儿童肺结核支气管肺泡灌洗液Xpert MTB/RIF检测的诊断准确性研究

目的探讨支气管肺泡灌洗液的Xpert MTB/RIF检测对儿童肺结核的诊断价值。方法有疑似活动性结核病的临床症状和体征，行纤维支气管镜检查并留取了支气管肺泡灌洗液的患儿为研究对象。以支气管肺泡灌洗液作为病原学检测标本，分别以病原学诊断活动性结核病和临床诊断活动性结核病为金标准，以Xpert MTB/RIF为待测标准，考察Xpert MTB/RIF对病原学和临床诊断结核的诊断价值。基于样本中结核分枝杆菌（MTB）的Ct值反映所检测样本中MTB的载量；通过对利福平耐药位点的检测，对MTB菌株进行药物敏感性检测。结果符合本文纳入标准的疑似结核病患儿351例，男198例，女153例，年龄（5.9±3.9）岁。肺结核患儿125例，其中病原学诊断结核43例（34.4%），临床诊断结核82例（65.6%）；肺结核合并支气管结核51例（40.8%），单纯肺结核74例（59.2%）；非结核呼吸道感染性疾病226例，肺炎支原体肺炎187例（82.7%），细菌性肺炎39例（17.3%）。Xpert MTB/RIF在病原学诊断和临床诊断结核的敏感度分别为79%(95%CI：63%~89%)和51%(95%CI：40%~62%)，差异有统计学意义（χ2=9.18，P=0.002）；肺结核合并支气管结核的敏感度为80%（66%~90%),单纯肺结核的敏感度47%(35%~59%)；病原学诊断和临床诊断结核、合并支气管结核和单纯肺结核特异度均为100%(95% CI：97.9%~100%)。Xpert MTB/RIF检测病原学诊断结核敏感度高于临床诊断结核，肺结核合并支气管结核敏感度高于单纯肺结核，差异有统计学意义（χ2=13.88，P<0.001）；支气管肺泡灌洗液的MTB核酸检出载量病原学诊断结核高于临床诊断结核，差异有统计学意义（χ2=7.37，P=0.025）。76例Xpert MTB/RIF检测阳性患儿中，利福平耐药2例（2.6%）。结论支气管肺泡灌洗液的Xpert MTB/RIF检测在儿童肺结核诊断中具有较高价值，可在缺乏细菌学诊断证据的临床诊断结核病儿童中发现MTB，具有较高的敏感度，有助于提高儿童结核病病原学检出率。     

Xpert结核分枝杆菌/利福平试验对结核病及耐多药结核病诊断价值的Meta分析

目的 评估Xpert结核分枝杆菌/利福平（MTB/RIF）试验对结核病的诊断价值.方法 检索PubMed、Medline、中国知网、万方数据库等,收集Xpert MTB/RIF试验对结核病诊断价值的文献,检索起止时间均为建库至2012年6月.2名研究者独立进行资料提取和文献质量评估.采用Meta-Disc 1.4软件进行Meta分析.结果 共纳入26篇文献,其中2篇文献涉及儿童病例,包含了13 270例来自临床患者的检测标本.Meta分析结果显示,Xpert MTB/RIF试验诊断结核病的汇总敏感度为87%（95%CI：86%～88%）、特异度为97%（95%CI：97%～97%）.按照结核病的类型和患者年龄进行亚组分析,Xpert MTB/RIF试验诊断肺结核的敏感度高于肺外结核病,90%（95%CI：89%～91%） vs 76%（95%CI：72%～79%）;诊断涂阴菌阳性和涂阳菌阳性结核病的敏感度分别为74%（95%CI：71%～76%）和99%（95%CI：98%～99%）;对儿童肺结核的诊断敏感度比成人肺结核低,74%（95%CI：65%～83%） vs 90%（95%CI：89%～92%）.Xpert MTB/RIF试验诊断耐多药结核病的敏感度为96%（95%CI：94%～97%）,特异度为98%（95%CI：98%～99%）.结论 Xpert MTB/RIF试验诊断结核病的价值较高,尤其是成人结核病及耐多药结核病.Xpert MTB/RIF试验在儿童结核病中的诊断价值由于纳入文献较少,尚待进一步研究.     

