终末糖基化产物对神经小胶质细胞IL-1β、IL-6表达的影响

目的：研究终末糖基化产物（AGEs）对神经小胶质细胞白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）表达的影响。方法：以不同浓度、不同时间AGEs刺激体外培养的小鼠小胶质瘤细胞（BV-2细胞）,观察细胞形态的变化,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞内IL-1β、IL-6mRNA水平,应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞培养上清液中IL-1β、IL-6的蛋白含量。结果：与空白组和AGEs对照物组比较,AGEs组细胞活化呈阿米巴样,胞核大而圆,核仁明显,胞浆内颗粒物增多,以300mg/L作用18h组效果最显著。与空白组和AGEs对照物组比较,作用时间相同时,AGEs浓度为50mg/L时即可见细胞的IL-1β、IL-6mRNA水平明显增加（P〈0.05或P〈0.01）,浓度为150mg/L时,细胞培养上清液中IL-1β、IL-6的蛋白含量明显增加（P〈0.05）;作用浓度相同时,2h即可见细胞的IL-1βmRNA水平明显增加（P〈0.05）,6h见细胞的IL-6mRNA水平和细胞培养上清液中IL-1β、IL-6的蛋白含量明显增加（P〈0.05或P〈0.01）,其中以300mg/L作用18h组效果最显著（P〈0.05）。结论：AGEs刺激可使小胶质细胞内IL-1β、IL-6高表达。     

天麻素对终末糖基化产物诱导神经小胶质细胞炎症因子表达的影响

目的观察终末糖基化产物(AGEs)对小鼠神经小胶质细胞BV-2炎症因子白细胞介素(IL-1β、IL-6)表达的影响及天麻素的干预效应。方法将体外培养的小鼠小胶质细胞分成对照组、AGEs组、天麻素(12.5、25、50、100 mg/L)组,培养18 h,观察细胞形态变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中IL-1βI、l-6水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定IL-1β、IL-6 mRNA表达。结果倒置显微镜下观察,对照组小胶质细胞多为静止期,突起较少,AGEs组多数细胞突起较多,呈阿米巴样,以AGEs质量浓度为300 mg/L时最明显,天麻素干预组细胞突起较AGEs组有所减少,其中以天麻素50 mg/L组最少。与对照组相比,AGEs组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6水平,以及细胞内IL-1β、IL-6 mRNA表达明显增加,具有显著差异(P<0.05);与AGEs组相比,天麻素组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6水平,以及细胞IL-1β、IL-6 mRNA表达均有所降低,其中天麻素25、50、100 mg/L组差异显著(P<0.05),以天麻素50 mg/L组降低最显著(P<0.01)。结论 AGEs能够诱发神经小胶质细胞产生IL-1β、IL-6,天麻素能部分抑制AGEs对小胶质细胞的诱导作用。     

