DNA条形码及ISSR技术对广藿香种质资源的分析

目的采用DNA条形码技术和分子标记技术研究不同产地广藿香的遗传多样性,探讨从基因水平区分不同产地广藿香的方法。方法分别采用DNA条形码技术和ISSR分子标记技术对不同产地的广藿香进行分析。DNA条形码——PCR扩增ITS2和psbA-trnH条形码序列,产物纯化后测序,采用软件CLUSTALX 1.81和MEGA 6.06对序列进行对比分析。ISSR分子标记——采用60条ISSR引物进行试验,筛选出条带清晰、多态性好的ISSR引物进行PCR、电泳及聚类分析。结果 DNA条形码技术分析结果显示不同产地广藿香差异很小;ISSR分子标记技术分析结果显示肇庆和阳春的广藿香亲缘关系较近,湛江广藿香与其他两个产地亲缘关系均较远。结论 ISSR分子标记技术可作为鉴别不同产地广藿香的依据之一。     

SCoT分子标记对不同产地白芍亲缘关系的研究

目的:本研究采用SCoT分子标记技术对分布于浙江磐安,安徽毫州,四川中江,山东菏泽共22个居群的白芍样品进行亲缘关系的研究。方法:通过提取白芍DNA,正交设计寻找白芍SCoT分子标记最佳PCR反应体系,筛选获得白芍PCR扩增的SCoT引物,应用NTSYS2.10e软件并采用UPGMA法进行聚类分析。结果:发现SCoT引物碱基序列共扩增出121条带,其中多态性条带有77条,多态百分率为63.6%,各品种间的相似系数在0.78~0.94之间,不同产地白芍分别聚为一类。结论:不同产地白芍有着丰富的遗传多态性,且SCoT分子标记适用于不同产地白芍亲缘关系的研究,有效区分不同产地白芍品种,这为白芍药材种质资源的引种和规范栽培提供了有力参考。     

利用ISSR分子标记的特征条带鉴别正毛化橘红

目的:在ISSR分子标记方法的基础上找到属于正毛化橘红的PCR特征条带或特征条带组合来建立鉴别正毛化橘红种苗的方法。方法:在50条ISSR引物中筛选合适的引物对三个品种的化橘红叶片样品进行PCR扩增及电泳条带分析,寻找正毛化橘红的特征条带或条带组合,并对80份化橘红叶片样品进行验证。结果:寻找到了两个引物的特征条带组合可以用来鉴别正毛化橘红种苗,建立了正毛化橘红种苗分子鉴定方法。结论:本文建立的基于ISSR分子标记的PCR特征条带组合的方法可以用来快速准确的鉴别正毛化橘红种苗。