以流式细胞术建立中国汉族健康儿童外周血淋巴细胞亚群相对计数的正常参考值

目的建立中国汉族健康儿童外周血淋巴细胞亚群的正常参考值范围。方法选取首都医科大学附属北京儿童医院入托、入学体检,或术前查体及术后复查(均为对免疫功能影响不大的疾病)的0～18岁汉族儿童为研究对象。按年龄分为婴儿组(28d至12个月),幼儿组(～3岁),学龄前组(～7岁),学龄组(～12岁)和青春期组(～18岁)。采集外周血以双色及四色荧光标记流式细胞术检测淋巴细胞亚群T细胞(CD3+CD19-)、CD4+T细胞(CD3+CD4+)、CD8+T细胞(CD3+CD8+)、B细胞(CD3-CD19+)和NK细胞(CD3-CD16+CD56+)相对计数及CD4+/CD8+比值。比较各年龄组不同性别淋巴细胞亚群分布的差异,建立正常参考值范围。结果由于青春期组所收集的标本数较少,将该研究对象组予以删除。最终纳入28d至12岁儿童592例。①婴儿组T细胞、CD8+T细胞百分比与CD4+/CD8+比值性别差异均有统计学意义,幼儿组CD4+T细胞、CD8+T细胞百分比与CD4+/CD8+比值性别差异均有统计学意义,学龄组CD4+T细胞百分比性别差异有统计学意义;②除了男童T细胞百分比各年龄组间差异无统计学意义外,男女儿童各年龄组间外周各血淋巴细胞亚群分布总体上差异均有统计学意义;进一步行男女儿童淋巴细胞亚群不同年龄组间两两比较,发现多个年龄组间差异有统计学意义;③男女儿童T细胞、CD8+T细胞和NK细胞百分比随年龄增长均呈逐渐升高趋势;CD4+T细胞、B细胞百分比及CD4+/CD8+比值随年龄增长均呈逐渐降低趋势;男女儿童T细胞、B细胞、NK细胞百分比和CD4+/CD8+比值升高或降低的程度略有不同;④中国汉族健康儿童淋巴细胞亚群分布特点与欧、美、非洲国家儿童相比存在相似的升高或降低的趋势,但数值上存在一定的差异。结论儿童淋巴细胞亚群分布存在年龄和性别的差异。本研究成功建立中国汉族28d至12岁健康儿童淋巴细胞亚群相对计数正常参考值范围。     

汉族儿童Ⅱ相药物代谢酶基因GSTM1和GSTT1的多态性分布

目的 了解谷胱甘肽-S-转移酶M1(GSTM1)和T1(GSTT1)基因多态性在中国汉族儿童中的分布特点,为临床针对不同基因型个体化药物治疗提供理论基础。方法 选择首都医科大学附属北京儿童医院健康查体汉族儿童的血样,提取DNA。应用PCR法检测GSTM1和GSTT1基因型,并判断代谢表型。检索PubMed等数据库,获得亚洲人群、黑种人和高加索人群GSTM1和GSTT1基因多态性分布的数据,与本研究分析人群数据进行比较,分析基因多态性的种族差异。结果 786份研究样本纳入分析。①中国汉族分析人群GSTM1和GSTT1完全缺失基因型/慢代谢型(*0/*0)的频率分别为59.3%(466/786例)和58.4%(459/786例);单拷贝缺失基因型/中间代谢型(*1/*0)的频率分别为34.0%(267/786例)和35.1%(276/786例);未缺失基因型/快代谢型(*1/*1)的频率分别为6.7%(53/786例)和6.5%(51/786例)。②GSTM1和GSTT1基因多态性分布互相独立,无明显关联。③GSTM1和GSTT1基因多态性无显著性别差异。④本研究汉族分析人群GSTM1和GSTT1基因多态性分布与亚洲人群较为接近,与黑种人和高加索人群有显著差异。结论 GSTM1和GSTT1基因在中国汉族儿童中以完全缺失基因型/慢代谢型(*0/*0)为主,具有种族特异性,为不同基因型个体制定合适的用药方案提供了参考依据。     

