ＣＤ４５单抗介导的淋巴瘤荷瘤裸鼠三步法预定位放免显像

摘 要： 【目的】 评价生物素化ＣＤ４５单抗介导的９９ｍＴｃ－生物素在人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠模型中三步法预定位放免显像的价值。【方法】 ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记采用直接标记法。取人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠１８只,随机分为２组,每组９只。实验组为三步法预定位放免显像组,静注生物素化ＣＤ４５单抗１００ μｇ,４８ ｈ后静注亲和素２００ μｇ,再过４８ ｈ静注９９ｍＴｃ－生物素７．４ ＭＢｑ（２０ μｇ）;对照组为９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗放免显像组,静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗１００ μｇ。上述两组裸鼠分别于注药后３、６、１２ ｈ分别进行ＳＰＥＣＴ显像,每个时间点各取３只裸鼠断颈处死后,取脏器组织及肿瘤,称重后在γ计数仪中测量放射性计数,经放射性衰变校正后计算各脏器的％ＩＤ／ｇ及肿瘤／非肿瘤（Ｔ／ＮＴ）比值。【结果】平均每分子ＣＤ４５单抗约结合１２分子生物素,ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记率分别＞７０％和＞８０％。三步法给药后荷瘤裸鼠ＳＰＥＣＴ显像及生物分布示：整个显像期间血池内放射性均较低,肝脾见较多放射性浓聚;注射标记物后３－６ｈ,肿瘤显影清晰,并持续到１２ ｈ;注药后３、６和１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ分别为１．７３ ± ０．２２、１．２４ ± ０．０３和０．９４ ± ０．０７;肿瘤／血液比值分别为３．５、４．９和７．８;肿瘤／肌肉比值分别为８．２、８．９和１０．４。而静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗后则可见肝脾及肾脏明显放射性聚集,１２ｈ血池内见较多放射性分布,肿瘤部位见有少量放射性集聚,１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ为０．８９ ± ０．１３,肿瘤／血液及肿瘤／肌肉的比值分别为１．６和２．５。【结论】与９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗相比较,９９ｍＴｃ－生物素三步法预定位放免显像明显改善肿瘤Ｔ／ＮＴ比值,标记物注射后３ ｈ即可使肿瘤显影。     

运用三色ＦＩＳＨ技术确定自然流产夫妇染色体微小区域倒位

摘要： 【目的】 对２例婚后妻子连续２次流产伴２１号染色体结构改变病例进行多探针荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）,探讨ＦＩＳＨ技术在临床诊断微小区域染色体结构异常的应用价值。【方法】通过染色体常规Ｇ 显带技术初步确定染色体结构异常类型及染色体断裂的区带位置,然后挑选位于２１号染色体长臂位点特异性ＢＡＣ克隆,缺口平移法将其标记为探针,与２１号染色体长臂末端的商品化探针混合,进行三色ＦＩＳＨ。【结果】ＦＩＳＨ结果排除了涉及其它染色体结构异常的可能,确定这２例均为２１号染色体长臂微小区段的臂内倒位,这是首次关于２１号染色体臂内倒位导致自发流产病例的报道。【结论】２１号染色体臂内倒位与自然流产相关;多色ＦＩＳＨ 技术在诊断和确定微小区域染色体结构异常中有非常重要的作用和应用价值。     

血浆同型半胱氨酸和叶酸及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产

【目的】 探讨孕妇血浆同型半胱氨酸水平（Ｈｃｙ）、叶酸水平及ＭＴＨＦＲ基因多态性与早产的相关性。【方法】 采用病例对照研究,选取４４０例分娩孕妇为研究对象,其中早产临产孕妇（ｃａｓｅ ｇｒｏｕｐ）、同孕周健康孕妇（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）各２２０例。用高效液相色谱荧光检测法（ＨＰＬＣ－ＦＤ）检测两组孕妇血浆同型半胱氨酸水平和叶酸水平差异;１４Ｃ 放射法测定两组孕妇ＭＴＨＦＲ的活性;Ｔａｑｍａｎ－ＭＧＢ技术检测两组孕妇ＭＴＨＦＲ基因的５个ＳＮＰ分型差异。【结果】 早产临产孕妇的血浆Ｈｃｙ 水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显高于同孕周健康孕妇的血浆Ｈｃｙ水平 （７．５６ ± ２．９７ ｖｓ． ５．９６ ± ２．５４, Ｐ ＝ ０．０１５）,而早产临产孕妇的血浆叶酸水平（μｍｏｌ／Ｌ）明显低于同孕周健康孕妇血浆叶酸水平（１６．２１ ± ２．９１ ｖｓ． １８．５３ ± ３．４４, Ｐ ＝ ０．００２）。早产临产孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（ｎｍｏｌ·ｍｇ－１·ｈ－１）明显低于同孕周健康孕妇ＭＴＨＦＲ的活性（１３．３３ ± ３．１６ ｖｓ． ２６．８６ ± ５．６３, Ｐ ＝ ０．０００）。在ＭＴＨＦＲ基因中ｒｓ１８０１１３１和ｒｓ１８０１１３３在早产临产孕妇组与同孕周健康孕妇组的基因型分布差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 早产儿孕妇血浆同型半胱氨酸水平受叶酸水平影响,并与ＭＴＨＦＲ基因ＳＮＰ分型密切相关。     

