板蓝根水提物预防大鼠高脂血症

目的观察板蓝根Isatidis Radix水提物对大鼠高脂血症形成的影响。方法将72只雄性SD大鼠随机分成6组,正常对照组,模型组,板蓝根水提物低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg)及非诺贝特(20 mg/kg)组,灌胃给药40 d,每5 d记录1次体质量。除正常对照组大鼠喂食普通饲料外,其余5组均给予高脂饲料。实验结束后处死大鼠,对脂体比、血脂水平、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)进行检测,光镜观察肝组织病理变化。结果板蓝根水提物显著降低体质量、脂肪质量、脂体比;显著减少总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平;显著增加LPL、HL活性;显著降低血清和肝组织中MDA含有量,升高SOD活性。与模型组相比,板蓝根水提物各组和非诺贝特组中肝组织脂肪变性有所改善。结论板蓝根水提物可通过调节脂质代谢来预防大鼠高脂血症的形成。     

氢溴酸樟柳碱对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞凋亡及ERK1/2磷酸化水平的影响

目的:研究氢溴酸樟柳碱对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞凋亡及细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化(p-ERK1/2)水平的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(尼莫地平1.0 mg/kg)和氢溴酸樟柳碱高、中、低、极低剂量组(1.2、0.6、0.3、0.15 mg/kg),每组8只,采用线栓法建立大鼠急性脑缺血再灌注损伤模型。分别于脑缺血2 h和再灌注6 h时对各组大鼠尾iv给药1次,再灌注22 h后检测各组大鼠脑组织三磷酸腺苷(ATP)酶活性、Ca~(2+)含量、细胞凋亡情况、脑组织中p-ERK1/2蛋白表达和p-ERK1/2/总ERK1/2(t-ERK1/2)比例。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织ATP酶活性明显降低、Ca~(2+)含量明显增加、凋亡细胞密度明显增加,以上差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠脑组织凋亡细胞密度均明显减小,阳性对照组和氢溴酸樟柳碱高、低剂量组大鼠脑组织Ca~(2+)含量均明显降低,氢溴酸樟柳碱高、低、极低剂量组大鼠脑组织中p-ERK1/2/t-ERK1/2比例均明显增加,以上差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);其余差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:氢溴酸樟柳碱能抑制急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织细胞凋亡,其作用机制可能与激活ERK1/2信号通路和调节ATP酶活性,进而降低脑组织Ca~(2+)含量有关。     

奇白消软膏的定性鉴别与定量检测

目的:建立奇白消软膏的定性鉴别与含量测定方法,加强奇白消软膏的质量控制。方法:采用薄层色谱(TLC)法对制剂中的黄连和人工牛黄进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中黄连有效成分盐酸小檗碱的含量。结果:奇白消软膏的TLC斑点清晰、阴性无干扰、分离度好;盐酸小檗碱在1.28～38.4μg;回归方程为Y=49873.84X-554.74(r=1)。精密度、稳定性、重复性试验的RSD分别为0.41%、0.38%、1.8%;加样回收率为98.88%～101.23%,RSD为0.95%(n=6)。结论:本研究建立的TLC和HPLC简便易行,准确、重复性好,可用于奇白消软膏的质量控制。     

氢溴酸樟柳碱对抗大鼠急性脑缺血/再灌注损伤的作用机制研究

目的探讨氢溴酸樟柳碱对抗大鼠急性脑缺血/再灌注损伤的作用机制。方法体内实验采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)致脑缺血/再灌注损伤模型,氢溴酸樟柳碱尾静脉注射进行干预。HE染色评价脑组织一般病理学情况;尼氏染色评价脑组织健存神经元情况;检测脑组织匀浆过氧化氢酶(CAT)活性、脂质过氧化物(LPO)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用Western blot技术检测脑组织Bax、Bcl-2、caspase-3、p-Akt等蛋白的表达。体外实验采用PC12细胞氧糖剥夺再灌注损伤模型(OGD-R),采用Western blot技术检测细胞内Bax、Bcl-2、caspase-3、p-Akt等蛋白的表达情况,对氢溴酸樟柳碱作用的信号通路进行确认。结果氢溴酸樟柳碱0.15 mg·kg~(-1)能明显降低MCAO模型大鼠一般病理学评分,提高存活神经元数目;氢溴酸樟柳碱0.3、0.15 mg·kg~(-1)能明显提高脑组织CAT活性,氢溴酸樟柳碱0.3 mg·kg~(-1)能明显降低LPO含量;氢溴酸樟柳碱1.2mg·kg~(-1)明显降低LDH活性;各剂量组均能明显降低促凋亡蛋白Bax的表达,提高Bcl-2/Bax比值,促进p-Akt表达,明显提高p-Akt/Akt比值,除氢溴酸樟柳碱0.15 mg·kg~(-1)剂量外,其余剂量均能明显提高抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。体外实验结果显示,氢溴酸樟柳碱在25~100μmol·L~(-1)时能明显提高Bcl-2蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax比值,在50μmol·L~(-1)剂量下能明显提高p-Akt/Akt的比值。结论氢溴酸樟柳碱对抗急性脑缺血/再灌注损伤大鼠的作用机制与抗氧化损伤及提高p-Akt的表达有关。     

lncRNA XIST通过miR-375-Notch1轴调控急性T淋巴细胞白血病细胞增殖、侵袭的实验研究

目的 探讨lncRNA XIST通过miR-375-Notch1轴调控急性淋巴细胞白血病(T-acute lymphocytic leukemia,T-ALL)细胞增殖和侵袭的影响。方法 以2018年6月—2021年3月收治的57例T-ALL患者为观察对象(T-ALL组),另选55例同期健康体检者为对照组。qRT-PCR检测T-ALL组和对照组及T-ALL T淋巴细胞CCRF-CEM细胞株中lncRNA XIST水平;对CCRF-CEM细胞转染si-lncRNA XIST以沉默lncRNA XIST、转染miR-375模拟物以过表达miR-375;采用CCK-8法、Transwell侵袭实验法及流式细胞术检测CCRF-CEM细胞的增殖、侵袭及凋亡情况;荧光素酶报告基因方法检测lncRNA XIST靶基因;Western blot检测Notch1、ADAM-17、Hes1蛋白表达。结果 与对照组比较,T-ALL组的lncRNA XIST、Notch1 mRNA表达明显增加(P＜0.05),而miR-375水平明显下降(P＜0.05),且T-ALL组患者Notch1蛋白水平明显高于对照组(P＜0.001)。转染si-lncRNA XIST沉默lncRNA XIST后,CCRF-CEM细胞增殖数量、侵袭能力明显下降(P＜0.05),细胞凋亡明显增加(P＜0.05)。荧光素酶报告基因显示miR-375是lncRNA XIST的靶点。CCRF-CEM细胞转染miR-375后,细胞增殖数量、侵袭能力明显下降(P＜0.05),细胞凋亡明显增加(P＜0.05)。转染si-lncRNA XIST可以明显上调miR-375水平、下调Notch1 mRNA水平,同时下调Notch1、ADAM-17、Hes1蛋白表达。结论 lncRNA XIST在T-ALL患者中呈高表达,可能通过miR-375-Notch1轴影响白血病细胞生物学功能。