补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症肾阳虚血瘀证模型大鼠HIF-1α、PHD2、VHL表达的影响

目的观察补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)肾阳虚血瘀证模型大鼠缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)、希佩尔-林道抑癌基因(von Hippel Lindau disease,VHL)表达的影响,探讨EM发病机制及补肾温阳化瘀方治疗EM的作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只。其中正常组、假手术组常规饲养,模型组、中药组、西药组采用"延长冰箱冷冻加冰水浸泡"30天,再结合"自体移植法"创建EM肾阳虚血瘀证模型。术后中药组给予补肾温阳化瘀方(3.33 g/mL)1mL灌胃,西药组予以孕三烯酮0.5 mg/(kg·d)灌胃,模型组、正常组、假手术组灌服等体积的生理盐水,共给药4周。观察大鼠异位灶大小及形态,放免法检测血清CA125、血浆环磷酸腺苷(cAMP)、血浆环磷酸鸟苷(cGMP)的表达,HE染色光镜观察子宫在位内膜及异位组织形态学的变化,免疫组化SABC法、Western blot法检测HIF-1α、PHD2、VHL蛋白表达及含量,RT-PCR方法检测HIF-1α、PHD2、VHL mRNA表达。结果模型组大鼠异位灶生长明显,中药组、西药组治疗后,异位灶体积明显缩小。与正常组及假手术组比较,模型组CA125及cGMP水平明显升高,cAMP水平明显降低(P0.05);HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均升高(P0.05),PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均降低(P0.05)。与模型组比较,中药组及西药组CA125及cGMP水平明显降低,cAMP水平明显升高,HIF-1αmRNA、蛋白表达及含量均降低,PHD2、VHL mRNA、蛋白表达及含量均升高,差异均有统计学意义(P0.05)。与中药组比较,西药组PHD2蛋白含量更高(P0.05)。HIF-1α与PHD2呈负相关(r=-0.799,P=0.00),HIF-1α与VHL呈负相关(r=-0.625,P=0.003)。结论补肾温阳化瘀方可有效治疗EM,其作用机制可能与降低HIF-1α、CA125、cGMP含量,上调PHD2、VHL、cAMP表达有关。     

芪苈强心胶囊对AMI致CHF大鼠脂肪酸代谢的影响

目的观察复方中药芪苈强心胶囊对急性心肌梗死(AMI)致心力衰竭(CHF)大鼠脂肪酸代谢的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立AMI大鼠模型,术后第5周利用小动物超声仪评价CHF大鼠模型,并将大鼠随机分为正常组(12只)、假手术组(12只)、模型组(11只)、芪苈强心组(10只)和贝那普利组(11只)。芪苈强心组以1 g/(kg·d)芪苈强心胶囊灌胃给药,贝那普利组以10 mg/(kg·d)贝那普利片灌胃给药,正常组、假手术组和模型组同期灌胃等体积的生理盐水,均为每日1次。给药8周后,利用全自动生化仪检测血清游离脂肪酸(FFA)水平,应用气相色谱仪观察各组大鼠心肌组织n-6系多不饱和脂肪酸(n-6 PUFAs)水平,同时采用Spearman相关性分析二者之间的相关性。结果与正常组及假手术组比较,模型组大鼠血清FFA水平和心肌组织n-6系PUFAs含量均明显升高(P0.01);与模型组比较,芪苈强心组和贝那普利组大鼠血清FFA水平和n-6系PUFAs含量显著降低(P0.01)。血清FFA与心肌组织C18:2 n-6、C20:4 n-6及C22:4 n-6呈正相关(r=0.923、0.911、0.798,均P0.01)。结论芪苈强心胶囊可降低心肌组织n-6系PUFAs水平,减少FFA释放入血,且与n-6系PUFAs水平呈正相关,可减轻脂肪酸堆积,改善脂质代谢,从而有效防治慢性心力衰竭。     