抑制性消减杂交法筛选大鼠血管钙化相关基因的研究

目的 了解大鼠血管钙化过程中血管组织基因表达的改变。 方法 选取6周龄SPF级雄性SD大鼠24只,随机分成钙化组和对照组（各12只）,钙化组大鼠制作血管钙化模型（VDN）。两组大鼠于实验第8周处死后测定动脉组织钙含量并作病理检查。提取两组大鼠主动脉中膜RNA,反转录成cDNA,采用抑制消减杂交法(SSH)分离钙化组较正常组高表达基因的cDNA片段,将差异片段与PMD18-T质粒载体连接起来,热转化法转化感受态菌DH-5α,建立钙化组与对照组之间的差异表达cDNA文库。菌落PCR法鉴定重组载体,测序阳性克隆,BLAST比对分析测序结果。随机对Nell1等6个基因进行差异表达的RT-PCR验证。 结果 （1）病理检查示钙化组大鼠主动脉中膜扭曲并见明显钙盐沉积,对照组大鼠主动脉中膜无任何钙盐沉积。（2）血管组织钙测定示钙化组和对照组大鼠分别为(15.34 ± 2.51) mg/g和（5.20 ± 0.75） mg/g,钙化组大鼠血管组织钙含量显著高于对照组（P < 0.01）。（3）采用SSH方法成功构建血管钙化的差减文库,对正反双向差减文库进行菌落PCR鉴定后分别获得92个阳性克隆（正向文库）和18个阳性克隆（反向文库）,插入片段的大小主要集中于150~ 400 bp。对所获阳性克隆进行测序和BLAST比对分析,获得钙化相关43个上调基因和11个下调基因。RT-PCR验证示CytoP450、Nell1等5个基因在钙化组和对照组中表达变化较大,钙化组表达高于对照组,约为后者的1.71倍。 结论 成功构建血管钙化VDN模型。血管钙化过程中相关基因表达发生改变,一些骨化基因以及凋亡、氧化、炎性反应和细胞因子等相关基因表达上调,同时伴有少数可能抑制钙化的基因下调。     

N-乙酰半胱氨酸对AGEs诱导的HK-2细胞IL-1β、IL-6的抑制作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(Nac)对终末糖基化产物(AGEs)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)的抑制作用。方法:将体外培养的HK-2细胞分成正常对照组(NG组)、AGEs组、药物干预组1(N1组)、药物干预组2(N2组),培养72 h,应用反转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qP CR)方法检测IL-1β和IL-6 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养上清中细胞因子的蛋白浓度。蛋白质印迹法(Western blot)检测NF-κB/p65的含量。结果:NG组、AGEs组、N1组和N2组细胞内IL-1β和IL-6 mRNA和蛋白表达,以及NF-κB/p65含量差异均有统计学意义;与NG组比较,AGEs组细胞内IL-1β和IL-6mRNA和蛋白表达明显增加。N1、N2组较AGEs组表达水平下降,AGEs组NF-κB/p65含量高于其他组,差异均具有统计学意义(均P 0. 05)。结论:AGEs可诱导HK-2细胞表达IL-1β和IL-6,NF-κB信号通路可能参与了此过程。     

天麻素对终末糖基化产物诱导神经小胶质细胞炎症因子表达的影响

目的 观察终末糖基化产物（AGEs）对小鼠神经小胶质细胞BV-2炎症因子白细胞介素（IL-1β、IL-6）表达的影响及天麻素的干预效应。方法 将体外培养的小鼠小胶质细胞分成对照组、AGEs组、天麻素（12.5、25、50、100 mg/L）组,培养18 h,观察细胞形态变化,酶联免疫吸附法（ELISA）测定培养上清中IL-1β、Il-6水平,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定IL-1β、IL-6 mRNA表达。结果 倒置显微镜下观察,对照组小胶质细胞多为静止期,突起较少,AGEs组多数细胞突起较多,呈阿米巴样,以AGEs质量浓度为300 mg/L时最明显,天麻素干预组细胞突起较AGEs组有所减少,其中以天麻素50 mg/L组最少。与对照组相比,AGEs组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6水平,以及细胞内IL-1β、IL-6 mRNA表达明显增加,具有显著差异（P＜0.05）;与AGEs组相比,天麻素组细胞培养上清液中IL-1β、IL-6水平,以及细胞IL-1β、IL-6 mRNA表达均有所降低,其中天麻素25、50、100 mg/L组差异显著（P＜0.05）,以天麻素50 mg/L组降?低最显著（P＜0.01）。结论 AGEs能够诱发神经小胶质细胞产生IL-1β、IL-6,天麻素能部分抑制AGEs对小胶质细胞的诱导作用。     

