细辛中马兜铃酸A与黄樟醚的炮制减毒方法研究

目的研究细辛中马兜铃酸A与黄樟醚炮制减毒方法。方法采用HPLC法,对细辛生品及各个炮制品中黄樟醚、马兜铃酸A的量进行检测,以其量变化为评价指标比较不同炮制方法对毒性物质的去除效果。结果黄樟醚进样量在169.2~846.0μg(r=0.999 6)有良好线性关系,平均回收率为99.83%,RSD为1.67%;马兜铃酸A进样量在11.6~58.0 ng有良好线性关系,平均回收率为101.43%,RSD为1.25%。黄樟醚的炮制去除效果的大小顺序为盐制炒焦米泔水制碱制甘草制醋制姜制酒制碱醋制蜜制,其中盐制与炒焦对细辛中黄樟醚的去除率达到55%以上;马兜铃酸A的炮制去除效果的大小顺序为炒焦碱醋制盐制碱制醋制米泔水制甘草制酒制蜜制姜制,其中炒焦对细辛中马兜铃酸A的去除率达到60%以上。结论细辛炮制后,黄樟醚和马兜铃酸A的量都有不同程度的降低,其中以炒焦炮制最优。     

SCoT分子标记对茶枝柑及近缘种遗传多态性分析

目的采用SCoT分子标记方法对茶枝柑及近缘种进行遗传多态性分析。方法使用正交设计方法,对Mg~(2+)、dNTPs、ExTaq DNA聚合酶、引物浓度及模板DNA用量5个因素进行筛选,筛选适合茶枝柑及近缘种的SCoT-PCR反应体系,同时通过梯度温度筛选最佳退火温度,并验证其多态性引物。结果得到适于茶枝柑的SCoT标记PCR反应体系,最终筛选出12条清晰、条带丰富的作为茶枝柑及近缘种SCoT分子标记的引物,同时通过NTSYS软件分析得到茶枝柑及近缘种的相似系数表和UPGMA聚类树。结论运用3个不同地域柑橘基因组DNA对优化的SCoT-PCR反应体系进行验证,获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱,表明茶枝柑SCoT分子标记技术体系稳定可靠。而聚类分析结果能够直观、科学地从分子角度对茶枝柑及近缘种13种材料进行初步区分。     

SCoT分子标记对不同产地白芍亲缘关系的研究

目的:本研究采用SCoT分子标记技术对分布于浙江磐安,安徽毫州,四川中江,山东菏泽共22个居群的白芍样品进行亲缘关系的研究。方法:通过提取白芍DNA,正交设计寻找白芍SCoT分子标记最佳PCR反应体系,筛选获得白芍PCR扩增的SCoT引物,应用NTSYS2.10e软件并采用UPGMA法进行聚类分析。结果:发现SCoT引物碱基序列共扩增出121条带,其中多态性条带有77条,多态百分率为63.6%,各品种间的相似系数在0.78~0.94之间,不同产地白芍分别聚为一类。结论:不同产地白芍有着丰富的遗传多态性,且SCoT分子标记适用于不同产地白芍亲缘关系的研究,有效区分不同产地白芍品种,这为白芍药材种质资源的引种和规范栽培提供了有力参考。