基于UPLC-LTQ-Orbitrap高分辨质谱的葛根芩连汤的化学成分分析

目的基于超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)的分析方法鉴定葛根芩连汤中化学成分。方法采用色谱柱Dikma Endeavorsil C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),体积流量0.3 mL/min,梯度洗脱。质谱采用ESI源,正负离子模式分别采集一级、二级质谱数据。结果通过对照品指认、软件预测分析,结合文献报道,从葛根芩连汤中鉴定出67个化合物,包括黄酮类36个、生物碱类12个、三萜类及三萜皂苷类4个及其他15个。结论利用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS系统阐明葛根芩连汤中化学成分,并初步归纳其各类主要化学成分的质谱裂解特点,为葛根芩根芩连汤的质量控制和作用机制研究提供了参考依据。     

以脾胃为中心的葛根相关配伍对糖尿病心肌病大鼠受损心肌线粒体的改善作用

目的:观察葛根及其配伍对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌线粒体质量变化的影响,探寻治疗糖尿病心肌病的最优配伍及机制。方法:采用链脲佐菌素腹腔注射进行模型大鼠制备,并将60只成模大鼠随机分为模型组6.5 g/(kg·d)、达美康组16.7 mg/(kg·d)、葛根组1.04 g/(kg·d)、葛芪组2.6 g/(kg·d)、葛参组2.6 g/(kg·d)、葛蒌组4.48g/(kg·d)及葛芪参蒌组7.6 g/(kg·d)各8只,同时选取空白大鼠8只,为对照组6.5 g/(kg·d)。各组依据上述剂量,以相应药物持续灌胃9周后,对比各组心肌线粒体超微结构变化、心肌线粒体膜电位变化及心肌ATP变化情况。结果:电镜显示各药物干预组心肌线粒体超微结构较模型组均有不同程度的改善,其中葛芪参蒌组改善效果最为明显,与空白组无明显差异; 流式细胞仪检测显示:各干预组波峰均在模型组、空白组之间; 其中葛芪参蒌组、葛参组、葛根组波峰位于达美康组右侧; 葛芪组、葛蒌组则位于达美康组左侧; 以葛芪参蒌组波峰与空白组最为接近。心肌ATP浓度检测显示:各中药干预组心肌ATP浓度均较模型组有所提升(P<0.05),其中葛芪参蒌组ATP值较其余各干预组提升最为明显(P<0.05),但仍低于空白组(P>0.05)。结论:葛根相关配伍均能够对心肌线粒体结构、心肌线粒体膜电位进行正向调控,进而使因糖尿病心肌病导致的心肌线粒体受损得以恢复,其中以益气、化瘀、祛痰三法合用的组方原则进行配伍的葛芪参蒌方改善效果最优。可见其治疗机制可能是通过益气、化瘀、祛痰的协同作用,正向调控心肌线粒体质量而达到治疗目的。     

粉葛根鉴别要点

药材鉴别要点粉葛药材呈圆柱形或类纺锤形,或半圆柱形;长12~15 cm,直径4~8 cm,有的为纵切或斜切之厚片,大小不一。表面黄白色至淡棕色,未去外皮的呈灰棕色。体重,质硬,富含粉性,其横切面可见由纤维形成的浅棕色同心性环纹,纵切面可见纤维形成的数条纵纹。气微,味微甜。     

颈椎手法斜扳整脊配合葛根天麻白术半夏汤在颈性眩晕治疗中的效果观察

目的探讨颈椎手法斜扳整脊配合葛根天麻白术半夏汤在颈性眩晕治疗中的临床效果。方法选取2016年12月至2018年12月我院60例颈性眩晕患者为研究对象,依照入院单双号分为2组,对照组30例患者接受颈椎手法斜扳整脊治疗,研究组30例患者在对照组的基础上接受葛根天麻白术半夏汤治疗,比较两组患者的治疗总有效率、治疗前后症状改善情况、血清学指标水平及椎-基底动脉血流速度变化。结果研究组治疗总有效率显著高于对照组(P <0.05),治疗后两组ESCV评分均比治疗前明显升高,且研究组显著高于对照组(P <0.05),治疗后两组血清TXB2及PAF水平比治疗前均明显降低,且研究组显著低于对照组(P <0.05),与治疗前相比,治疗后两组患者椎-基底动脉血流速度均明显提高,且研究组显著高于对照组(P <0.05)。结论在颈椎手法斜扳整脊治疗基础上,配合葛根天麻白术半夏汤可有效改善患者的临床症状及-基底动脉血流,降低血清TXB2及PAF水平,疗效确切,对促进颈性眩晕患者病情康复具有积极意义。     

