多囊性肾脏发育不良胎儿的遗传学病因、影像学表现及妊娠结局分析

目的 探究多囊性肾脏发育不良胎儿的遗传学病因、影像学表现及妊娠结局。方法 回顾性分析2017年5月—2023年5月扬州大学附属淮安市妇幼保健院收治的80例多囊性肾脏发育不良胎儿的临床资料,分析其遗传学病因、影像学表现及妊娠结局。结果 80例多囊性肾脏发育不良胎儿中检出11例（13.75%）染色体异常,其中染色体数目异常1例（1.25%）,10例（12.50%）存在染色体拷贝数变异（CNV）。80例多囊性肾脏发育不良胎儿中,39例（48.75%）为左侧多囊性发育不良肾,37例（46.25%）为右侧多囊性发育不良肾,剩余4例（5.00%）为双侧多囊性发育不良肾;单纯泌尿系统异常64例（80.00%）,合并其他系统异常16例（20.00%）,以心血管系统异常（8例）、肢体骨骼异常（3例）和、神经系统异常（3例）最常见。单纯性泌尿系统异常胎儿、合并其他系统异常胎儿的致病性CNV检出率分别为10.94%（7/64）和12.50%（2/16）,差异无统计学意义（P >0.05）。单纯性泌尿系统异常胎儿中,单侧多囊性发育不良胎儿、双侧多囊性发育不良胎儿的致病性CNV检出率分别为9.84%（6/61）和33.33%（1/3）,差异无统计学意义（P >0.05）。对80例多囊性肾脏发育不良胎儿进行随访,失访8例（10.00%）,人工终止妊娠31例（38.75%）,胎死宫内0例（0.00%）,活产41例（51.25%）,其中产后死亡1例（1.25%）。结论 多囊性肾脏发育不良胎儿采用染色体微阵列分析技术可提高遗传学检出率,影像学检查在多囊性肾脏发育不良诊断中具有一定价值,可为多囊性肾脏发育不良胎儿的产前诊断、遗传咨询、预后评估提供依据。     

槲寄生多糖对巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1的影响

目的 :观察槲寄生多糖 (VPS)及其中性组分 (VPS 1)体外对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF α、IL 1的影响。方法 :制取小鼠腹腔巨噬细胞 ,与VPS及VPS - 1共同培养。采用L92 9细胞株细胞毒法测TNF α ;L92 9细胞增殖法测IL 1。结果 :VPS、VPS - 1与小鼠腹腔巨噬细胞共同培养均可显著增强其TNF α、IL 1的分泌。在 5～ 2 0 μg ml浓度范围 ,VPS的这种作用呈剂量依赖性 ;VPS 1虽有明显的作用 ,但未表现出剂量依赖。结论 :槲寄生多糖及中性组分体外使小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF α、IL 1增强     

心藏象与皮肤光老化关系的理论探讨

正皮肤衰老分为两种类型:内在因素即随着年龄增长造成的生理性衰老(又称自然衰老),它与机体的老化同步进行;外界环境因素即因如日光中长期反复的紫外线照射、吸烟、各种物理化学因素刺激如寒冷、干燥等引起的皮肤老化。由于环境因素中日光紫外线(UV)是导致皮肤衰老的最重要因素,因此又称为皮肤的光老化。皮肤自然老化后对紫外线的屏障作用减弱,容易发生光老化,而后者又加速了皮肤老化,两者互相促进。皮肤光老化的原因     

小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关基因表达的影响

目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinase related protein-1,TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(tyrosinase related protein-2,TRP-2)mRNA表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高质量浓度分别为0.1,1,2.5 g·L-1用于实验,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法检测B16细胞中TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达。结果:与正常组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR,TRP-1,TRP-2 mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1,TRP-2的基因表达、蛋白合成3方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现。     

