学方法进了病理学研究。免疫复合物沉积(12例)、抗基膜抗体(3例)及不明原因(6例),均可严重损伤肾小球,血液有形成分积纤维蛋白涌入肾小囊,导致新月体形成。新月体细胞具有肾小囊上皮细胞的超微形态,细胞间有基膜样物质形成,单核巨噬细胞弥漫、均匀地分布于肾组织,从而证明新月体主要由上皮细胞增生而形成。