生慧汤通过调节神经递质改善阿尔茨海默病模型小鼠认知损伤和昼夜节律紊乱

目的 观察生慧汤对阿尔茨海默病（AD）小鼠血清中神经递质含量的影响，并探讨其改善AD认知损伤和昼夜节律紊乱的机制。方法 将27只APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组和生慧汤组，另将9只野生型C57BL/6JNju正常小鼠设为空白组。多奈哌齐组（0.92×10^-4 g·kg^-1·d^-1）和生慧汤组（13.5 g·kg^-1·d^-1）分别灌服多奈哌齐和生慧汤，空白组和模型组灌服等体积的纯水，各组连续灌胃4周。采用Morris水迷宫实验和自主活动实验评估小鼠的认知功能和昼夜节律。采用液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术检测小鼠血清中乙酰胆碱（ACh）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、谷氨酸（Glu）、5-羟基吲哚乙酸（5-HIAA）和多巴胺（DA）的表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠的平台潜伏期、游泳距离、初次抵达平台时间、光照活动时间、黑暗活动时间和总活动时间显著增加（P<0.01），穿越平台次数和目标象限游泳时间则显著减少（P<0.01）；与模型组比较，多奈哌齐组和生慧汤组小鼠的平台潜伏期、游泳距离、初次抵达平台时间、光照活动时间、黑暗活动时间和总活动时间减少（P<0.05，P<0.01），穿越平台次数和目标象限游泳时间增加（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠血清中ACh、ChAT的表达水平显著减少（P<0.01）；与模型组比较，多奈哌齐组和生慧汤组小鼠血清中ACh、ChAT的表达水平增加（P<0.05，P<0.01）。与空白组比较，模型组小鼠血清中Glu的表达水平显著增加（P<0.01），NE、5-HIAA和DA的表达水平显著减少（P<0.01）；与模型组比较，生慧汤组小鼠血清中Glu的表达水平降低（P<0.05），NE、5-HIAA和DA的表达水平增加（P<0.05，P<0.01）；多奈哌齐组小鼠血清中NE、Glu、5-HIAA、DA的表达水平较模型组变化不明显，且差异没有统计学意义。各组小鼠血清中E的表达水平变化不明显，且差异没有统计学意义。结论 生慧汤可改善AD小鼠的认知损伤和昼夜节律紊乱，其机制可能与其调节神经递质有关。     

生慧汤对慢性睡眠剥夺小鼠学习记忆及海马IL-6，TNF-α，COX-2基因表达的影响

目的:通过观察生慧汤对慢性睡眠剥夺小鼠学习记忆及海马白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2) mRNA表达的影响,探索生慧汤改善学习记忆能力的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为睡眠剥夺模型组,正常组,褪黑素组(7. 8×10-4g·kg~(-1)·d~(-1)),生慧汤高、中、低剂量组(54,27,13. 5 g·kg~(-1)·d~(-1)),采用多平台水环境法建立小鼠慢性睡眠剥夺模型,睡眠剥夺28 d并灌胃给药。采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测各组小鼠海马IL-6,TNF-α,COX-2mRNA表达量。结果:Morris水迷宫试验结果显示,与正常组比较,模型组找到平台消耗时间与游泳总路程明显延长(P 0. 01),穿越平台次数与目标象限时间明显减少(P 0. 01),第1次抵原平台时间明显增加(P 0. 01);与模型组比较,各给药组找到平台消耗时间与游泳总路程明显减少(P 0. 05,P 0. 01),穿越平台次数与目标象限时间明显增加(P 0. 05,P 0. 01),第1次抵原平台时间明显减少(P 0. 05,P 0. 01)。Real-time PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠IL-6,TNF-α,COX-2 mRNA表达上调(P 0. 01);与模型组比较,各给药组IL-6,TNF-α,COX-2 mRNA表达下调(P 0. 05,P 0. 01),生慧汤低剂量组TNF-α,COX-2 mRNA表达无显著性差异。结论:生慧汤可能通过降低海马中IL-6,TNF-α,COX-2mRNA的表达来改善小鼠学习记忆能力。     

生慧汤对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠下丘脑区生物钟基因Bmal1及海马IL-6，TNF-α的影响

目的:通过观察生慧汤对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠学习记忆、下丘脑区生物钟基因Bmal1及海马白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探索生慧汤改善学习记忆和睡眠障碍的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为模型组、正常组、褪黑素组、生慧汤高剂量组和生慧汤低剂量组。采用自主活动分析系统检测各组小鼠自主活动;采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习能力及空间记忆能力;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠下丘脑区钟基因Bmal1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠Bmal1蛋白表达;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠海马区IL-6,TNF-α含量;采用皮尔森(Pearson)分析方法分析IL-6,TNF-α与Bmal1的相关性。结果:自主活动结果显示,与正常组比较,模型组小鼠活动次数和活动路程显著减少(P 0. 01);与模型组比较,各给药组小鼠活动次数和活动路程均明显增加(P 0. 05,P 0. 01),生慧汤低剂量组无显著性差异。Morris水迷宫结果显示,与正常组比较,模型组小鼠上平台潜伏期与游泳总路程显著延长(P 0. 01),穿越平台次数与目标象限时间显著减少(P 0. 01),第1次抵原平台时间明显增加(P 0. 05);与模型组比较,各给药组小鼠上平台潜伏期与游泳总路程明显减少(P 0. 05,P 0. 01),穿越平台次数与目标象限时间明显增加(P 0. 05,P 0. 01),第1次抵原平台时间明显减少(P 0. 05,P 0. 01)。Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组小鼠Bmal1 mRNA表达上调;与模型组比较,各给药组小鼠Bmal1 mRNA表达下调。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠Bmal1蛋白表达显著升高(P 0. 01);与模型组比较,褪黑素组、生慧汤高、低剂量组Bmal1蛋白表达显著降低(P 0. 01)。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组小鼠IL-6,TNF-α含量显著升高(P 0. 01);与模型组比较,各给药组IL-6,TNF-α含量显著降低(P 0. 01)。Pearson分析结果显示,IL-6,TNF-α与Bmal1具有相关性,且呈负相关关系。结论:生慧汤可能通过上调下丘脑区Bmal1基因的表达来降低海马区炎症因子IL-6,TNF-α蛋白含量,从而改善阿尔兹海默症(AD)和昼夜节律紊乱。