丹瓜方对糖尿病动脉粥样硬化大鼠炎性标志物及内皮细胞功能的影响

目的观察丹瓜方对高脂糖尿病动脉粥样硬化大鼠炎症标志物及内皮细胞功能的影响。方法选取GK自发性糖尿病鼠40只,以高脂饲养联合代谢抑制丙基巯氧嘧啶及内皮型一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯,塑造高脂糖尿病动脉硬化模型。将糖尿病成模鼠按体重分层、再按血糖由高至低根据随机数字表法分为丹瓜方组[8 m L/(kg·d)]、二甲双胍组[150 mg/(kg·d)]、辛伐他汀组[2 mg/(kg·d)]、模型组[无菌水,8 m L/(kg·d)],每组10只。另取同龄、体重可比Wistar大鼠10只作为正常组并饲以常规饲料。灌胃给药,每日1次,干预24周。检测炎性标志物hs-CRP、IL-6及血管内皮因子内皮型一氧化氮(e NO)、内皮素1(ET-1)及TNF-α及其m RNA表达,血管性血友病因子(v WF)及其m RNA表达。结果与正常组比较,模型组空腹血糖、Hb A1c、TC、LDL-C、hs-CRP及TNF-α水平升高,NO水平降低(P0.01),TNF-α、v WF免疫组化阳性率及TNF-αm RNA表达升高(P0.01)。与模型组比较,各用药组FBG、TC、LDL-C降低,二甲双胍组hs-CRP及TNF-α水平降低,NO水平及v WF m RNA表达升高(P0.05,P0.01),丹瓜方组Hb A1c、TG、hs-CRP、TNF-α及TNF-α免疫组化阳性率降低,NO水平升高(P0.05,P0.01),辛伐他汀组TNF-α免疫组化阳性率降低,3组TNF-αm RNA的表达降低(P0.01)。与二甲双胍组比较,丹瓜方组TC、LDL-C降低(P0.01)。结论丹瓜方对合并高血脂的动脉粥样硬化糖尿病鼠的部分血管炎性标志物具有多层次干预作用,对血管内皮细胞功能有一定改善作用。     

丹瓜护脉口服液干预2型糖尿病患者主要心血管危险因素的临床研究

目的研究痰瘀同治丹瓜护脉口服液对2型糖尿病心血管高危患者炎症标志物及心血管预后的影响。方法按1∶1随机将纳入2型糖尿病患者分为试验组和对照组各70例。两组均按临床需要,在饮食控制及运动基础上,予常规降糖、降压、降脂及抗血小板等治疗;试验组在此基础上加用丹瓜护脉口服液。每个疗程8周,治疗3个疗程,随访3年。观测体重指数、腰臀比、血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、收缩压、舒张压、吸烟情况、高敏C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、同型半胱氨酸(Hcy)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)水平。比较两组治疗后中医证候疗效。记录随访中患者冠心病、终点事件及低血糖反应发生情况。结果 3个疗程结束时两组各有69例患者获得治疗后评估。与本组治疗前比较,试验组CRP水平降低,对照组TNF-α水平升高(P0.05)。与对照组比较,试验组治疗后TC、LDL-C水平升高,TNF-α、CRP及IL-6水平降低(P0.05);试验组第2个疗程HbA1c及第3个疗程PBG、HbA1c水平均降低(P0.05)。治疗后试验组胰岛素用量为(28±6)IU,低于对照组[(36±9)IU,P0.05]。与对照组比较,试验组冠心病发病率、全部终点事件发生率、低血糖反应总次数降低(χ~2=4.538,5.966,4.577,P0.05),中医证候疗效的有效率升高(χ~2=4.835,P0.05)。结论初步观察到痰瘀同治丹瓜护脉口服液在降低2型糖尿病心血管高危患者血清炎症标志物,改善心血管预后的影响。     

