自体成肌细胞修复周围神经缺损

目的:观察自体成肌细胞在神经再生室中的作用,探讨其作为组织工程的种子细胞修复周围神经缺损的可行性。方法:实验于2002-08/2003-08在北京军事医学科学院基础医学研究所九室完成。①成年Wistar大鼠30只,采用随机数字法分成成肌细胞组、细胞外基质凝胶组和生理盐水组,每组10只。②切除大鼠右坐骨神经6mm,断端分别套入硅胶管,使神经两断端在硅胶管内相距13mm。③成肌细胞组:快速分离骨骼肌成肌细胞,差速贴壁法纯化、增殖,按1×109L-1细胞浓度与细胞外基质凝胶混合,植入神经再生室内;细胞外基质凝胶组:神经再生室内植入细胞外基质凝胶;生理盐水组:神经再生室内植入生理盐水。④术后4,8,12周进行大鼠坐骨神经功能指数测定;术后12周进行大体观察、电生理检测、腓肠肌湿重、神经组织学及超微结构观察。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①结蛋白免疫组织化学:阳性细胞平均达98.01%。②大体观察:术后12周,成肌细胞组和细胞外基质凝胶组均可见再生神经,外形似正常神经,直径较正常的神经干细,成肌细胞组略粗于细胞外基质凝胶组。生理盐水组导管内无再生神经通过间隙。③坐骨神经功能指数:术后8,12周,成肌细胞组显著高于细胞外基质凝胶组(8周:-71.788±3.569,-76.986±2.266;12周:-61.847±2.914,-69.527±1.765;P均<0.01)。④电生理检查:术后12周,成肌细胞组的运动神经传导速度及波幅明显高于细胞外基质凝胶组,成肌细胞组、细胞外基质凝胶组腓肠肌肌电图呈部分失神经电位表现,生理盐水组则为完全失神经电位。⑤腓肠肌湿重恢复率:成肌细胞组明显好于细胞外基质凝胶组和生理盐水组。⑥组织学检查:术后12周,成肌细胞组、细胞外基质凝胶组的再生神经纤维排列整齐、密集,神经导管交界处无瘢痕,成肌细胞组的再生神经纤维多且直径较粗大,排列更为规则。⑦透射电镜观察:成肌细胞组和细胞外基质凝胶组均见再生的有髓神经纤维。⑧再生神经纤维图像分析:术后12周,在有髓神经纤维密度、神经纤维有效面积、有髓神经纤维数量、直径及髓鞘厚度等指标上成肌细胞组均优于细胞外基质凝胶组。结论:自体成肌细胞能够促进周围神经再生,可以作为种子细胞应用于外周神经组织工程。     

In Vitro Chondrogenic Phenotype Differentiation of Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells

In order to study the chondrogenic phenotype differentiation of adult sheep bone marrowderived mesenchymal stem cells (MSCs) in a defined medium as potential seed cells for cartilage tissue engineering, MSCs were isolated by density centrifugation with Percoll solution from bone marrow aspirated from sheep iliac crest. The third passage of MSCS were induced with H-DMEM containing TGF-β3 .IGF-I, Dexamethasone and VitC. The shape and ultrastructure of cells were observed, toluidine blue stain for GAG and immunohistochemistry for type II collagen were applied for chondrogenic phenotype identification. After 14 days of induction, MSCs changed from a spindlelike appearance to a polynal shape, a large amount of endoplasmic reticulum, Golgi complex and mitochondria were observed, and the differentiation of MSCs chondrogenic phenotype was verified by positive staining of toluidine blue and immunohistochemistry. MSCs derived from bone marrow can differentiate to chondrogenic phenotype when induced in vitro and can be used as optimal seed cells for cartilage tissue engineering.     

血管内栓塞联合显微手术治疗中枢神经系统血管周细胞瘤

目的 探讨中枢神经系统血管周细胞瘤（CNS-HPC）的治疗方法及临床效果。方法 回顾性分析2010年1月至2013年10月收治的4例CNS-HPC患者的临床资料,4例患者术前均行全脑血管造影术确定肿瘤主要供血动脉,然后将肿瘤供血动脉栓塞,最后在显微镜下切除肿瘤。结果 肿瘤全切除3例,次全切除1例。术中出血量为1 500~3 000 ml。4例患者术后均无明显并发症发生。术后2例患者行伽玛刀治疗,2例患者行外放射治疗。随访6~41个月均未见肿瘤复发和转移。结论 对于巨大的、供血极其丰富的CNS-HPC术前行供血动脉栓塞可以明显减少术中出血,提高肿瘤全切率。全切除肿瘤并辅以放疗是CNS-HPC的主要治疗方案,术后随访观察肿瘤复发及转移非常必要。     

hUMSCs外分泌上清联合替莫唑胺在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用

目的：探讨人脐带间充质干细胞外分泌上清（hUMSC-CM）联合替莫唑胺（TMZ）在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用及潜在机制。方法：采用2种血清剥夺法（24和48 h分批次撤血清法）收集hUMSC-CM并制备成冻干粉,设置5种浓度（0、1、3、6和9 g/L）处理大鼠恶性胶质瘤细胞系RG-2、人星形细胞瘤细胞系U251和人胶质母细胞瘤细胞系LN-428。通过CCK-8实验检测hUMSC-CM作用于胶质瘤细胞24、48和72 h后的肿瘤抑制可行性及敏感度。HE染色结合CCK-8法确定6种浓度（0、25、50、100、200和400μmol/L）的TMZ作用于胶质瘤细胞48 h后化疗敏感性的差异。筛选出低、高2种浓度（3和9 g/L）的hUMSC-CM和低、中、高3种浓度（50、100和200μmol/L）的TMZ配伍,作用于胶质瘤细胞后检测细胞活力和病理形态学变化。TUNEL染色检测细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved PARP1,以及自噬相关蛋白beclin-...     

