黄芪丹参颗粒药对干预肾纤维化Wnt/β-catenin信号通路的实验研究

目的：观察黄芪丹参颗粒药对对肾纤维化信号通路Wnt/β-catenin 的影响,并初步明确其量效关系。方法：40 只雄性SD 大鼠,随机分为5 组,即正常组,模型组,黄芪丹参颗粒药对（1:1）低剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对（1:1）中剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对高剂量（1:1）治疗组。除正常组外,其余大鼠均建立单侧输尿管梗阻（UUO）模型。各组给予相应药物治疗,收集尿液检测24 h 尿蛋白、琢1-微球蛋白（ɑ1-Microglobulin,ɑ1-MG）的含量,光镜观察肾组织病理;Western Blot 技术检测肾组织Wnt4 和β-catenin蛋白表达。结果：①24 h 尿蛋白和ɑ1- MG 检测结果,与正常组比较,模型组24 h 尿蛋白和ɑ1- MG 均明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,各治疗组24 h 尿蛋白和ɑ1-MG 明显降低（P＜0.05）;与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组24h 尿蛋白均明显降低（P＜0.05）,各剂量组之间ɑ1-MG 差异无显著性。②HE 染色结果,各治疗组病理变化较模型组均有明显改善,与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组评分明显减少（P＜0.05）。③肾组织Wnt4 和β-catenin 免疫印迹检测结果,与正常组比较,模型组和各剂量组大鼠肾组织Wnt4 和β-catenin 具有明显有升高趋势,各治疗组均有不同程度下降,尤以颗粒中、高剂量组下降明显。结论：黄芪丹参（1:1）颗粒药对可以保护UUO 大鼠肾小管功能,一定程度改善UUO 大鼠肾脏病理改变,其机制可能与干预Wnt/β-catenin 信号通路有关。黄芪丹参颗粒药对可以干预UUO 大鼠肾组织中Wnt4、β-catenin 的表达,并存在一定的量效关系。     

丹酚酸A、C分子药对配伍干预肾纤维化组织凋亡相关蛋白caspase-3、GRP78的实验研究

目的研究丹酚酸A、C分子药对配伍对肾纤维化过程中凋亡相关蛋白半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的调节作用。方法将50只雄性SD大鼠随机分为5组,即正常组,模型组,丹酚酸A组,丹酚酸C组,丹酚酸A、C按1:1配伍组(丹酚酸A+C组)。除正常组外,其余大鼠均采用单侧输尿管梗阻(UUO)造模。造模后第2天开始各组给予相应的干预措施;2周后处死大鼠,收集相应标本,检测尿β2-微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG),光镜观察肾组织病理,TUNEL检测技术观察肾小管间质细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测肾组织caspase-3、GRP78 mRNA的表达。结果 1与正常组比较,模型组及各治疗组尿β2-MG、NAG水平均明显升高(P0.05)。2与模型组比较,各治疗组尿β2-MG水平均明显降低(P0.05),丹酚酸A、C组尿NAG水平明显降低(P0.05)。3与模型组比较,各治疗组肾脏组织病理情况均有不同程度的改善,尤以丹酚酸A、A+C组改善明显(P0.05)。4丹酚酸A、C组及A+C组可以下调caspase-3、GRP78的表达,有效减轻肾小管间质细胞凋亡,且丹酚酸A+C组较丹酚酸C组效果更明显(P0.05)。结论丹酚酸A、C及A+C分子药对配伍可一定程度保护UUO大鼠肾小管功能,并下调肾组织caspase-3、GRP78的表达,减少肾小管间质细胞凋亡的发生,减轻肾间质纤维化程度。上述作用可能与该药物干预凋亡相关蛋白caspase-3、GRP78的表达,抑制内质网应激途径有关。     

黄芪丹参颗粒药对干预肾纤维化Wnt/β-catenin信号通路的实验研究

目的：观察黄芪丹参颗粒药对对肾纤维化信号通路Wnt/β-catenin的影响,并初步明确其量效关系。方法：40只雄性SD大鼠,随机分为5组,即正常组,模型组,黄芪丹参颗粒药对（1：1）低剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对（1：1）中剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对高剂量（1：1）治疗组。除正常组外,其余大鼠均建立单侧输尿管梗阻（UUO）模型。各组给予相应药物治疗,收集尿液检测24 h尿蛋白、α1-微球蛋白（α1-Microglobulin ,α1-MG）的含量,光镜观察肾组织病理;Western Blot技术检测肾组织Wnt4和β-catenin蛋白表达。结果：淤24 h尿蛋白和α1- MG检测结果,与正常组比较,模型组24 h尿蛋白和α1- MG均明显升高（〈0.05）;与模型组比较,各治疗组24 h尿蛋白和α1-MG明显降低（〈0.05）;与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组24h尿蛋白均明显降低（〈0.05）,各剂量组之间α1-MG差异无显著性。于HE染色结果,各治疗组病理变化较模型组均有明显改善,与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组评分明显减少（〈0.05）。盂肾组织Wnt4和β-catenin免疫印迹检测结果,与正常组比较,模型组和各剂量组大鼠肾组织Wnt4和β-catenin具有明显有升高趋势,各治疗组均有不同程度下降,尤以颗粒中、高剂量组下降明显。结论：黄芪丹参（1：1）颗粒药对可以保护UUO大鼠肾小管功能,一定程度改善UUO大鼠肾脏病理改变,其机制可能与干预Wnt/β-catenin信号通路有关。黄芪丹参颗粒药对可以干预UUO大鼠肾组织中Wnt4、β-catenin的表达,并存在一定的量效关系。