丹瓜方对ApoE－/－糖尿病模型小鼠脑组织Caspase-3蛋白及Bcl-2、Bax mRNA表达水平的影响

目的研究丹瓜方对糖尿病模型Apo E－/－小鼠糖脂代谢、脑组织胱冬肽酶－3（Caspase-3）蛋白表达及β淋巴细胞瘤基因－2（Bcl-2）、Bax mRNA表达水平的影响。方法采用链脲佐菌素（streptozo tocin,STZ）注射法对Apo E－/－小鼠制备糖尿病模型。将成模后的32只小鼠按体重分层,再按血糖水平排序,采用随机数字表分为模型组［无菌水（SW）,15 mL/（kg·d）］、丹瓜方组［丹瓜方（DGR）, 15 mL/（kg·d）］、联合组［吡格列酮（PG） 4.3 mg/（kg·d）＋DGR 15 mL/（kg·d）］及吡格列酮组［PG, 4.3 mg/（kg·d）］,每组8只。另选血糖正常的8只同龄同品系C57小鼠作为对照组。灌胃干预12周。监测空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）,测定血清TC、LDL-C水平;实时荧光定量PCR（qPCR）法检测Apo E－/－小鼠脑组织Bcl-2、Bax mRNA表达,采用Western blot法测定脑组织Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组Apo E－/－小鼠血清FBG、TC、LDL-C及脑组织Caspase-3表达水平升高（P<0.01）;与模型组比较,丹瓜方组FBG、TC及LDL-C水平降低,Bcl-2、Bax mRNA水平升高（P<0.01, P<0.05）。丹瓜方组Caspase-3蛋白表达水平低于模型组、联合组及吡格列酮组各组（P<0.01）;联合组Bcl-2/Bax 比值高于模型组（P<0.05）,丹瓜方组高于吡格列酮组（P<0.01）。结论丹瓜方可调节糖尿病糖脂代谢及脑组织Caspase-3蛋白及Bcl-2、Bax mRNA表达,可能对糖尿病造成的脑组织细胞凋亡有一定的防治作用。     

基于代谢病肝病传脾探索早期干预2型糖尿病的新思路

能量过剩已经成为日益严峻的危害我国人群健康的主因。过剩的能量以甘油三酯的形式主要在肝脏、也可在胰腺等器官异位沉积,产生慢性氧化和硝基化应激(ONS)及脂毒性,导致胰岛素抵抗和胰岛功能受损,进而出现糖调节受损(脾瘅)。结合中医病因病机及证候分析,此一过程具有"肝病传脾"的特点。依据多项相关指南和临床实践,论证了痰瘀同治法是干预代谢病肝病传脾的治法。此思路有助于将主要代谢性疾病——非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和2型糖尿病的防治有机整合,提高中医药的临床效果和效率。     

糖脂代谢病肝病传脾基因本质研究

目的 基于非酒精性脂肪肝（NAFLD）与糖调节受损（IGR）研究代谢病肝病传脾的基因本质。方法 108 只血糖正常 SD 大鼠，按体重分层、血糖随机分为对照组（饲以常规饲料）、模型组、预防组（饲以高糖饲料），建立 NAFLD 及 IGR 模型。 预防组同步用痰瘀同治的丹瓜方干预。 共 12 周。 观察 NAFLD 和IGR 的发病率、相关指标，做肝组织 HE、MASSON 及油红 O 染色。 以 Illumina Hiseq2500 仪做转录组全基因表达及 isoform 对照分析。 结果 与对照组比较，模型组超声检测脂肪肝发病率显著增高及肝重增加（P<0.01），肝 CT 值、CT 值肝/脾和肝/肾比值显著降低（P<0.05），病理形态肝细胞排列较混乱，肝小叶结构不清晰，出现大量红色脂滴，汇管区纤维化并沿着肝小叶节段性延伸。 模型组 OGTT 0 h 及 2 h 血糖、2 h 血浆胰岛素水平（P2INS）、葡萄糖曲线下面积（G-AUC）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、IGR 发病率较对照组显著升高（ P <0.05， P <0.01）;胰岛素分泌指数（ HOMA-茁）、胰岛素敏感指数 （HOMA-ISI） 显著下降（P<0.01）。 基因表达分析结果显示模型组在 17 032 个基因中有 257 个发生显著性差异表达，其中包括成脂基因 9 个，能量代谢基因 15 个，胰岛功能基因 7 个，胰岛素抵抗基因 21 个。 与模型组比较，预防组脂肪肝发病率显著降低，肝重减轻（P<0.05），CT 值肝/肾比值升高（P<0.01），病理显著改善;同时 OGTT 2 h 血糖、G-AUC、IGR 发病率，P2INS、糖负荷后 HOMA-IR 显著降低（P<0.05， P<0.01）;糖负荷后 HOMA-ISI 显著升高（P<0.01），并恢复了四类基因中大部分异常表达的基因。 结论 代谢病肝病传脾存在成脂基因、能量代谢基因、胰岛功能基因、胰岛素抵抗基因的异常表达，干预这些基因的表达阻滞了肝病传脾的发展，这些异常表达的基因可能在代谢病肝病传脾的演变机制中起到了一定的作用。