两个抗普通型急性淋巴母细胞性白血细胞抗原(CLLA)的单克隆抗体产生及鉴定

用杂交瘤技术制备了两个J_5样单克隆抗体分泌杂交瘤株55,79。用间接免疫荧光法检查发现,55、79单克隆抗体与15个不同白血病或淋巴瘤细胞系、人外周血单个核细胞、PHA转化人外周血淋巴母细胞、中性粒细胞、红细胞、血小板及人骨髓细胞的反应性与J_5单克隆抗体的反应性十分相似(见表1)。此二抗体与11例急性白血病患者白血细胞反应性与J_5抗体完     

钙离子载体体外诱导外周血造血干细胞定向分化为成熟树突状细胞的研究

目的以实体瘤患者外周血造血干细胞为来源，探讨体外诱导更成熟、功能更强的树突状细胞(DC)的方法。方法以血细胞分离机分离经动员的外周血造血干细胞(PBSC)，加入rhGM-CSF、rhIL-4和ma培养9d后分两组，其中一组洗去含细胞因子的培养液，并给予钙离子载体(CI)A23187处理24h，而另一组仍维持原培养液培养24h；对所获得的两组细胞分别进行细胞形态学、细胞表面抗原及刺激同种异体混合淋巴细胞反应(allo-MLR)能力的分析。结果两组细胞在倒置显微镜和扫描电镜下均显示典型的树突状细胞形态，流式细胞仪分析均高表达CD1α、HLA-DR、CD80和CD40分子；但给予A23187进一步处理24h的细胞比无A23187处理的细胞表达更丰富的CD86和CD83分子及具有更强的刺激allo-MLR的能力。结论组合细胞因子培养获得的PBSC来源的DC，经CI进一步诱导后可获得更成熟及功能更强的DC。     

基因枪介导单纯疱疹病毒DNA疫苗的免疫效果研究

目的：研究单纯疱疹病毒DNA疫苗经基因枪免疫小鼠的效果。方法：基因枪免疫小鼠腹部，免疫组化法检测gD抗原在接种部位的表达；ELISA检测血清中抗gD抗体；病毒攻击检测经基因枪免疫的DNA疫苗对动物的保护效果。结果：基因枪可有效将DNA质粒运送至小鼠真皮内，单纯疱疹病毒Ⅱ型gD2糖蛋白基因在真皮和肌肉组织中高效表达，免疫小鼠体内产生高滴度的中和抗体，能有效抵抗HSV-2病毒的攻击。结论：疱疹病毒gD DNA疫苗通过基因枪接种方式，可在小鼠体内产生特异性保护作用。     

安可梦口服液对慢性疲劳小鼠免疫调节功能的影响

目的:探讨中药复方制剂安可梦口服液治疗慢性疲劳综合征的作用机制。方法:选用BALB/c小鼠,应用强制冷水游泳加进食时电击复合应激因素建立慢性疲劳动物模型,除正常组(n=12)外,成模小鼠分为4组:模型组、复方阿胶浆组犤50g/(kg·d)复方阿胶浆灌胃犦、安可梦口服液小剂量组和大剂量组犤分别以25g/(kg·d)和50g/(kg·d)安可梦口服液灌胃犦,每组12只。正常及模型组灌胃生理盐水0.5mL。各组灌胃2次/d,连续14d。对各组动物白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、干扰素、自然杀伤细胞的活性进行了检测。结果:模型组的IL-2、干扰素、自然杀伤细胞活性比正常组显著降低,差异有显著性(q=12.88,P<0.01);安可梦口服液大、小剂量组的IL-2、干扰素、自然杀伤细胞活性与模型组比较均有显著升高,差异有显著性(q=10.06,8.28;P均<0.01),且作用优于复方阿胶浆组(q=6.68,2.12;P<0.05～0.01)。结论:提高和调整机体低下的IL-2-干扰素-自然杀伤细胞免疫调节网水平,可能是安可梦口服液发挥滋补肝肾、健脾养心、安神定志功效,治疗慢性疲劳综合征的机制之一。     

逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA

逆转录ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒ＲＮＡ王捷，杨太成，江悦华，王晓怀（广州军区总医院医学实验科，５１００１０）丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是单股正链ＲＮＡ病毒，流行病学研究表明，大约９０％的输血后肝炎均由ＨＣＶ引起，原发性肝癌的发生也与ＨＣＶ感染相关［１］。目前...     

