大块骨组织体视学研究的图像采集与分析

大块骨组织由于不脱钙切片制作技术难度高,应用体视学对大块骨组织整体形态进行图像定量分析的研究资料较少。随着生物材料、人工金属植入材料在骨科临床的大量应用,如何获取高质量的大块骨组织整体图像,并应用体视学原理进行较为精确的图像分析变成了迫切需要解决的问题。目的:寻求大块骨组织实用和有效的数字图像采集方法,使之应用体视学原理进行较为精确的图像分析。材料与方法:普通玻片上的大组织标本、硬组织切片机切取的不脱钙塑料包埋大块骨组织标本及旋转切割机切取的含金属植入物的塑料包埋磨片标本。分别采用普通显微镜、大视野显微镜、自动显微镜及图像拼接软件采集,同时采用胶片扫描仪、台式背透扫描仪及高分辩数码相机进行采集比较。结果:上述各方法在一定程度均能满足大块骨组织图像采集及体视学分析需求,同时在标本适应性、视野规模、成像质量方面总结出各自优、缺点以及相应技术方法。     

人骨髓基质干细胞在不同诱导环境下向软骨细胞的分化

目的：探索重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）诱导建系的人骨髓基质干细胞（hBMSC，专利名缩写为MSCxj）生成软骨的可行性、最佳剂量及适宜的诱导环境。方法：rhBMP-2分为六组：空白组、100ng／ml组、200ng／ml组、400ng／ml组、600ng／ml组和800ng／ml组。血清浓度分为三组：无血清组、2％血清组和5％血清组。根据rhBMP~和血清不同浓度间的组合，设计18种诱导模式。一部分Mscxj制成微球，模拟三维模式进行细胞爬片培养，另一部分MSCxj直接用96孔板培养，10d后，检测MSCxj的数量、总蛋白生成量和碱性磷酸酶生成量，并行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原mRNA检测，利用MPS60病理图像软件分析各组Ⅱ型胶原mRNA染色后的灰度，比较各组Ⅱ型胶原mRNA的生成量。结果：血清浓度越高细胞生成的数量越多，细胞合成的总蛋白无显著差异，rhBMP-2对细胞数量和总蛋白的合成无明显影响。2％的血清浓度比其他血清浓度更利于软骨生成。在该血清浓度下rhBMP-2为400ng／ml时，细胞特异性基质Ⅱ型胶原生成最多（F=19．56，P〈0．05）。结论：rhBMP-2能诱导Mscxi生成软骨，在血清浓度为2％、自身浓度为400ng／ml水平下诱导Mscxj生成软骨能力最强。     

快速成型技术在肱骨近端骨折诊断与治疗中的辅助作用

目的 探讨快速成型(RP)技术对肱骨近端复杂骨折的诊断及治疗的辅助作用. 方法 回顾性分析2010年1月至2014年1月收治的18例肱骨近端粉碎性骨折患者资料,男7例,女11例;年龄39 ～ 78岁,平均62岁.所有患者均为闭合性新鲜骨折,其中10例患者经三维CT扫描并采用RP制备骨折模型,然后通过模型确定骨折分型(骨折Neer分型:三部分骨折7例,四部分骨折3例),指导手术治疗(3D技术组);8例患者常规行切开复位内固定术治疗(常规组)(骨折Neer分型:三部分骨折6例,四部分骨折2例).比较两组患者的手术时间、术中出血量等.术后6个月采用Neer评价标准评定疗效. 结果 通过对1∶1等大的RP模型分析研究,明确骨折类型后均顺利完成术前制定的手术方案.3D技术组患者的手术时间(平均1.1h)及术中出血量(平均190 mL)均少于常规组患者(1.5 h、240 mL).所有患者术后获7～23个月(平均16个月)随访.骨折愈合时间3～5个月(平均4.3个月).术后6个月采用Neer评价标准评定疗效:3D技术组:优5例,良4例,可1例;常规组:优3例,良4例,可1例. 结论 1∶1的RP模型能直观、准确地展现骨折伤情,使手术方案具体化、个体化,可减少术中出血量并缩短手术时间,提高疗效.     

