砒啶斯的明治疗非感染性尿道综合征

自2002年以来，我们用吡啶斯的明治疗非感染性尿道综合征76例，收到满意的疗效，现报告如下。     

慢性肾衰竭患者CD62P和CD63水平及灯盏花对其影响的研究

慢性肾衰竭 (ＣＲＦ)患者血液粘滞度较高 ,而影响血液粘滞度的因素众多 ,其中血小板活化因子是最重要因素之一。尽管ＣＲＦ的发病机理尚未完全阐明 ,但新近研究表明〔1〕,血小板活化因子在ＣＲＦ的发病机制中占有重要的地位。应用流式细胞术检测血小板活化因子的标志物ＣＤ62Ｐ     

实时定量PCR检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及临床应用

目的建立实时定量PCR（RQ-PCR）快速检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及进行初步临床应用。方法基于烟曲霉多拷贝基因ITSl-5．8S基因设计引物和TaqMan探针,用QIAamp^DNA Blood Mini Kit提取烟曲霉基因组DNA,建立20μlRQ-PCR反应体系,对含有不同载量烟曲霉基因组的模拟人全血标本和66份外科发热患者全血标本进行烟曲霉基因组的定量检测。结果检测限为10^-1基因组／μl上机待测液（即约78CFU／ml全血）;检测特异度和灵敏度分别为94．25％和99．04％,阳性预告值和阴性预告值分别为97．63％和97．62％;测定结果的平均相对误差为（3．67±13．19）％;批内及批间平均重复性变异系数分别为（12．38±1．53）％和（16．27±2．72）％;人血标本中烟曲霉基因组平均回收率为（107．81±25．92）％,回收率平均变异系数为（26．24±5．62）％。66份外科发热患者血标本中未检测出烟曲霉基因组。结论RQ-PCR可以快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中烟曲霉基因组的载量,且有着较好的准确度与精密度。本研究外科发热患者血中未检测到烟曲霉基因组。     

腹水草水提液对乙醇损伤人胃黏膜上皮细胞活性及凋亡的影响研究

[目的]研究腹水草水提液对人胃黏膜上皮细胞株GES-1细胞的保护作用,探讨其对乙醇损伤后GES-1细胞凋亡的影响。[方法]采用磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法测定腹水草水提液和阳性对照药雷尼替丁对GES-1细胞的最大安全浓度(maximum non-toxic concentration,TC0),其中以不加药物处理的细胞为正常组,采用SPSS 19.0统计软件计算腹水草水提液对GES-1细胞增殖的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。分别以含低(20μg·mL~(-1))、中(40μg·mL~(-1))、高(80μg·mL~(-1))剂量腹水草水提液和雷尼替丁(45μg·mL~(-1))的DMEM培养基培养GES-1细胞48 h后,改用含5%乙醇的DMEM培养基培养4 h,运用SRB法和Annexin-V/PI双染法分别检测GES-1细胞的活性和凋亡情况。[结果]与正常组相比,在5~160μg·mL~(-1)剂量范围内,腹水草水提液对GES-1细胞存活率无显著影响(P﹥0.05);当腹水草水提液剂量≥320μg·mL~(-1)时,细胞存活率显著降低(P0.05或P0.01);TC0和IC50分别为160μg·mL~(-1)和5 096μg·mL~(-1)。与正常组比较,雷尼替丁剂量在2.8~180μg·mL~(-1)范围内,GES-1细胞存活率均﹥90%;当雷尼替丁剂量≥360μg·mL~(-1)时,细胞存活率显著降低(P0.05);TC0和IC50分别为180μg·mL~(-1)和5 396μg·mL~(-1)。经低、中、高剂量腹水草水提液和雷尼替丁预处理48h后,GES-1细胞的存活率均显著高于模型组(P0.01);腹水草水提液中、高剂量组细胞的存活率均显著高于雷尼替丁组(P0.05,P0.01)。模型组细胞凋亡率显著高于正常组(P0.01);经腹水草水提液低、中、高剂量预处理后,细胞凋亡率显著低于模型组(P0.01),且呈剂量依赖性;高剂量组的凋亡率低于雷尼替丁组,但两组间差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]在腹水草水提液5~160μg·mL~(-1)和雷尼替丁2.8~180μg·mL~(-1)的剂量范围内,两者对GES-1细胞均无毒性。腹水草水提液显著提高乙醇损伤后GES-1细胞的存活率,并降低其凋亡率。中、高剂量腹水草水提液对乙醇损伤细胞的保护作用优于雷尼替丁。     

老年高血压患者血尿酸与左室肥厚的相关性

近年来，临床研究证实血尿酸增高与心血管疾病相关[1]。为进一步了解其关系，现就老年高血压患者血尿酸水平与左室肥厚的相关性作一分析，报道如下。1资料和方法 1．1一般资料选取2008年1至12月我院收治的原发性高血压患者228例，诊断均符合2004年《中国高血压防治指南》标准，     

实时定量PCR检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及临床应用

目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测人全血标本中烟曲霉基因组载量的方法及进行初步临床应用.方法 基于烟曲霉多拷贝基因ITS1-5.8S基因设计引物和TaqMan探针,用QIAamp(R)DNA Blood Mini Kit提取烟曲霉基因组DNA,建立20μl RQ-PCR反应体系,对含有不同载量烟曲霉基因组的模拟人全血标本和66份外科发热患者全血标本进行烟曲霉基因组的定量检测.结果 检测限为10-1基因组/μl上机待测液(即约78 CFU/ml全血);检测特异度和灵敏度分别为94.25%和99.04%,阳性预告值和阴件预告值分别为97.63%和97.62%;测定结果的平均相对误差为(3.67±13.19)%;批内及批间平均重复性变异系数分别为(12.38±1.53)%和(16.27±2.72)%;人血标本中烟曲霉基因组平均回收率为(107.81±25.92)%,回收率平均变异系数为(26.24±5.62)%.66份外科发热患者血标本中未检测出烟曲霉基因组.结论 RQ-PCR可以快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中烟曲霉基因组的载量,且有着较好的准确度与精密度.本研究外科发热患者血中未检测到烟曲霉基因组.