重组人血管生长素的鉴定

目的：为了鉴定自行制备的重组人血管生长素。方法：采用凝胶扫描法分析纯度;ELISA等方法检测特异性;鸡胚绒毛尿囊膜实验检测生物活性,并与商品化标准品进行免疫结合性的对比研究。结果：重组血管生长素纯度达96%,具有促进血管生长的生物活性;而且较标准品有理想的免疫结合性。结论：该重组人血管生长素可进一步的实验和临床应用研究。     

抗重组人血管生长素单克隆抗体的制备及鉴定

制备不同类型抗重组人血管生长素的单克隆抗体,为进一步研究抗ｒｈＡＮＧ抗体对ＡＮＧ的中和作用以及对ＡＮＧ依赖型肿瘤的抑瘤实验打下基础。方法：利用杂交瘤技术以ｒｈＡＮＧ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,制备二株,能够稳定分泌抗ｒｈＡＮＧ抗体的杂交,并对上清进行、双扩散,免疫印迹等鉴定。     

9L/F344大鼠脑胶质瘤模型的建立

目的建立稳定的9L/F344大鼠脑胶质瘤模型.方法15只近交系雄性F344大鼠,采用立体定向技术,在大鼠右侧额叶尾状核接种1×105个9L细胞,观察大鼠生存状态;接种后第10、20天行MRI检查,观测颅内肿瘤生长情况.大鼠死亡后,取脑制作病理切片,行HE染色后观察肿瘤组织形态,采用免疫组织化学方法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S-100蛋白.结果大鼠接种肿瘤细胞后30 d内全部死亡,平均生存时间(24.4±3.3)d.接种后10 d,MRI增强扫描即可见肿瘤生成;接种后20 d,MRI检查可见接种侧脑组织大片水肿,增强扫描肿瘤显像清晰.脑内均见肿瘤形成,未见肿瘤颅外生长;肿瘤周边界线较明显,但未见包膜;瘤内新生血管丰富,可见出出血、坏死;肿瘤免疫组织化学GFAP和S-100蛋白染色阴性.结论该方法建立的大鼠脑胶质瘤模型稳定可靠,符合恶性胶质肉瘤生物学特性.该模型是理想的脑胶质瘤实验研究材料.     

肾上腺素能β1受体亚型特异性抗体的制备及鉴定

【目的】制备和鉴定 β1受体亚型特异性抗体。【方法】人工合成 β1受体细胞膜外第二环 197 2 2 2位氨基酸序列作为抗原。连接钥孔冒贝血蓝蛋白 (KLH)增加抗原性后免疫兔获得抗血清。通过凝胶双扩散实验和ELISA法鉴定其效价 ;通过免疫荧光法及ELISA法鉴定其特异性 ;通过离体蛙心灌流实验鉴定其药理活性。【结果】该抗血清效价高 (分别为 1∶6 4和 1∶10 6)、特异性强 ,能和心肌 β1受体发生特异性结合 (1∶10 4 ～ 1∶10 5) ,为异丙肾上腺素的非竞争性拮抗剂。 (pD2 ′ =1 6 2 )。【结论】成功制备的 β1受体亚型特异性抗体可能成为进一步研究 β1受体分布、功能和定量的有力工具。     

扩张型心肌病与β1 受体自身抗体关系初探

目的 探讨抗β1受体自身抗体与扩张型心肌病（DCM）之间的关系。方法 以人心脏β1受体细胞外第二环表位肽段作为抗原，应用酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，检测28例DCM患者和32例正常人血清中β1受体的自身抗体。结果 DCM患者血清中有13例（46％）抗β1受体自身抗体阳性，正常人血清中有2例（6％），两组阳性率差异有显著性（P＜0．01）；DCM组自身抗体平均几何滴度为1：92，显著高于正常对照组1：20（P＜0．01）；DCM患者中自身抗体阳性者的抗体滴度在不同心功能间的分布差异有显著性（P＜0．001）。结论 DCM患者存在着β1受体自身抗体且其滴度也明显高于正常对照组。