松弛型喉成形术在治疗男声女调中的应用

切,是语音矫治失败后患者的最佳选择.手术方法改良后有利于恢复自然的声调,减轻声门闭合不良造成的术后声嘶.     

国产头孢三嗪钠治疗急性无合并症淋病疗效观察

我科于 1996年 10月～ 1998年 3月应用国产头孢三嗪钠(头孢曲松钠 )静脉滴注治疗急性无合并症淋病 ,取得满意效果 ,现将资料完整的 86例总结报告如下。临床资料　 86例均为我科门诊病人 ,其中男 67例 ,女 19例 ,年龄 19～ 48岁 ,平均 2 6.8岁。病程 2～ 7天 ,平均 3 .7天。86例患者均有典型临床症状体征 ,实验室淋球菌镜检、培养阳性 ,符合卫生部卫生防疫司规定的淋病诊断标准[1] 。治疗方法　既往无青霉素过敏史者 ,以头孢三嗪钠 1.0 ｇ加入生理盐水 15 0ｍｌ内静脉滴注 ,2 0～ 3 0ｍｉｎ内滴完 ,1次 /ｄ ,连用 3次为 1疗程。治疗期间不加…     

外用糖皮质类固醇制剂致体、股癣皮疹扩散92例临床分析

体、股癣是皮肤科常见的皮肤浅部真菌病之一。近几年来 ,由于误用或滥用糖皮质类固醇激素制剂所致的皮肤真菌感染或扩散病例屡见不鲜。现将我们自1994年 8月～ 1998年 10月所诊治的因外用激素乳膏引起的体、股癣皮疹扩散典型作者单位 :烟台市牟平第二医院皮肤科 ,2 641 0 0病例 92例总结分析如下。临床资料　一般资料 :92例患者均为我院皮肤科门诊病人 ,其中男 6 4例 ,女2 8例 ;年龄最大 78岁 ,最小 5岁 ,平均 37.6岁 ;病程最长 5年 ,最短 7天 ,平均 45天。其中体癣 5 4例 ,股癣 38例。就诊前用药情况 :外用肤轻松乳膏30例 ,皮炎平霜 2 3例 …     

锁骨远端解剖锁定钢板联合缝合锚和锁骨钩钢板治疗锁骨远端不稳定骨折的临床疗效分析

目的:比较锁骨远端不稳定骨折进行锁骨远端解剖锁定钢板联合缝合锚固定和锁骨钩钢板固定的临床疗效?方法:回顾性分析2011年3月~2013年3月收治的获得完整随访的锁骨远端不稳定骨折83例,分为锁骨远端解剖锁定钢板联合缝合锚固定组(A组)和锁骨钩钢板组(B组)进行回顾性分析,比较手术一般情况,骨折愈合时间和术后肩关节外展上举?后伸?外旋?内旋?内收等功能活动及Constant-Murley评分?结果:两组在骨折愈合时间?伤口长度?出血量比较上无统计学差异(P > 0.05)?在手术时间和治疗费用上B组较A组有统计学差异(P < 0.05)?A组在肩关节外展上举?后伸?外旋?内旋功能以及Constant-Murley评分上较B组有明显优势,有显著统计学差异(P < 0.05)?结论:对于锁骨远端不稳定骨折运用锁骨远端解剖锁定钢板联合缝合锚固定较锁骨钩钢板在肩关节功能恢复方面有明显优势,值得推广?     

伤口负压引流在高能量四肢开放骨折中的应用

目的评价在高能量四肢开放性损伤中伤口负压引流的作用。方法对51例高能量所致四肢开放性损伤（GustiloⅢ）患者行常规清创、适当固定,软组织损伤一期使用负压引流装置维斯第敷料覆盖,二期闭合伤口。对其感染率、是否需要截肢、骨折不愈合需要进一步处理、伤口闭合方法、手术至最终闭合伤口的时间进行分析。结果本组病例中18例出现感染,其中13例需要进一步手术治疗。GustiloⅢA型感染率为12.5%,ⅢB型感染率为63%,ⅢC型为42%。13例需要二期手术促进骨折愈合。2例患者行二期截肢。5例患者通过清创及维斯第治疗可直接闭合伤口,46例患者须行游离皮片移植或皮瓣手术闭合伤口。结论使用伤口负压引流作为四肢开放骨折伤口的临时覆盖物,与传统方法治疗效果相近,但可能有助于减少二期软组织重建手术以闭合伤口。