激素联合内毒素所致骨坏死微循环障碍超微结构观察

目的:观察激素联合内毒素所致骨坏死骨内微血管内皮表面的超微结构损害和血栓形成. 方法:实验动物分为模型组和正常对照组. 模型组前2 d间隔24 h于静脉缓慢注射脂多糖(LPS),每次剂量30 μg/kg;第3～8日静脉注射地塞米松,1次/d,剂量7.5 mg/kg. 对照组给予生理盐水0.5 mL/kg. 满8 wk时取材前,股骨头压力灌注肝素钠、100 mL/L中性甲醛固定液. 一半股骨头标本制备脱钙切片,苏木素-伊红染色,观察骨坏死情况. 另一半标本制备不脱钙切片,脱掉包埋剂,临界点干燥、喷金、扫描电镜观察软骨下微血管内皮表面超微结构改变. 结果:模型组股骨头软骨下微血管内皮表面凹凸不平,管腔不规则,可见管腔填塞、血栓形成;此结果与组织学观察结果一致. 结论:激素联合内毒素所致骨坏死微循环障碍的主要表现为微血管内皮损伤和微血栓形成.     

外固定架在足下垂治疗中的应用

[目的] 探讨外固定架在足下垂畸形治疗中的作用.[方法] 足下垂患者9例,平均足下垂畸形时间15.5个月,将外固定架螺纹杆连接于胫骨与下垂足之间,对足下垂进行缓慢牵拉,每日螺纹旋转3次.[结果] 所有患者均获得随访,平均随访时间11.2个月(6～19个月);足下垂矫形时间3～6周(平均4.2周),足下垂均矫正到中立位,带架时间7～11周(平均8周),所有患者均未发现有神经、肌腱和血管的损伤;6例胫骨骨折、骨不连患者矫形后经过锻炼踝关节功能恢复良好,活动范围约30°～50°;小腿前外侧和后侧肌群挫灭伤患者经过锻炼,踝关节活动范围约12°.[结论] 通过外固定架的缓慢牵拉,可以有效治疗足下垂畸形.     

TGFβ1抗体复合生物蛋白胶预防术后肌腱粘连

目的:研究TGFβ1抗体复合生物蛋白胶(FG)预防鞘管区屈肌腱粘连的作用和对肌腱愈合的影响.方法:将72只来亨鸡(leghorn)按随机化原则分为单纯TGFβ1抗体(TGFβ1 Ab)组、单纯生物蛋白胶(FG)组、TGFβ1抗体复合FG(TGFβ1 Ab FG)组及生理盐水(NS)组,每组各18只.分别将鸡左足第3,4趾趾深屈肌腱横断,作The 4-strand Cruciate repair缝合,在损伤周围注入药物.术后5 d行早期功能锻炼,在第1,3,8 wk处死取材,分别进行大体观察、组织学检查、生物力学测试.结果:TGFβ1 Ab复合FG组术后3,8 wk,缝合处粘连程度评分、肌腱滑动距离及模拟主动屈曲度均优于其余三组,且差异有统计学意义(P＜0.05).四个处理组的最大抗断裂载荷差异无统计学意义(P＞0.05).结论:TGFβ1抗体复合生物蛋白胶可以有效预防术后肌腱粘连,不影响肌腱的正常愈合进程.     

去势加地塞米松肌肉注射法兔骨质疏松模型建立的实验研究

目的 探究应用去势加肌肉注射地塞米松的方法建立兔骨质疏松模型的可行性.方法 将24只5月龄雌性新西兰兔随机分成假手术 肌注生理盐水组、去势 肌注生理盐水组和去势 肌注地塞米松组,每组8只动物.后两组动物行双侧卵巢切除术.术前和术后2、3月时采用双能x线吸收骨密度测量仪及术后3月应用micro-CT进行测量分析.结果 micro-CT三维重建分析表明,去势加肌注地塞米松肌肉注射组兔术后3月时股骨远端BMD、BMC和骨小梁立体测量的一些指标与假手术的差值有统计学意义,去势 肌注地塞米松组和去势组兔骨小梁稀疏、断裂、排列紊乱,但前者更为明显.结论 去势 肌注地塞米松法建立新西兰兔骨质疏松症模型切实可行,造模时间较单纯去势法更短,3个月即可.     

磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶注射型复合载体的凝固时间和显微结构对修复骨缺损的意义

目的:分析由注射型磷酸钙骨水泥(calciumphosphatecement,CPC)和纤维蛋白胶(fibringlue,FG)组成的复合支架材料的凝固时间和显微结构特征,探讨其作为注射型复合载体的可行性。方法:将注射型CPC和FG按凝固后的体积计算,以2∶1的体积比混合,制成复合载体。测定复合材料的凝固时间,并用扫描电镜观察其煅烧前后的结构特征。结果:复合材料的初凝时间平均为9.54min,终凝时间平均为21.38min。扫描电镜发现,FG贯穿于CPC晶体间,并将CPC晶体紧密连接。煅烧后有较多大孔产生,空隙率为32.6%。且有延伸的沟隙将CPC微孔相连。结论:复合材料凝固时间适合临床操作;随着FG的降解,复合材料的空隙率将提高,有望加速CPC的降解和骨的生长,用作生物活性分子的注射性载体。     

双头螺纹空心钉治疗非老年Garden Ⅲ-Ⅳ型股骨颈骨折

[目的]探讨成人股骨颈不稳定型骨折,应用双头螺纹加压空心钉手术治疗疗效。[方法]分析2013年1月~2016年7月,年龄65岁以下的GardenⅢ-Ⅳ型股骨颈骨折有完整随访资料者32例。采用双头螺纹空心钉(QWIX 7.5 mm)内固定治疗。骨折按Garden分型:GardenⅢ型27例、GardenⅣ型5例;右侧19例,左侧13例。记录手术时间、骨折愈合时间、术后股骨颈长度、颈干角、股骨头形态、内固定退钉以及术后并发症发生率,术后髋关节功能优良率等。[结果]所有患者均顺利手术,手术时间50~80 min,平均(65.25±21.33)min,失血量50~90 ml,平均(65.51±15.36)ml,住院时间5~13 d,平均住院日(7.35±1.25)d。完整资料32例,随访6~24个月,平均(11.36±4.81)个月。其中1例出现骨折不愈合,发生率3.12%(1/32);3例股骨头坏死,发生率9.37%(3/32)。无内固定退钉、无明显股骨颈短缩者。术后1年股骨颈的水平缩短(5.80±2.51)mm、垂直缩短(7.53±2.14)mm与术后2年股骨颈的水平缩短(5.22±2.83)mm、垂直缩短(7.35±2.95)mm,差异无统计学意义(t=-1.723,P=0.389;t=-1.502,P=0.780)。髋关节Harris术后评分66~92分,平均(85.92±3.65)分,其中优19例,良8例,中3例,差2例,优良率达84.37%(27/32)。[结论]双头螺纹加压空心钉治疗不稳定型股骨颈骨折,固定牢靠,避免退钉及股骨颈短缩的发生,并发症发生率低,骨折愈合率高,临床效果满意。     

应用抗感染重组合异种骨对开放性骨折术后骨缺损的修复作用

目的：探讨抗感染重组合异种骨对开放性骨折术后骨不连和骨缺损的修复作用。方法：选择2000—10／2003—04第四军医大学西京医院骨科开放性骨折术后四肢长骨骨缺损患13例，7例术后无菌性骨缺损，6例术后出现感染性骨缺损。对无菌性骨缺损行断端清理，感染性骨缺损行彻底清创，均用外固定，抗感染重组合异种骨植入治疗。有软组织缺损的行植皮或皮瓣转移术。观察术后开始负重时间，每月拍X射线片观察骨缺损修复及再感染发生情况。结果：按意向处理分析，13例患均进入结果分析。随访时间1年7个月。①术后带架平均开始负重时问3，6个月。②骨折塑形后拆架时间4个月～1年6个月，平均10．4个月。③骨愈合时间8例单纯横断或斜型骨折2～7个月，5例粉碎骨折4～10个月：④13例均未再出现感染。结论：抗感染重组合异种骨能促进骨愈合，修复骨缺损，并有抗感染作用，患对最终结局满意，可作为开放性骨折术后骨缺损修复的一种较好选择。