细胞因子检测的方法及其临床应用

本简介了几种与白细胞介素密切相关的临床疾病，概述了目前常用的细胞因子检测方法，对细胞因子的应用作了首要的评价。     

三种中药皂甙对HL—60细胞诱导分化的实验研究

目的：研究人参总皂甙、绞股蓝总皂甙和三七总皂甙诱导白血病细胞分化及其机理，为进一步开发三种皂甙的临床应用提供理论与实验依据。方法：采用细胞体外培养、流式细胞术、形态学观察、组化与免疫细胞学等方法，研究人参总皂甙（TSPG）、绞股蓝总皂甙（GP）和三七总皂甙（PNS）对HL－60细胞诱导分化的影响。结果：三种中药皂甙均能阻止HL－60细胞由G0／G1期向G2／M＋S期过渡；经三种中药皂甙诱导后，HL－60细胞形态趋向成熟分化，NBT还原反应阳性细胞数和过氧化物酶（POX）染色阳性细胞数增加，CD14、CD15表达阳性细胞数也显著提高,但对照组细胞与实验组细胞非特异性酯酶（NAE）染色均为阴性。结论：提示TSPG、GP、PNS诱导HL－60细胞向粒系分化为主。     

低强度超声对颅骨溶解模型小鼠磨损颗粒诱导的骨溶解效应的影响

目的:探讨低强度超声在小鼠颅骨溶解模型中对破骨细胞增殖分化的干预,为临床治疗关节松动提供理论依据。方法：选择30只BALB/c小鼠,按随机数字表法分为空白对照组、颗粒组和超声组,每组10只。采用改良磨损颗粒法复制小鼠颅骨溶解模型,在术后15 d获取小鼠颅顶骨骨组织标本,HE染色观察炎细胞渗出量和骨溶解面积变化;扫描电镜检测骨片吸收陷窝面积百分比;抗酒石酸酸性磷酸酶染色（TRAP）观察破骨细胞增殖分化;免疫组织化学染色定位观察损伤骨组织中骨保护素（OPG）的表达变化。结果：HE染色,与空白对照组比较,颗粒组和超声组炎细胞渗出量和骨溶解面积明显增加（P<0.01）;与颗粒组比较,超声组骨溶解面积明显降低（P<0.05）,而2组炎细胞渗出量比较差异无统计学意义（P>0.05）。扫描电镜,超声组骨片吸收陷窝面积百分比显著低于颗粒组（P<0.01）。TRAP染色,超声组破骨细胞数量明显低于颗粒组（P<0.01）。免疫组织化学,超声组OPG阳性细胞数明显高于颗粒组及空白对照组（P<0.05）。结论：低强度超声能抑制小鼠颅骨溶解模型中破骨细胞的增殖分化,有效降低聚乙烯磨损颗粒所致的骨溶解效应,从而增强关节假体周围骨的密度和强度,降低关节松动的发生率。     

人参多糖对K562细胞人粒-巨噬细胞集落刺激因子和促红细胞生成素及其受体表达的影响

目的研究人参多糖(GPS)对人红白血病细胞株(K562)表达人粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、促红细胞生成素(EPO)及其受体的影响。方法采用细胞体外培养技术,RT-PCR检测GPS诱导后K562细胞中GM-CSF、EPOmRNA的表达、免疫细胞化学方法检测K562细胞经GPS作用后GM-CSF、EPO及其受体蛋白表达的变化、Westernblotting检测GPS诱导后K562细胞GM-CSF、EPO受体蛋白的表达。结果经GPS诱导后,RT-PCR检测显示K562细胞GM-CSFmRNA的表达有所增强,但与对照组相比无统计学意义,EPOmRNA的表达有明显的降低;免疫细胞化学方法检测EPO与GM-CSF蛋白的表达明显减弱,EPO与GM-CSF受体蛋白的表达明显增强;Westernblotting检测GM-CSF、EPO受体蛋白的表达增强。结论GPS既能抑制K562细胞分泌GM-CSF、EPO,又能明显促进GM-CSF、EPO受体的合成和分泌。     

特异性小干扰RNA沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响

目的:探讨RNA干扰技术沉默Annexin Ⅱ基因表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移力的影响.方法:体外化学合成AnnexinⅡ基因序列特异性双链小干扰RNA(Annexin Ⅱ-siRNA),转染高转移人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,用荧光显微镜观察转染效率,逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测Armexin Ⅱ mRNA和蛋白表达水平;通过生长曲线和体外侵袭迁移实验,观察乳腺癌细胞恶性生物学行为的改变.结果:Annexin Ⅱ-siRNA能有效抑制Annexin Ⅱ mRNA和蛋白表达(P<0.05);经siRNA处理的细胞,细胞生长速度明显降低(P<0.05),侵袭迁移力显著下降(P相似文献   

