液膜法提取发酵液中的苯丙氨酸 Ⅱ.操作工艺条件

从芫花Ｄａｐｈｎｅ ｇｅｎｋｗａ条的乙酸乙酯可溶部分分到３个结果性化合物，借助于波谱分析手段推断出Ⅱ为西瑞香素，Ⅲ为ｄａｐｈｎｏｄｏｒｉｎ Ｂ。     

3种抗肿瘤有毒蒙药的研究进展

随着社会发展和生活水平的提高,恶性肿瘤已经成为影响人类健康的重大疾病之一。有毒蒙药在治疗疾病及救治疑难杂症中具有重要作用。多种有毒蒙药有一定的抗肿瘤作用,且有着良好的治疗效果,但由于其本身的毒性,使其在临床上的应用受到很大的限制。蒙医在实践中不断摸索出有毒蒙药的多种减毒方法,如采用配伍、炮制等减毒手段进行处理,以达到降低毒性、提高疗效的作用。通过对3种代表性有毒蒙药斑蝥Mylabris、草乌Aconiti Kusnezoffii Radix、瑞香狼毒Stellerae Chamaejasmes Radix的抗肿瘤作用、毒性机制及减毒策略进行综述,为其临床用药及新药开发提供依据。     

不同极性溶媒瑞香狼毒提取物的抗肿瘤活性比较

目的：通过比较不同极性溶媒瑞香狼毒提取物的体外抗肿瘤活性，确定瑞香狼毒抗肿瘤活性成分所在的极性区间。方法：采用索氏回流提取法，依次用石油醚、乙酸乙酯、丙酮和乙醇对狼毒进行回流提取，并用不同浓度的各溶剂提取物分别处理Eca109、K562、HepG_2细胞株，通过MTT检测法，比较各溶媒提取物对肿瘤细胞的抑制活性。结果：石油醚提取物和乙酸乙酯提取物对体外培养肿瘤细胞表现出较强的抑制作用，在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性，石油醚提取物最大抑制率分别为78％(Eca-109)、93％(K562)、95％(HepG_2)，乙酸乙酯提取物最大抑制率分别为53％(Eca-109)、91％(K562)、87％(HepG_2)；而丙酮和乙醇提取部位在测定浓度范围内则显示出很弱的抑制作用；在各提取物中石油醚提取物的体外抗肿瘤作用最强。结论：石油醚提取成分是瑞香狼毒中体外抗肿瘤活性最强的部位。     

瑞香狼毒提取物抗实验性癫痫筛选研究

目的　对瑞香狼毒六种提取物 (依次为瑞香狼毒水、生离物、丙酮、石油醚、乙醚、乙醇提取物 )进行药效学及毒性比较研究 ,筛选出一种高效低毒的抗癫痫化合物 ,便于临床前机制探讨。方法　采用动物三种惊厥模型 ,测定瑞香狼毒六种提取物抗实验性癫痫半数有效量 (ED50 )。计算其半数致死量 (L D50 )。结果　瑞香狼毒提取物 ～ ,即丙酮、石油醚、乙醚、乙醇四种提取物对小鼠最大电休克发作实验 (MES)、戊四唑惊厥实验(MET)和电刺激大鼠皮层惊厥阈值 (TL S)模型均具有较强的对抗作用。而其中丙酮提取物毒性较低 ,治疗指数高达 14 .9。结论　瑞香狼毒丙酮提取物是一种抗惊厥作用较强而毒性小的有希望的抗癫痫化合物。     

瑞香素杀疟原虫裂殖体的作用

[目的 ]研究中药瑞香素在体外和体内的杀裂殖体作用。 [方法 ]在恶性疟原虫FCCl株常规体外培养中测试瑞香素杀裂殖体活性 ,并按“四天抑制性试验”在感染伯氏疟原虫ANKA株的小鼠中测定不同剂量瑞香素的体内抗疟活性。 [结果 ]体外试验中瑞香素在 1～ 10 μmol L剂量范围内有明显杀灭裂殖体作用 ,而体内试验中按D4减虫率与感染鼠在 30d内的平均生存天数评价 ,5 0或 10 0mg kg .d- 1 × 4d瑞香素灌胃以及 10 ,5 0或 10 0mg kg.d- 1 × 4d瑞香素腹腔注射给药在伯氏鼠疟原虫ANKA株感染鼠中的抗疟作用与 10mg kg .d- 1 × 4d氯喹 (CQ)灌胃的疗效相似。 [结论 ]瑞香素在体外和体内均有一定的杀裂殖体作用。     

不同炮制方法对瑞香狼毒化学成分的影响

目的：考察不同炮制方法对瑞香狼毒化学成分的影响。方法采用系统预试法,包括理化和薄层色谱（TLC）鉴别,检测瑞香狼毒生品和炮制品中化学成分的异同。结果（1）瑞香狼毒生品和炮制品中均含有糖类、苷类、酚类、鞣质类、有机酸类、皂苷类、黄酮类、甾体、三萜类、香豆素内酯类成分,可能含有挥发油、油脂类成分。水提液中酚类、鞣质类和皂苷类成分有差异。（2）水提液中,奶制品的黄酮类成分含量较低;乙醇提取液中,生品和三种炮制品的黄酮类成分基本相同。（3）水提取液中,醋制品的香豆素内酯类成分含量较高;乙醇提取液中,奶制品的香豆素内酯类成分含量较低。（4）水提取液中,生品的萜类成分含量较高;乙醇提取液中,生品和奶制品的萜类成分含量较高。结论不同炮制方法对瑞香狼毒的化学成分都有影响。     