继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症35例研究

 目的　研究继发性意义未明的单克隆免疫球蛋白血症（sMGUS）在接受不同治疗的多发性骨髓瘤（MM）患者中的发生率,分析其对患者的治疗反应和长期生存的影响。方法　回顾性分析515例MM患者的临床资料及血清免疫固定电泳（IFE）结果,分析sMGUS患者的IFE图谱特征,对sMGUS组和非sMGUS组疗效分布组成进行比较,对2组进行生存曲线分析。结果　515例MM患者中含接受自体造血干细胞移植（auto-SCT）治疗的患者73例,单纯联合化疗患者442例,共发现35例sMGUS,总发生率为6.8 %;经auto-SCT治疗和单纯联合化疗治疗后sMGUS的发生率分别为19.2 %（14／73）和4.8 %（21／442）,二者差异有统计学意义（χ2＝20.587,P＝0.002）;sMGUS组与非sMGUS组在初诊MM时的M蛋白类型分布差异无统计学意义（χ2＝6.396,P＝0.380）;sMGUS组与非sMGUS组完全缓解（CR）率分别为45.7 %（16／35）和14.3 %（59／480）,差异有统计学意义（χ2＝22.961,P＜0.001）,2组疗效分布组成经秩和检验分析,差异有统计学意义（P＜0.001）;经Kaplan-Meier法生存曲线分析,sMGUS组的中位生存时间为42个月（5～112个月）,非sMGUS组的中位生存时间为14个月（1～120个月）,二者差异有统计学意义（P＜0.001）,对auto-SCT治疗患者单独分析,经auto-SCT治疗后出现sMGUS的患者,中位生存时间为30.8个月（5～111个月）,未出现sMGUS的患者中位生存时间为39.3个月（2～120个月）,二者差异有统计学意义（P＝0.002）。结论　sMGUS的发生可能与免疫重建或经大剂量免疫抑制治疗后的免疫失调有关,MM经auto-SCT治疗后出现sMGUS的概率大于经单纯联合化疗治疗者,同非sMGUS患者相比,sMGUS患者有着更好的疗效和预后,但对于auto-SCT治疗患者,发生sMGUS并非是一个良好的预后因素。     

注射用丹参多酚酸盐联合培美曲塞及卡铂治疗老年人晚期非鳞非小细胞肺癌效果观察

目的 观察注射用丹参多酚酸盐联合培美曲塞及卡铂方案治疗老年人晚期非鳞非小细胞肺癌的效果和安全性。方法 经组织病理学或细胞学证实初治老年晚期非鳞非小细胞肺癌患者58例,通过区组随机化法分为对照组和观察组各29例。对照组给予培美曲塞＋卡铂方案化疗,观察组在对照组治疗基础上给予注射用丹参多酚酸盐200 mg／次,1次／d,静脉滴注,连用14 d。21 d为１个周期,4个周期后比较两组近期疗效、生活质量、不良反应发生及凝血指标改善情况。结果 观察组和对照组总有效率分别为44.8 %（13／29）、37.9 %（11／29）,疾病控制率分别为86.2 %（25／29）、75.8 %（22／29）, 两组近期疗效比较差异无统计学意义（P＞0.05）,观察组生活质量总改善率优于对照组[82.7 %（24／29）比65.5 %（19／29）]（P＜0.05）,血液学毒性和消化道反应发生率低于对照组（P＜0.05）,且观察组血液高凝状态改善情况优于对照组（P＜0.05）。结论 注射用丹参多酚酸盐联合培美曲塞、卡铂方案治疗老年人晚期非鳞非小细胞肺癌可降低化疗引起的不良反应,提高患者生活质量,改善肺癌患者的血液高凝状态,从而预防血栓栓塞性并发症的发生。     

预后好的早期霍奇金淋巴瘤的综合治疗

目的 探讨预后好的早期霍奇金淋巴瘤(HL)的治疗方法,分析其预后因素.方法 对137例预后好的早期HL进行回顾性分析,其中84例(61.3%)接受单纯放疗,53例(38.7%)接受联合放化疗.研究指标包括近期疗效,5年、10年总生存(OS)率,无瘤生存(DFS)率,复发和死亡原因.结果 单纯放疗组和联合化放组的完全缓解(CR)率分别为71.4%和86.8%(x2=4.381,P=0.036),5年、10年OS率分别为84.4%、78.2%和81.1%、81.1%(P=0.556),5年、10年DFS率分别为85.4%、66.7%和94.1%、94.1%(P=0.047).全组22例复发,中位复发时间为16.5个月;23例(16.8%)死亡,其中9例(39.1%)死于HL.结论与单纯放疗相比,联合化放疗能提高预后好的早期HL的CR率和DFS率,但不提高OS率.     