自制抗体的颗粒增强透射免疫分析法测定人血清胱抑素C的评价

目的：用自制抗体研制可在自动生化分析仪应用的颗粒增强透射免疫浊度分析法（PETIA）定量测定人血清胱抑素C（Cys C）的试剂盒.方法：构建人CysC的原核表达载体pET32a（＋）/Cys C,纯化Cys C重组蛋白并免疫大白兔,制备Cys C抗血清;以自制的CysC抗血清包被乳胶颗粒,研制PE-TIA法定量检测血清Cys C的试剂盒,并对其分析性能进行方法学评价.结果：本法回收率为97.5%～105.0%,批内及批间CV均〈5%,线性范围8.11～0.25mg/L,检测限0.2mg/L;本法与Dako法和BN-Prospect法呈正相关（P〈0.0001）;胆红素对高浓度Cys C测定有干扰作用,Hb和葡萄糖对本法无干扰.结论：应用自动生化分析仪的自研法性能满意.     

感染HBV或HCV的肝病患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的改变

目的探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C）在感染HBV或HCV肝病患者中的临床应用。方法测定了207例HBV或者HCV感染的肝病患者和32名健康对照组（H组）中Cystatin C和金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）浓度。肝病患者被分成肝硬化组（A组，67例）、慢性乙肝组（B组，73例）、慢性丙肝组（C组，39例）和肝癌组（D组，28例）。结果受试者Cystatin C、TIMP-1和TIMP-2在各组间差异均有统计学意义（F值分别为28．234、128．091、196．549，P值均〈0．001）。Cystatin C与TIMPs在各肝病组中的变化一致：肝病组均显著高于健康对照组，A组和D组均显著高于B组与C组，A组与D组、B组与C组间均差异无统计学意义。Pearson相关分析显示Cystatin C与TIMP-1在各肝病组中均呈明显正相关，且有显著性差异；但Cystatin C与TIMP-2的相关性仅A组（r=0．269，P〈0．05）和D组（r=0．398，P〈0．05）呈正相关，有显著性差异，而B组（r=-0．102，P〈0．05）和C组（r=-0．107，P〈0．05）则呈负相关，且差异无统计学意义。结论血清胱抑素C可能是监测肝脏功能的有用指标。     

瘦素对单核细胞THP1分泌趋化因子的影响及其作用机制

目的：探讨瘦素促进单核细胞THP1分泌趋化因子的作用及其相关机制,为研究瘦素调节机体免疫功能提供依据。方法：采用RT-PCR法和流式细胞术检测 THP1细胞瘦素受体 (Ob-Rb和Ob-Rt) 表达。选取对数生长期THP1细胞,随机分为空白对照组和10、50、100及200 μg•L^-1瘦素组,采用Transwell实验检测各处理组穿膜细胞数。THP1细胞分为空白对照组和100 μg•L^-1瘦素组,采用Western blotting法检测信号通路关键分子p-AKT、 p-ERK 1/2和p-STAT3表达水平。THP1细胞分为空白对照组、100 μg•L^-1瘦素组、100 μg•L^-1瘦素+DMSO组、100 μg?L-1瘦素+50 μmol•L^-1 AG490组、100 μg?L-1瘦素+10 μmol•L^-1 LY294002组和100 μg•L^-1瘦素+10 mol•L^-1PD980590组,采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组细胞因子IL-8表达水平。结果：瘦素长受体Ob-Rb和短受体Ob-Rt在THP1细胞中均有高表达。与空白对照组比较,50、100和200 μg•L^-1瘦素组穿膜细胞数明显增加(P<0.05)。与空白对照组比较,100 μg•L^-1瘦素组THP1细胞中p-AKT、p-ERK 1/2和p-STAT3表达水平明显升高 (P<0.05)。与空白对照组比较,50、100和200 μg•L^-1瘦素组THP1细胞中IL-8表达水平明显升高(P<0.05);与100 μg?L-1瘦素组比较,100 μg•L^-1瘦素+10 μmol•L^-1 LY294002组和100 μg?L-1瘦素+10 mol•L^-1 PD980590组THP1细胞中IL-8表达水平明显降低(P<0.05),而100 μg?L-1瘦素+50 μmol•L^-1 AG490组IL-8表达水平变化不明显 (P>0.05)。结论：瘦素能促进单核细胞T
HP1分泌趋化因子,其机制可能与 PI3K/AKT和MAPK/ERK 1/2信号通路有关。