P2X7基因多态性与结核病易感性的关联性研究——Meta分析

目前,许多病例对照研究对P2X7基因多态性与结核易感性的关联性进行了探讨,但由于入选病例有限,造成了这些研究结果的不可信。本文应用主题词和关键词“gene”、“P2X7”、“tuberculosis”和“结核”,检索了1998年1月至2009年8月MEDLINE、PUBMED、OVID及CBMdisc数据库发表的有关文献,并辅以文献追溯的方法,手工检索相关的参考文献,试图通过Meta分析,探讨人群P2X7基因2个多态性位点与结核易感性的关系。结果显示,与1513A和-762T等位基因相比,P2胛基因上1513C和一762C多态性等位基因的合并OR值分别为1．43（95％CI为1．21—1．69;P〈0．0001）和0．88（95％CI为0．65—1．20;P=0．43）。研究结果提示,人群P2胛基因1513多态性位点与结核易感性相关,而一762多态性位点与结核易感性不相关。     

北京单中心社区获得性肺炎住院患儿病原学分析

目的 了解住院患儿社区获得性肺炎(CAP)的病原谱及病原流行特点。方法 回顾性收集2012年12月至2013年11月首都医科大学附属北京儿童医院（我院）确诊的CAP患儿,采集性别、年龄、入院前抗病原治疗情况、入院时间、病原学诊断等资料,分析不同年龄、季节病原构成及流行特点。结果 1 853例CAP患儿总体病原检出率为781%,入我院前均有抗生素应用史。细菌检出率270%,前3位依次是肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌;病毒检出率为225%,以呼吸道合胞病毒（RSV）和腺病毒（ADV）最常见;肺炎支原体检出率为487%;混合感染检出率为230%,以细菌合并病毒感染最多见。②随着年龄增长单一细菌或病毒感染的比例呈明显下降趋势,肺炎支原体感染的比例呈现明显上升趋势,多种病原混合感染或无明确病原感染比例随年龄增长亦有所降低;肺炎链球菌感染多见于3岁以下婴幼儿（759%）;流感嗜血杆菌（750%）和肺炎克雷伯菌感染（684%）多见于婴儿。RSV感染多见于婴儿（762%）,ADV感染多见于3岁以下婴幼儿（822%）。③单一细菌感染春季最多见,冬季次之;单一病毒感染冬季多见;单一肺炎支原体感染秋季最多见,夏季次之;多种病原混合感染以冬春季多见;无明确病原感染在春季最高。肺炎链球菌感染多见于冬春季,流感嗜血杆菌感染多见于春季,肺炎克雷伯菌感染多见于冬春季,RSV感染多见于冬季,ADV感染以冬春季多见。结论 CAP的病原谱构成存在显著的年龄和季节分布特点。细菌、病毒感染多见于婴儿,肺炎支原体感染多见于5岁以上患儿,多种病原混合感染以婴儿最多见。细菌感染冬春季多见,病毒感染冬季多见,肺炎支原体感染多发生于夏秋季;多种病原混合感染多见于冬春季。     