蛋白聚糖型脊柱骨骺干骺端发育不良1 例报告

目的探讨ACAN基因突变引起的常染色体隐性遗传疾病蛋白聚糖型脊柱骨骺干骺端发育不良(SEMD)的临床和基因诊断。方法回顾分析1例SEMD患儿的临床资料和基因检测结果,并复习相关文献。结果 7岁矮小女性患儿,排除生长激素缺乏症、特发性矮小、甲状腺功能低下等常见矮小病因后,结合家族史及临床表现,高度疑似SEMD。经知情同意后,患儿经高通量测序基因检测,证实为ACAN基因c.512CT纯合突变,符合蛋白聚糖型SEMD诊断;父母特定位点基因分析,均为杂合子。结论临床上特殊类型矮小患儿高度怀疑SEMD时,应尽早行基因检测以明确诊断。     

补肾调经方对小鼠体外培养卵泡卵母细胞BMPRⅡ/ALK6-Smads表达的影响

目的观察补肾调经方对小鼠体外培养窦前卵泡成活数及卵母细胞骨形成蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic protein receptorⅡ,BMPRⅡ)/激活素受体样激酶6-Smads(activin receptor-like kinase6-drosophila mothers against decapentaplegic proteins,ALK6-Smads)信号通路的影响,探讨其提高体外生长卵泡卵母细胞质量的作用机制。方法 65只12日龄健康雌性昆明小鼠,采用机械法分离其窦前卵泡,分别以正常大鼠血清、高、中、低剂量补肾调经方大鼠含药血清、高剂量补肾调经方大鼠含药血清+K02288孵育,分为对照组、补肾高、中、低剂量组(即补肾组)、抑制剂组,普通法体外培养。培养第6天比较补肾组与对照组窦前卵泡成活数,实时荧光定量PCR法检测卵母细胞中BMPRⅡ、ALK6、Smad1、Smad5、Smad8mRNA表达;细胞免疫荧光法检测上述指标和磷酸化的Smad1/5/8(phospho-Smad1/5/8,p-Smad1/5/8)蛋白表达水平。结果与对照组比较,补肾高剂量组窦前卵泡成活数增加,补肾各剂量组BMPRⅡ、ALK6、Smad5、Smad8 mRNA表达水平升高,上述指标及p-Smad1/5/8蛋白表达水平升高,补肾高、中剂量组Smad1 mRNA及其蛋白表达水平升高(P0.05)。与补肾高剂量组比较,抑制剂组p-Smad1/5/8蛋白表达降低(P0.05)。结论补肾调经方能增加体外培养窦前卵泡成活数,提高卵母细胞质量,其作用机制可能与调控卵母细胞中BMPRⅡ/ALK6-Smads信号通路有关。     

SCOPD合并SAP患者心肺有关标志物及炎症因子观察

目的研究稳定期慢性阻塞性肺病(SCOPD)合并稳定性心绞痛(SAP)患者血清心肺有关标志物特征与关联。方法选择SCOPD合并SAP患者242例(合并组)、SCOPD患者60例(SCOPD组)、健康体检者30名(健康组)。采集受试者一般资料,采空腹静脉血检测N端脑钠肽前体(NT-proBNP)、c Tn I、Clara细胞分泌蛋白(CC16)、表面活性蛋白-D(SP-D)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)及C反应蛋白(CRP),并行肺功能检测,比较上述指标的差异,并在SCOPD组及合并组患者中进行亚组分析,对合并组上述标志物进行线性相关分析。结果与健康组比较,两个患者组NT-pro-BNP、c Tn I、SP-D、IL-1β及CRP升高(P0.05),SCOPD组低于合并组(P0.05);而CC16和IL-10降低(P0.05),合并组低于SCOPD组(P0.05)。亚组分析显示大部分指标亦随病情加重而波动。合并组血清NT-pro-BNP、c Tn I与CC16呈负相关(P0.01),与SP-D呈正相关(P0.01);心肺有关标志物与部分炎症标志物相关(P0.01)。结论 SCOPD合并SAP患者较SCOPD患者心肺损伤严重,炎症可能是其重要机制,且心肺有关标志物之间具有相关性。