微波萃取葛根总黄酮工艺及其抗氧化活性研究

目的优化葛根总黄酮的微波萃取工艺,测定所得总黄酮的体外抗氧化活性。方法采用响应面法,考察液料比、醇浓度、微波功率、微波时间对微波萃取葛根总黄酮效率的影响,采用比色法测定其体外抗氧化活性。结果微波萃取葛根总黄酮的最佳工艺为:液料比43:1,、醇浓度42%、微波功率828 W、萃取时间23 min;葛根总黄酮对ABTS阳离子自由基清除率达81.7%,对DPPH自由基清除率最高达74.4%。结论建立的微波萃取总黄酮模型可靠,所得葛根总黄酮含量为11.74%,具有较强的抗氧化活性。     

葛根芩连汤调控MMP-9/p38 MARK途径修复溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜上皮屏障功能

目的 探讨葛根芩连汤对溃疡性结肠炎（UC）小鼠肠黏膜上皮屏障功能的保护作用，并通过基质金属蛋白酶-9（MMP-9）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路探究其治疗UC的作用机制。方法 48只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶组（0.3 g·kg^-1）及葛根芩连汤高、中、低剂量组（2.84，1.42，0.71 g·kg^-1）。采用3%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液构建UC小鼠模型，葛根芩连汤和柳氮磺吡啶于造模后第8天灌胃给药，连续7 d，正常组给予等量生理盐水处理。末次给药后取结肠组织，苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化，免疫组化（IHC）观察结肠组织紧密连接（TJ）蛋白，如闭合蛋白（Occludin），闭锁连接蛋白-1（ZO-1）的表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测结肠组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-1β（IL-1β），MMP-9 mRNA表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织中磷酸化（p）-p38 MAPK，p38 MAPK和MMP-9蛋白的表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠体质量显著下降（P<0.01），疾病活动指数（DAI）评分显著升高（P<0.01），结肠黏膜上皮破损并可见黏膜和黏膜下层炎细胞浸润明显，Occludin，ZO-1蛋白表达显著降低（P<0.01），TNF-α，IL-1β，MMP-9 mRNA相对表达量显著升高（P<0.01），p-p38 MAPK和MMP-9蛋白表达显著升高（P<0.01）；与模型组比较，柳氮磺吡啶组、葛根芩连汤各剂量组小鼠体质量和DAI评分均有明显改善（P<0.05，P<0.01），结肠组织损坏明显改善，Occludin，ZO-1蛋白明显增多（P<0.05，P<0.01），TNF-α，IL-1β，MMP-9 mRNA相对表达量显著下降（P<0.01），p-p38 MAPK和MMP-9蛋白表达显著下降（P<0.01），其中葛根芩连汤各组中以中剂量组的变化最为明显。结论 葛根芩连汤能够通过抑制MMP-9和炎性细胞因子TNF-α，IL-1β的表达，阻断p38 MAPK信号通路的激活，增加TJ蛋白的表达，从而修复肠道黏膜屏障功能。     

生物黏附辅料对葛根总黄酮类化合物在Caco-2细胞模型中转运的影响

目的:葛根总黄酮（PTF）可治疗心脑血管疾病，但膜通透性差，口服生物利用度低。一些辅料如卡波姆、壳聚糖和羟丙基甲基纤维素可以提高口服生物利用度。传统的体外评价技术，包括大鼠肠灌流和细胞模型，不能评价PTF整体的吸收机制。方法:本研究评价辅料的黏附性及对PTF在Caco-2细胞单层模型中转运的影响。采用cDNA微阵列测定PTF和PTF+辅料给药后的Caco-2细胞的基因表达变化，从基因水平揭示辅料对PTF整体吸收的影响机制。结果:体外黏附和Caco-2细胞转运实验表明，与单独PTF相比，加入辅料后对胃黏膜具有更高的黏附性，且在Caco-2细胞模型中的转运效率更高。PTF与辅料的相互作用显著改变了某些基因的表达，可能影响PTF的吸收效率。结论:不同的生物黏附聚合物能提高PTF的肠道吸收，可能与ATP结合盒(ABC)和溶质载体转运体(SLC)的表达基因有关。     

葛根芩连汤保翩灌肠对湿热下注型溃疡性直肠炎患者血清 CRP 及 IL-8 影响的研究

简版：目的：观察葛根芩连汤对溃疡性直肠炎患者外周血中C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-8 (IL-8)的影响。方法：纳入溃疡性直肠炎患者60例，按照随机数字表法将其分为2组各30例。观察组采用葛根芩连汤基础方灌肠，对照组采用复方黄柏液灌肠。治疗半个月，观察并记录2组用药前后的症状（腹痛、肛门灼热或坠胀、里急后重感等）、体征，用以评价临床疗效，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组血清中的CRP、IL-8的水平变化并使用电子结肠镜检测2组治疗前后肠黏膜变化情况。