结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数鉴别儿童活动性结核病与潜伏结核感染的价值

目的 通过γ干扰素释放试验探讨结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数（简称T细胞斑点数）鉴别儿童活动性结核病（TB）与潜伏结核感染（LTBI）的价值。方法 纳入T细胞斑点试验（T.SPOT.TB）阳性且未经过抗结核治疗的93例活动性TB（重症TB 27例,非重症TB 66例）和47例LTBI儿童,根据T.SPOT.TB结果对T细胞斑点数进行比较分析。结果 活动性TB组T细胞斑点数中位数84（6～710）显著高于LTBI组17（6～316）,P=0.000;非重症TB患儿的T细胞斑点数中位数为99（6～710）,显著高于重症TB的44（6～268）,P=0.011,也显著高于LTBI组17（6～316）,P=0.000;重症TB儿童T细胞斑点数中位数高于LTBI组儿童（44 vs 17）,但差异无统计学意义（P=0.084）,T细胞斑点数分布在活动性TB、重症TB、非重症TB和LTBI之间均有较大范围重叠。受试者工作特征曲线分析显示以T细胞斑点数43.5作为区分活动性TB与LTBI的最佳界值,其敏感度与特异度分别为69.9%和70.2%。结论 T细胞斑点数在活动性TB尤其是非重症TB患儿显著高于LTBI儿童;T细胞斑点数的数量可反映体内的结核分枝杆菌负荷,但不能用于区分儿童活动性TB与LTBI。     

儿童重症结核病相关危险因素分析

目的调查分析与儿童重症结核病相关的危险因素。方法回顾性研究2002年1月至2010年12月北京儿童医院住院病人中诊断为结核病的0-17岁儿童结核病病例,并对可能影响儿童患重症结核病的危险因素进行单因素及多因素的logistic回归分析。结果年龄、卡介苗接种、结核病接触史及PPD试验4项研究因素P值小于0.05,OR值及95%可信区间分别为：0.716（0.650-0.789）,0.606（0.468-0.784）,1.483（1.131-1.945）和0.417（0.317-0.549）。结论小于1岁、未接种卡介苗、有结核病密切接触史及PPD试验结果阴性是儿童重症结核病的独立危险因素。     

北京儿童医院住院儿童胸腔积液病因分析

目的探讨北京儿童医院住院儿童胸腔积液的病因。方法收集2016年1月至2018年12月首都医科大学附属北京儿童医院收治住院的胸腔积液患儿的临床资料。根据病因将患儿分为感染组(肺炎旁胸腔积液、结核性胸膜炎及脓胸)及非感染组,同时按照年龄进一步分为≤3岁、>3~7岁和>7岁组,分类统计,回顾分析胸腔积液患儿的病因。结果 1 165例胸腔积液患儿中,感染性胸腔积液746例(64.0%),其中肺炎旁胸腔积液697例(697/746例,93.4%)。肺炎旁胸腔积液中肺炎支原体感染457例(61.3%)。感染性胸腔积液多见于7岁以上儿童(339/479例,70.8%),非感染性胸腔积液主要见于3岁以下儿童(188/324例,58.0%),二者比较差异有统计学意义(χ²=96.33,P<0.05)。非感染性胸腔积液419例(36.0%),其中多系统疾病239例(57.0%)、恶性胸腔积液97例(23.2%)。18例死亡患儿均为非感染性胸腔积液者。结论儿童胸腔积液的主要病因为感染,感染中最多见的为肺炎旁胸腔积液,主要病原为肺炎支原体。     

Ag85B表位多肽对体外单核细胞增殖影响的研究

目的通过观察Ag85B不同表位多肽对人外周血单个核细胞（PBMC）增殖的影响,筛选出增殖活性较强的Ag85B表位多肽,为制备结核新疫苗提供理论基础。方法采用的实验方法为人工预测Ag85B的表位,并合成多肽。将不同表位多肽体外刺激人外周血单个核细胞,利用CCK-8法测定单核细胞同一时相的吸光值,计算各自的增殖指数,并与BCG、Ag85B抗原等作对比。结果①Ag85B表位多肽组的OD450值及增殖指数均高于阴性对照组,且高于传统抗原BCG;②5条多肽中,28aa多肽的OD450值及增殖指数最高,且显著高于BCG（POD450=0.001〈0.01,P增殖指数=0.013〈0.05）,但低于PHA;③28aa多肽的OD450值及增殖指数明显低于Ag85B,差异有统计学意义（POD450=P增殖指数=0.000〈0.01）。结论预测的Ag85B表位多肽抗原具有一定的免疫原性,其中28aa多肽可作为优势表位多肽,但是否可用于表位多肽疫苗候选抗原还需进一步研究。