Abstract：

Objective To establish a real-time quantitative polymerase chain reaction (RQ-PCR) assay for fast detection of Aspergillus fumigatus genome in human whole blood samples and explore its clinical application.Methods The primers and the TaqMan-probe were designed on the basis of the multi-copy ITS1-5. 8S region of the rDNA of Aspergillus fumigatus. The Aspergillus fumigatus genomic DNA were extracted with QIAamp(R) DNA Blood Mini Kit.A 20 μl RQ-PCR amplification system was established, and the simulated blood samples containing various given load of Aspergillus fumigatus genome and the 66 whole blood samples of the surgical febrile patients were examined. Results The detection limit of the RQ-PCR instrument is 10-1 genomes/μl DNA sample,namely 78 CFU/ml whole blood. The specificity and the sensitivity were 94. 25% and 99. 04% respectively; and the positive predictive value and negative predictive value were 97. 63% and 97. 62% respectively. The average relative error of the quantitative results was (3. 67 ±13. 19)%, and the intra- and the inter-assay average coefficients of variation were (12.38 ± 1. 53)% and (16. 27 ±2. 72)% , respectively. The average recovery rate of Aspergillus fumigatus genomic DNA in human whole blood samples was (107. 81 ±25. 92)% , and the average coefficient of variation of the average recovery rate was (26. 24 ± 5.62) % . No Aspergillus fumigatus genomic DNA was detected among the 66 blood samples of the surgical febrile patients. Conclusions The RQ-PCR assay for fast quantitative detection of Aspergillus fumigatus genome in human whole blood samples is of high sensitivity, specificity,accuracy and precision. The Aspergillus fumigatus genome was not detected in this group of surgical febrile patients.     

浙贝母黑斑病致病菌的分离鉴定及分子检测

[目的]分离、纯化和鉴定浙贝母黑斑病的病原真菌,为浙贝母黑斑病的监测及防治提供实验基础。[方法]采用患病组织分离法在马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)培养基上分离纯化病原真菌,PCR扩增基因组DNA的核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、翻译延伸因子-1α(translation elongation factor-1α,TEF-1α)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,G3PDH)和RNA聚合酶Ⅱ亚基(the second largest subunit of the nuclear RNA polymerase enzymeⅡ,RPB2)序列并双向测序、拼接,与GenBank中序列同源性比对后构建系统发育树,确定真菌种类,以摩擦接种法检测致病性。[结果]从浙贝母黑斑病病株中分离纯化获得2种链格孢属真菌。分离物1的ITS、TEF-1α、G3PDH、RPB2扩增片段与GenBank中链格孢菌(登录号:MG182428、KY175227、XM018523704、MG250634)的同源性均为100%;分离物2则与细极链格孢菌(登录号:MK967997、LC136862、KY290574、LT707523)的同源性均为100%。经摩擦接种确定两种链格孢属真菌均为浙贝母黑斑病致病菌。[结论]浙贝母黑斑病的病原真菌有链格孢菌和细极链格孢菌,其中细极链格孢菌首次被证明可引起浙贝母黑斑病。     

1,6-二磷酸果糖在冠心病心绞痛治疗中的应用

冠心病是中老年人常见病、多发病，近年随着我国人民生活水平的提高．该病发生率不断增加。作者采用1，6二磷酸果糖(FDP)与常规冠心病治疗药物联合治疗的方法，进行了对比观察，现报告如下。     

通用真菌引物和探针检测人全血标本中侵袭性真菌DNA载量的方法

目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)以真菌通用引物和探针快速准确检测人全血标本中侵袭性真菌DNA载量的方法,并与细菌相鉴别及进行初步临床应用.方法 选择临床常见的真菌基因组多拷贝基因5.8S rDNA作为靶基因设计特异性通用真菌引物和TaqMan探针,采用QIAamp(R)血液DNA小提试剂盒提取多种致病真菌基因组DNA,建立20μl RQ-PCR反应体系,对含有不同载量致病真菌的模拟人全血标本和71份外科发热患者全血标本进行侵袭性真菌基因组的定量检测.结果 本方法的特异性良好,检测限为101拷贝/μl上机待测液(即约105拷贝/ml全血);检测灵敏度和特异度分别为95.5％和97.6％,阳性预告值和阴性预告值分别为98.7％和92.0％;标准曲线R2在0.9931～ 0.9977;批内及批间平均变异系数分别为(10.4±4.0)％和(27.9±2.0)％;人血标本中真菌基因组DNA平均回收率为(91.0±7.6)％,相对回收率平均变异系数为(14.9±4.0)％.71份外科发热患者血标本中未检测出侵袭性真菌基因组.结论 RQ-PCR可以借通用真菌引物和TaqMan探针快速、特异、灵敏地定量检测人血标本中侵袭性真菌DNA的载量并可与细菌相鉴别,且有着较好的准确度与精密度.外科发热患者血中侵袭性真菌基因组的存在率可能很低.