尿毒症继发性甲状旁腺亢进两种手术方式的疗效比较

目的：比较甲状旁腺次全切除与甲状旁腺全切除加自体前臂种植术治疗尿毒症维持性血透患者严重、继发性甲状旁腺功能亢进（SHPT）的临床疗效。方法：对2002年8月~2007年12月期间在我院接受甲状旁腺切除术13例患者资料（甲状旁腺次全切6例,甲状旁腺全切加自体前臂种植7例）进行回顾性分析,包括定位诊断,以及手术前后完整甲状旁腺激素（iPTH）、血钙、血磷、钙磷乘积、红细胞比容（Hct）进行比较。结果：术前分别行B超和颈部放射性核素显像断层扫描（ECT）的6例患者,B超对肿大甲状旁腺的检出率明显高于ECT。两组患者组内iPTH术后（3d,1周,1月,3月）较术前有明显的下降,有统计学意义;术后血钙、血磷及其乘积较术前明显下降,有统计学意义;术后Hct与术前水平接近,无统计学意义。两组间术前、术后iPTH及血钙、血磷、钙磷乘积水平接近,无统计学意义。结论：在两种术式均能有效的治疗SHPT和均有复发可能的情况下,甲状旁腺全切除加自体前臂种植术的二次手术简单易行,有一定的选择优势。     

血液透析者冠状动脉钙化的相关因素分析

目的：分析维持性血液透析患者冠状动脉钙化的相关因素。方法：采用菲利浦螺旋CT扫描以钙化积分确定冠状动脉钙化的程度,根据冠状动脉钙化程度对透析患者进行分组,回顾性分析比较各组临床资料,并进行生存率分析。结果：透析患者冠状动脉轻、中、重度钙化组与非钙化组存在年龄、透析龄、血胆固醇、血三酰甘油、血尿素氮、血肌酐、C反应蛋白的差异,钙化积分与年龄相关,与骨质疏松无关。冠脉钙化组患者3年的生存率低于无冠脉钙化组患者。结论：维持性血液透析患者冠状动脉钙化与年龄、透析龄、血脂代谢紊乱、微炎症、尿毒症毒素水平有关,与骨质疏松无关。冠脉钙化降低了患者的3年生存率。     

来氟米特与雷公藤多苷及单纯激素治疗IgA肾病的疗效观察

目的：了解来氟米特（LEF）、雷公藤多苷联合激素,以及单纯激素治疗IgA肾病的疗效。方法：回顾性分析不同方法治疗的中等量蛋白尿IgA肾病患者61例,其中来氟米特联合中等量激素（LEF组）21例,雷公藤多苷联合中等量激素（雷公藤多苷组）24例,单纯常规量激素治疗组16例。观察用药期间24h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐、血常规、血胆固醇、血清白蛋白、肝功能的变化,同时记录不良反应。结果：治疗24周后,LEF组的完全缓解率及总有效率分别为31.6%和84.2%,雷公藤多苷组的完全缓解率及总有效率分别为46.7%和86.7%,单纯激素组的完全缓解率及总有效率分别为46.7%和73.3%,3组疗效差异无统计学意义。治疗期间单纯激素组的复发率为20%,其他两组均为0,单纯激素治疗组复发率与LEF组、雷公藤多苷组相比差异有统计学意义。LEF组、雷公藤多苷组、单纯激素组的不良反应发生率分别为14.2%、37.5%、12.5%,雷公藤多苷组不良反应的发生率较其他两组显著高,差异有统计学意义。结论：LEF、雷公藤多苷联合激素和单纯激素治疗IgA肾病的近期疗效相似,但单纯激素治疗复发率高,雷公藤多苷治疗不良反应发生率高。3种治疗方法的长期疗效和安全性有待于进一步观察。     

六种钠与超滤模式在血液透析大剂量超滤中应用的比较

血液透析是目前终末期肾衰竭(ESRD)患者重要的肾脏替代疗法,在透析过程中多见低血压、肌肉痉挛及失衡综合征等急性并发症,尤其多见于需要大剂量超滤的患者,严重干扰了患者的超滤除水和血液透析的持续性[1]。2012年2月～2013年2月