基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路探讨天王补心丹加减对睡眠剥夺小鼠皮肤影响的作用机制

目的 观察天王补心丹加减（MTBD）对睡眠剥夺（SD）小鼠皮肤的作用,并探讨其作用机制。方法 将60只2月龄雌性昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、维生素C（VC,0.08 g·kg^-1）组和MTBD低、中、高剂量（6.5、12.5、25 g·kg^-1）组。除空白组外,其余组均复制SD小鼠模型（采用多平台水环境法行每日睡眠剥夺18 h（15：00至次日9：00）,连续14 d,并从第2周起叠加腹腔注射咖啡因（CAF）7.5 mg·kg^-1,连续7 d;造模同时,空白组、模型组灌胃生理盐水（0.01 mL·g^-1）,其余各组均灌胃相应药物治疗。实验结束后当天进行一般表现的观察记录（如小鼠体质量、精神、毛发、皮肤等）;取材后,采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色法,光学显微镜下观察皮肤组织病理形态变化;测量皮肤厚度、皮肤含水率;生化试剂盒检测皮肤羟脯氨酸（HYP）含量、皮肤及血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α和IL-1β含量;蛋白免疫印迹法检测皮肤组织Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Ⅲ型胶原（ColⅢ）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化（p）-PI3K、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、核因子E₂相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶（HO）-1、核转录因子（NF）-κB蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组有不同程度的变化,在一般表现上,出现了诸如体质量减轻（P<0.01）,精神萎靡、毛色晦暗、皮肤皱纹形成等衰老迹象;对组织标本检测,结果显示,光学显微镜下可见皮肤变薄,真表皮连接（DEJ）扁平化,胶原纤维减少;皮肤组织的厚度和含水率降低,皮肤组织HYP含量显著减少（P<0.01）,皮肤和血清SOD活性显著下降（P<0.01）及MDA含量显著增加（P<0.01）;血清IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著增加（P<0.01）;皮肤ColⅠ、ColⅢ、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2及HO-1蛋白表达明显减少（P<0.05,P<0.01）,NF-κB表达增加（P<0.01）。与模型组比较,VC组和MTBD低剂量组皮肤的含水率、HYP含量、SOD活性及ColⅠ、ColⅢ、p-PI3K/PI3K蛋白表达增加（P<0.05,P<0.01）,血清MDA含量减少（P<0.05）,此外MTBD低剂量组还检测出血清IL-6、IL-1β含量减少（P<0.05）;而MTBD中、高剂量组的上述各指标均有改善（P<0.05,P<0.01）。结论 SD会加促SD模型鼠皮肤老化进程。MTBD可以改善这种现象,发挥抗炎、抗氧化作用,其作用机制可能与激活PI3K/Akt/Nrf2信号通路相关。     

增液承气汤对津亏便秘衰老模型小鼠皮肤超微结构及透明质酸含量的影响

目的观察增液承气汤对津亏便秘衰老模型小鼠皮肤超微结构及透明质酸含量的影响,为肺与大肠相表里的归经药物研究提供支持。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、西沙必利组、增液承气汤组、增液汤组。采用限水(1.5ml/d),叠加复方地芬诺酯[10 mg/(kg.d)]灌胃,同时10%D-半乳糖皮下注射[1 000 mg/(kg.d)]6周建立老年便秘模型。从第4周起分别给予相应药物灌胃干预3周。6周后取皮肤组织制备标本,光电镜观察皮肤组织的超微结构用放免法测皮肤透明质酸含量。结果与空白组比较,便秘衰老组皮肤透明质酸含量显著降低;皮肤明显变薄,胶原纤维数量减少;皮肤成纤维细胞存在明显线粒体水肿,异染色质发生边集,常染色质淡染或核染色致密成团的超微结构改变。与便秘衰老模型相比,增液承气汤组小鼠皮肤透明质酸含量明显增加;皮肤显著增厚,真皮胶原纤维数量增加,皮下脂肪填充减少;成纤维细胞损伤明显减轻,其核内染色质分布较均匀,核膜下异染色质聚集,胞浆内可见大量粗面内质网及线粒体。结论增液承气汤可有效改善模型小鼠皮肤组织改变,增加透明质酸含量,具有延缓皮肤老化作用。     

中医药延缓皮肤老化的研究

随着年龄的增长,皮肤也会像人体的其他器官一样逐渐老化,功能减弱或丧失.尤其是近年来全球性自然气候的恶化,人们在户外活动中暴露于紫外辐射、寒冷、干燥、风沙等环境的机率加大,加速了皮肤的老化;而且皮肤老化的发生有随时间提前、程度加重的趋势[1,2].近年来,对皮肤衰老的研究取得了长足进展,笔者就皮肤老化发生的机制和中医药延缓皮肤衰老研究进展探讨如下.     

