膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其机制

目的:观察中药复方膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其相关机制。方法:实验于2005-09/2006-07在南方医科大学细胞生物实验室完成。膈下逐瘀汤(按《医林改错》方组成:五灵脂6g,当归9g,川芎6g,桃仁9g,丹皮6g,赤芍6g,乌药6g,延胡索3g,甘草9g,香附5g,红花9g,枳壳5g。均购自南方医院中药房)经研粉、煮沸、离心、过滤配成质量浓度为25,50,100,200mg/L的药液;顺铂配制成质量浓度为0.5,1.0,1.5,2.0mg/L的药液(作为阳性对照),均作用于Bel-7402细胞,并设空白对照(未加任何药物)。采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazoly ltetrazolium,MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,用酶标仪测定培养细胞在600nm处吸光度值,并计算细胞抑制率,抑制率(%)=(实验组吸光度值-对照组吸光度值/对照组吸光度值)×100%。用蛋白印迹试验检测不同质量浓度药物作用48,72h时第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达水平。结果:①中药复方膈下逐瘀汤对Bel-7402细胞增殖的影响:膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞有明显的生长抑制作用,呈良好的剂量-效应关系。膈下逐瘀汤质量浓度在200mg/L时其48h细胞生长抑制率介于0.5mg/L顺铂组与1.0mg/L顺铂组之间(分别为41.27%,34.01%,47.49%);膈下逐瘀汤质量浓度在50,25mg/L时,其细胞抑制率明显低于顺铂组,72h细胞抑制率结果基本相同。②药物作用肝癌Bel-7402细胞48h后第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达增多,200mg/L膈下逐瘀汤组介于0.5mg/L顺铂组和1.0mg/L顺铂组之间。结论:中药复方膈下逐瘀汤抑制Bel-7402细胞的增殖机制可能是第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因表达增多的原因。     

应用比较蛋白质组学探讨中药干预肝癌机制的思路与方法

通过分析比较蛋白质组学在肝癌中的应用现状及其在新药研究中的作用,探讨其在揭示中药干预原发性肝癌的机制的思路。认为比较蛋白质组学有别于以往筛选疾病治疗前后比较"有效"(靶点)蛋白的方法,采用逆向思维模式,锁定筛选相对"无效"(非靶点)的候选蛋白,以新的视角揭示中药方剂"不能治愈"和"能够治疗"肝癌的分子生物学机制,以期发现肿瘤的"逃逸"蛋白机制。     

从“谷气过旺”到“热郁痰瘀”论非酒精性脂肪性肝炎的病机演变

从血脂代谢紊乱起始到非酒精性脂肪性肝炎的进展中存在着一定的病机演变规律,即谷气过旺,消耗不足,是血脂增高及脂质代谢紊乱形成的始动病机环节;气化失司,膏脂凝结,是胰岛素抵抗、高脂血症及单纯性非酒精性脂肪肝形成的病理基础;脂浊壅滞,聚结肝胞,是高脂血症及单纯性非酒精性脂肪肝形成主要病机;脾运失健,痰瘀互结,是非酒精性脂肪性肝炎形成的病理基础和病机关键;痰瘀郁热,积损肝络,是非酒精性脂肪性肝炎形成病理关键及其预后转折点。其中脾失运化是非酒精性脂肪肝病程进展的关键因素,而气化失司则贯穿与整个疾病过程。     

从肝脾相关理论论治肝硬化

肝硬化是一种以肝组织弥漫性纤维化和再生结节形成为特征的慢性肝病,临床上表现为多系统受累,并以肝功能损害和门静脉高压为主,晚期常出现消化道出血、肝性脑病、继发感染等严重并发症。早期肝硬化多属中医学积聚、癥瘕等范畴,晚期属臌胀范畴。临床上以肝脾相关理论为指导,运用健脾益气方法治疗肝硬化，取得了较好的临床效果。故从肝脾相关角度阐明肝硬化的证治机理是有其必要性及临床意义的。     

周福生教授从脾论治慢性咽炎

慢性咽炎的病因非常复杂，但其根本的原因却是脾胃虚损。因此，补脾益胃是治疗慢性咽炎的根本原则。周福生教授从脾胃辨证治疗慢性咽炎（脾胃失调型），尽显独到。     

周福生教授从脾胃论治慢性咽炎经验介绍

慢性咽炎是临床常见病、多发病.主要分为慢性单纯性咽炎、慢性肥厚性咽炎、萎缩性或干燥性咽炎.临床主要表现为咽部不适感,如干燥、发痒、灼热、微痛及异物感等.由于咽后壁常有较黏稠分泌物刺激,部分病人出现晨起刺激性咳嗽,尤以晨起及刷牙时为著,且常伴有恶心.     

膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及与磷酸化AKT的相关性研究

目的：观察膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及与磷酸化AKT的相关性研究。方法：膈下逐瘀汤配成浓度分别为：膈下逐瘀汤(C1)：0．25×10~(-4)g/mL,膈下逐瘀汤(G2)：0．5×10~(-4)g/mL,膈下逐瘀汤(G3)：1．0×10~(-4)g/mL,膈下逐瘀汤(G4)：2．0×10~(-4)g/mL；顺铂配制成浓度分别为：顺铂(S1)：0．5μg/mL,顺铂(S2)：1．0μg/mL,顺铂(S3)：1．5μg/mL,顺铂(S4)：2．0μg/mL,作用于Bel-7402细胞,用噻唑兰(MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,并且与顺铂各组相对照,用蛋白印迹试验(Western blot- ting analysis)检测不同浓度药物作用48h、72h时磷酸化AKT的表达水平。结果：膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞的增殖及磷酸化AKT的表达均有显著的抑制作用,膈下逐瘀汤浓度在2．0×10~(-4)g/mL时其48h细胞生长抑制率介于S1组与S2组之间。结论：膈下逐瘀汤抑制肝癌Bel-7402细胞增殖的机制可能是通过抑制了细胞内磷酸化AKT这一途径而起作用。     

瘦素诱导HSC增殖的信号转导通路及保肝宁调控作用的实验研究

目的：观察中药复方保肝宁对外源性瘦素（1eptin）诱导的肝星状细胞（Hepatic stellate cell，HSC）增殖功能的影响及其对JAK—STAT信号转导通路中相关信号因子磷酸化JAK2、STAT3蛋白（P-JAK，、P-STAT3）的影响，试图进一步阐明保肝宁抗肝纤维化的可能机制。方法：用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolylium，MTT）检测保肝宁对leptin刺激的HSC-LX2增殖的影响；应用蛋白印迹实验（Western blotting analysis）检测P-JAK2，P-STAT3的表达水平。结果：与秋水仙碱组比较，保肝宁组能明显降低P-JAK2、P-STAT3表达水平。结论：中药复方保肝宁有阻断leptin诱导HSCs—LX2增殖的作用，而降低磷酸化JAK2、STAT3蛋白的表达，阻断JAK2-STAT3通路，可能是其主要的机制之一。     

基于便秘模型小鼠相关差异蛋白表达探讨中医“肺与大肠相表里”理论

【目的】从"肠病及肺"角度,研究便秘模型小鼠肺组织差异表达蛋白质,寻找肺与大肠的病理联系,为阐明中医"肺与大肠相表里"理论实质提供物质基础。【方法】运用蛋白质组学技术,对正常对照组和便秘模型组小鼠肺组织总蛋白质进行双向凝胶电泳(2-DE),选择差异蛋白质斑点,进行基质辅助激光解吸电离—串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)分析和生物信息学分析。【结果】筛选出3个差异表达蛋白质点,其中细胞色素c氧化酶亚基5A(COX5A)、过氧化物氧化还原酶2(Prdx-2)蛋白在便秘组表达下调,肌球蛋白调节轻链2(MLC-2)蛋白表达上调。【结论】便秘小鼠"肠病及肺"的机制可能与肺细胞发生氧化应激损伤有关。     

周福生教授治疗男性更年期综合征经验介绍

周福生是广州中医药大学教授,博士研究生导师,兼任广州中医药大学脾胃研究所主任.从事临床教学、科研30余年,擅长治疗疑难杂症,对男性更年期综合征的认识和治疗颇具独到之处,现将其治疗经验总结介绍如下.