ＲＮＡｉ沉默ＰＥＬＰＩ／ＭＮＡＲ基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用

【目的】 构建脯氨酸－谷氨酸－亮氨酸富集蛋白１（ＰＥＬＰ１）基因慢病毒表达载体,研究沉默ＰＥＬＰ１／雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】 构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,并转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入Ｅ２的培养基培养各组细胞,ＭＴＴ检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期情况;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＥＲ下游靶基因ｃ－ｆｏｓ,ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的蛋白表达水平。【结果】 成功构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体,转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞,转染后 ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ的表达和蛋白的表达分别下降８６％和６５％（Ｐ ＜ ０．０５）。转染后Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞与对照组相比增殖抑制（Ｐ ＜ ０．０５）, 细胞周期Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增加,Ｓ期细胞比例减少 （Ｐ ＜ ０．０５）。加入雌激素后,三组细胞的生长速度加快,细胞Ｓ期的比例增加,转染组增殖抑制明显（Ｐ ＜ ０．０５）,Ｓ期比例降低（Ｐ ＜ ０．０５）。转染组ＥＲ下游基因ｃ－ｆｏｓ、ｃｙｃｌｉｎ－Ｄ１蛋白水平均显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 在子宫内膜癌细胞中沉默ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ的表达能能抑制细胞生长、使细胞阻滞在Ｇ１期,下调ＥＲ靶基因蛋白表达,ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ有望成为子宫内膜癌治疗的潜在靶点。     

肾部分切除术后急性肾损伤早期的监测指标

【目的】 探讨肾部分切除术后急性肾损伤指标早期监测效能。【方法】７６例肾癌患者在我院接受肾部分切除术,术后根据急性肾损伤诊断标准将患者分为两组：急性肾损伤组和非急性肾损伤组,采用受试者工作特征曲线评价急性肾损伤生化指标判断急性肾损伤的效能。【结果】 ２４例（３１．６％）患者术后发生急性肾损伤,其余５２例（６８．４％）患者术后未发生肾损伤,肾损伤组患者术中肾血管阻断的时间（ｍｉｎ）较非肾损伤组长（３０ ± １９ ｖｓ ２４ ± ９, Ｐ ＝ ０．０３）,肾损伤组有５例（２０％）患者术中接受输血而非肾损伤组仅有８例（１５％）患者接受输血（Ｐ ＝ ０．０１１）,肾损伤组患者住院时间较非肾损伤组患者长（Ｐ ＝ ０．０１７）。术后２４ ｈ和４８ ｈ血清胱抑素Ｃ水平具有良好预测急性肾损伤效能,其ＡＵＣ分别为０．７９０ ［９５％ＣＩ ０．６８８ ～ ０．８９３, Ｐ ＝ ０．０００ ）和０．７５４ （９５％ ＣＩ ０．６４６ ～ ０．８６３, Ｐ ＝ ０．０００）。多元回归分析发现术后急性肾损伤危险因素包括输血 （Ｐ ＝ ０．０２８）和术后２４ ｈ血清胱抑素Ｃ浓度（Ｐ ＝ ０．０１８）。【结论】术后血清胱抑素Ｃ可能是肾部分切除术后急性肾损伤早期监测指标,输血和术后血清胱抑素Ｃ浓度可能是术后急性肾损伤独立危险因素。     

RAB22A在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨RAB22A在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR检测60例乳腺癌及其相应癌旁组织中RAB22A mRNA的表达,分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果 RAB22A mRNA在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织 （4.9±1.1 vs 1.1±0.3,P＜0.01）。不同年龄、肿瘤大小以及不同ER、PR、HER-2表达状况乳腺癌患者中RAB22A mRNA的表达差异无统计学意义（P＞0.05）,但不同淋巴结转移数患者RAB22A mRNA表达差异有统计学意义（P＜0.05）,高表达RAB22A患者的总生存期较低表达患者差（P＜0.05）;多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示RAB22A和淋巴结转移数是影响预后的独立因素（P＜0.05）。结论 RAB22A在乳腺癌组织中表达升高,可能与乳腺癌转移和不良预后有关。