针刺内关对UVB辐射大鼠皮肤PCNA、P53影响的实验研究

目的:观察PCNA、P53蛋白在光老化大鼠皮肤组织中的表达情况,以初步揭示针刺预防光老化的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组、UVB组、UVB+针刺组,利用UVB紫外灯造成大鼠皮肤光老化模型,6周后取相应部位皮肤组织,WB检测PCNA、P53蛋白的表达情况。结果:与正常组相比,UVB组、UVB+针刺组光老化皮肤组织中P53表达上升,PCNA表达下降;而UVB+针刺组较UVB组的皮肤组织中P53表达明显降低,PCNA表达明显升高(P0.01)。结论:针刺可能通过上调PCNA蛋白的表达,下调P53蛋白的表达,在一定程度上预防缓解皮肤的光老化。     

一个淋巴水肿-双行睫综合征家系的FOXC2基因变异分析

目的对1个淋巴水肿-双行睫综合征(lymphedema-distichiasis syndrome,LDS)家系患者的FOXC2基因进行变异分析,明确患者的致病原因。方法采集家系成员血液样本并提取DNA和蛋白,对先证者进行全外显子组测序及生物信息学分析,确定可疑致病变异后应用Sanger测序进行家系验证、Western印迹技术检测蛋白表达量的变化。结果测序结果显示先证者和患病母亲均携带FOXC2基因c.177C>G(p.Tyr59X)杂合无义变异,该变异目前尚未被报道过,Western印迹检测显示FOXC2蛋白表达下降。其母在早孕期B超提示胎儿NT增厚,孕21+1周行羊水穿刺对胎儿进行产前诊断,产前基因诊断结果提示胎儿也携带c.177C>G变异。结论FOXC2基因c.177C>G无义变异是患儿的致病原因,并导致Foxc2蛋白表达下降,胎儿NT增厚可能和Foxc2表达量下降有关。本研究结果扩大了FOXC2基因变异谱。     

β联蛋白对体外过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

目的 观察高表达的β联蛋白对体外过氧化氢（H2O2）所致正常人皮肤成纤维细胞（NHSF）衰老表型的影响。方法 NHSF分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1,然后150 μmol/L H2O2处理2 h。实验分为转染H2O2处理组（NHSF + β联蛋白 + H2O2）、转空载体H2O2处理组（NHSF + 空载体 + H2O2）以及转空载体组（NHSF + 空载体）。用RT-PCR和Western印迹分析β联蛋白的表达,显微镜观察细胞形态,试剂盒检测衰老相关的β半乳糖苷酶（SA-β-gal）、细胞活性氧（ROS）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性。所有数据均用SPSS 13.0软件进行统计分析,多组间比较采用ANOVA检验。结果 pcDNA3.1-β联蛋白明显上调了NHSF中β联蛋白的表达。NHSF + 空载体 + H2O2组β联蛋白mRNA和蛋白水平（与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.2900 ± 0.0195和0.3130 ± 0.0171）明显低于NHSF + 空载体组（分别为0.5963 ± 0.0400和0.6190 ± 0.0090）,两组比较,均P ＜ 0.05;NHSF + β联蛋白 + H2O2组β联蛋白表达水平（0.7953 ± 0.0074）高于NHSF + 空载体 + H2O2组（P ＜ 0.05）。SA-β-gal染色率在NHSF + 空载体组、NHSF + 空载体 + H2O2组、NHSF + β联蛋白 + H2O2组分别为（2.9667 ± 0.2517）%、（37.70 ± 0.9539）%、（29.330 ± 0.6359）%,各组比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。NHSF + 空载体、NHSF + 空载体 + H2O2、NHSF + β联蛋白 + H2O2组ROS活性分别为（50.9963 ± 9.2688）%、（109.9190 ± 11.5215）%、（75.1063 ± 3.0138）%,SOD水平分别为（88.0856 ± 3.9181）、（35.5585 ± 3.4438）、（61.7029 ± 3.1716） U/mg,各组比较,差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论 高表达的β联蛋白能够抑制细胞衰老相关β-半乳糖甘酶（SA-β-gal）和细胞活性氧（ROS）的表达,同时上调了SOD的活性。 【关键词】 β连环素; 过氧化氢; 成纤维细胞; 氧化性应激; 细胞衰老