实时荧光定量PCR测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶基因表达的影响

目的测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶（RNR）基因表达的影响。方法体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素及其衍生物DA78与DA79作用后,抽提总RNA,并合成相应的特异性引物,运用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫RNR基因表达的影响。结果恶性疟原虫体外经瑞香素及其衍生物作用后的RNR基因扩增标准曲线在10^5～10^9拷贝（copies）/ml范围内呈良好的线性关系,R^2为0.997 52;瑞香素及其衍生物DA78与DA79对恶性疟原虫RNR作用后,其原始拷贝数分别为81 173.23、124 830.83和74 801.35,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,而瑞香素的铁螯合能力被饱和后,对该基因的表达未产生显著抑制（P〉0.01）。结论瑞香素类抗疟化合物体外抑制恶性疟原虫RNR的基因表达,RNR可能作为瑞香素类抗疟化合物抗疟作用的候选靶分子之一。     

消乳散结胶囊联合他莫昔芬治疗乳腺增生症的疗效观察

目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme花中黄酮和木脂素类化学成分及其抗氧化活性,分析构效关系。方法 利用大孔吸附树脂、正反相硅胶、Sephadex LH-20等色谱分离材料,通过柱色谱和高效液相色谱等分离方法进行分离纯化,运用核磁共振（NMR）、质谱（MS）等波谱技术鉴定化合物结构,并采用FRAP法、DPPH法和ABTS法对分离得到的化合物进行体外抗氧化活性测试。结果 从瑞香狼毒花甲醇提取物中分离鉴定了12个化合物,分别鉴定为艾黄素（1）、槲皮素（2）、isoscutellarein-8-O-β-D-glucuronopyranoside（3）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（4）、紫云英苷（5）、hypolaetin-8-O-β-D-glucuronopyranoside（6）、kaempferol 3-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-α-L-xylopyranoside（7）、rel-（3R,3''S,4R,4''S）-3,3'',4,4''-tetrahydro-6,6''-dimethoxy[3,3''-bi-2H-benzopyran]-4,4''-diol（8）、马台树脂醇（9）、乌拉尔醇（10）、环黄芪醇（11）、松脂醇（12）。抗氧化活性实验表明,黄酮和木脂素类化合物均显示了较强的抗氧化活性。结论 化合物1、3、5～7和10为首次从该植物中分离得到;化合物2、4、5和10表现出显著的抗氧化活性,其中黄酮类化合物C-3或C-8位连有糖链会降低其抗氧化活性。     

E003对RSA模型小鼠蜕膜组织超微结构的影响

目的　观察瑞香素（daphnetin）即E003处理后RSA模型小鼠蜕膜组织形态结构的改变。 方法　建立反复自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）模型小鼠后,实验分正常妊娠组、RSA模型组、E003低剂量组和E003高剂量组共4组,E003连续灌胃处理14 d后,取蜕膜组织。光镜下观察蜕膜组织血管和细胞形态,电镜下观察蜕膜组织超微结构。 结果　解剖子宫计算胚胎吸收率,E003处理组（低剂量组和高剂量组）低于RSA模型组,差异具有统计学意义,P<0.05;E003高剂量组胚胎吸收率与正常妊娠组相比无统计学差异,P>0.05。光镜下可见RSA模型组蜕膜细胞碎裂,数量较正常妊娠组减少;E003低剂量组和高剂量组蜕膜细胞数量均较模型组增多,排列较整齐。电镜下RSA模型组较正常妊娠组蜕膜细胞体积减小,细胞间隙增大,血管壁不完整,血管内皮细胞结构不完整,细胞核呈梭形;E003低剂量组与模型组比较,蜕膜细胞体积增大,细胞间隙增大,血管壁较完整,血管内皮细胞呈长梭形,细胞结构较完整,细胞间隙稍增宽;E003高剂量组蜕膜细胞组织及血管壁接近正常妊娠组。 结论　RSA模型小鼠存在母胎界面血管生成障碍,E003可修复RSA模型小鼠蜕膜组织中破坏的细胞结构,改善血管生成和细胞器形态,对RSA模型小鼠具有一定的治疗作用。     

瑞香狼毒花中香豆素成分及生物活性研究

目的研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme花中的香豆素类化学成分及其抗菌和抗氧化活性。方法综合运用多种色谱分离技术进行分离纯化,并采用现代波谱学分析技术结合文献报道数据进行鉴定。对分离得到的9个香豆素类化合物进行了体内外抗氧化活性和体外抗菌活性研究。首先,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP)法评价单体化合物抗氧化活性。然后用模式生物秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans建立胡桃醌诱导氧化损伤应激模型,通过H2DCFDA荧光染色实验,评价化合物9对氧化应激条件下秀丽隐杆线虫生存能力及体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。此外,采用牛津杯法对单体化合物进行抗大肠杆菌Escherichia coli、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、金黄色葡萄球菌Saphyloccu sepidermidis和酵母菌Saccharomyces cereviviae的活性筛选。结果从瑞香狼毒花甲醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为7-羟基香豆素-8-O-β-D-葡萄糖苷(1)、瑞香苷(2)、瑞香素(3)、7-羟基-8-甲氧基香豆素(4)、东莨菪葶(5)、5,7-二甲氧基香豆素(6)、伞形花内酯(7)、白瑞香素(8)、双白瑞香素(9)、3-O-咖啡酰奎尼酸(10)和腺苷(11)。化合物1、6、8、10、11为首次从该植物中分离得到,化合物11为首次从该属植物中分离得到。结论体外抗氧化活性测试结果显示化合物3和9活性显著。体内抗氧化活性实验证实化合物9(28μmol/L)能显著延长线虫在氧化应激条件下的寿命(P<0.0001),且可显著降低线虫体内ROS水平(P<0.001),增强线虫的抗氧化应激能力。化合物9显示出一定的大肠杆菌抑制活性,其最小抑菌浓度(MIC)值为1.0 mg/mL。