原代培养大鼠前列腺细胞建立前列腺增生筛药模型

【摘要】目的：建立原代培养大鼠前列腺上皮细胞体外筛药模型。方法：无菌状态下取雄性SD大鼠腹侧叶前列腺，称量后，剪成1mm3小块，经Ⅱ型胶原酶消化1h后，过滤、离心获取前列腺细胞，接种于24孔板培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定。获取的大鼠前列腺上皮细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12d后给予系列剂量（0.1-1000µM）的他莫昔芬和阳性药物爱普列特处理72 h，利用CCK-8法检测前列腺上皮细胞存活率并计算药物IC50值，并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化。结果：细胞鉴定结果显示，获取的细胞具典型上皮细胞形态特征，细胞角蛋白和前列腺特异性抗原表达阳性，提示所获细胞为前列腺上皮细胞。爱普列特与前列腺上皮细胞孵育72h后，CCK-8法检测结果显示能够明显抑制前列腺上皮细胞生长，其IC50值为42.7µM，进一步镜下观察结果显示，爱普列特未明显改变大鼠前列腺上皮细胞形态，但能导致存活细胞数减少。他莫昔芬则对大鼠前列腺上皮细胞生长无明显抑制作用，镜下观察前列腺上皮细胞数量和形态未见明显改变。结论：利用原代培养SD大鼠前列腺上皮细胞可以成功建立前列腺增生体外筛选模型。     

恙虫病伴严重头痛12例临床分析

目的探讨恙虫病伴严重头痛时的治疗.方法对10年来12例恙虫病伴严重头痛患者的临床资料进行回顾性总结分析,了解恙虫病伴严重头痛时头颅磁共振表现、颅内压、脑脊液.结果6例存在轻度脑组织肿胀,7例颅内压升高,3例脑脊液轻度异常,12例均给予甘油果糖或联合甘露醇脱水治疗,头痛均明显改善,明确诊断后,在有效抗感染的情况下,酌情给予应用地塞米松,头痛均缓解.结论恙虫病伴头痛,多提示合并颅内损害,行头颅磁共振检查、颅内压测定,脑脊液检查,有助于评估病情,给予甘油果糖或联合甘露醇,以及在有效抗感染的情况下,酌情给予地塞米松,有助于改善患者头痛.     

非梗阻性无精子症患者显微取精术联合单精子冷冻技术助孕1例报告

正1临床资料男,22岁,未避孕规律性生活1年余未育,自诉幼年患腮腺炎,2016年患睾丸炎给予对症处理。女方生育力未见异常。查体:胡须、喉结、阴毛、阴茎正常;双侧睾丸体积约6ml,质地中等;附睾、输精管、精索静脉未触及明显异常。2016年12月和2017年3月外院精液分析未见精子。卵泡刺激素(FSH)     

RGD脂肪醇与17-AAG脂质体的制备及抗肿瘤活性研究

目的制备一种新的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸-脂肪醇(Arg-Gly-Asp-Phe-fatty alcohol,RGDFOC12)与17-丙烯氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)的脂质体(RGDFOC12liposomes-loaded 17-AAG,RLAs)。方法采用薄膜分散-探头超声法制备;采用激光纳米粒度仪、透射电镜和扫描电镜测定粒径,Zeta电位和外观形态;采用动态透析法测定药物释放;采用四甲基偶氮唑盐〔3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT〕考察其对5种人肿瘤细胞株增生的抑制作用;通过瘤质量、存活数、体质量、脏器指数比评价其在小鼠体内抗肿瘤效果。结果制备得到的RLAs的粒径为(130.6±0.6)nm,Zeta电位为(-28.37±1.67)m V,外观形态为球形,包封率为80%以上。RLAs在p H 5.4环境的累积释放百分数大于在p H 7.4环境的累积释放百分数。RLAs在血浆中可稳定存在,12 h累积释放百分数为(15.85±0.71)%。RLAs对5种肿瘤细胞有抑制增生作用。RLAs对接种S180腹水瘤的ICR小鼠有抑制肿瘤生长作用。结论本研究制备了一种新的RLAs,制备方法简单、包封率高,具有较好的抗肿瘤活性。     

多西紫杉醇-海豹油纳米结构脂质载体的抗肿瘤活性评价

目的探讨多西紫杉醇(docetaxel,DTX)海豹油脂质体的抗肿瘤活性以及与脂肪乳的比较。方法采用正交试验设计法筛选处方,通过高压乳匀法制备多西紫杉醇海豹油脂质体。测定其粒径、电位、包封率、体外释药、血浆中稳定性等。并采用四甲基偶氮唑盐〔3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT〕进行体外抗肿瘤活性研究,以及采用荷肉瘤S180小鼠进行体内抗肿瘤活性研究,考察各组抑瘤率和存活率。结果多西紫杉醇海豹油脂质体的粒径在200 nm左右,Zeta电位为-30~-50 m V,包封率达95%以上。体外释放研究证明多西紫杉醇脂肪乳与多西紫杉醇海豹油脂质体具有一定的p H敏感性,且推测多西紫杉醇海豹油脂质体具有更强的缓释作用。血浆中稳定性研究证明多西紫杉醇脂肪乳与多西紫杉醇海豹油脂质体在血浆中较稳定,释放行为缓慢。结论由MTT法结果得多西紫杉醇海豹油脂质体、多西紫杉醇脂肪乳与DTX均表现出较强的细胞毒性作用,且多西紫杉醇海豹油脂质体具有一定的缓释作用。以荷肉瘤S180小鼠为模型的体内抗肿瘤活性研究表明多西紫杉醇脂肪乳与多西紫杉醇海豹油脂质体在血浆中12 h内累积释放量分别为(13.82±0.59)%与(12.91±0.60)%。说明剂型在血浆中较稳定,释放行为缓慢。另外,DTX组小鼠9 d存活率为0,多西紫杉醇脂肪乳组于9 d存活率为93.3%,而多西紫杉醇海豹油脂质体组小鼠9 d存活率为100%,说明多西紫杉醇海豹油脂质体使得耐受剂量提高,降低了药物的不良反应,提高用药安全性与用药的顺应性。     

肾移植后泌尿系肿瘤24例的诊治体会

肾移植受者的恶性肿瘤发生率远高于正常人,其中泌尿系肿瘤的发生率最高.1998年10月至2011年12月,我院共完成肾移植2572例,其中24例(0.93％,24/2572)术后并发泌尿系肿瘤,现报告如下. 资料与方法 一、一般资料 24例中,男性10例,女性14例.肾移植时年龄为(49.3±11.6)岁(24～68岁),术后首次诊断为肿瘤时年龄为(55.6±9.8)岁(32～70岁),肿瘤诊断距手术时间为2～180个月,中位数为54个月.尸体供肾22例,亲属活体供肾2例.术后免疫抑制方案为环孢素A(CsA)+吗替麦考酚酯(MMF)+泼尼松(Pred)者16例,他克莫司(Tac)+ MMF+Pred者4例,CsA+硫唑嘌呤(Aza)+Pred者4例.     

小红细胞对不同原理血液分析仪的血小板计数的影响

目的探讨小红细胞对不同原理血液分析仪的血小板计数的影响。方法对MCV正常标本50例和MCV〈70fL标本56例,分别用血小板计数原理为电阻抗-浮动界标法、电阻抗一固定界标法、电阻抗一拟合曲线法、光学法的A、B、C、D4种不同的血液分析仪进行血小板计数,并与ICSH推荐参考方法手工计数法比较,应用SPSS统计软件对实验数据进行统计分析。结果MCV正常组A、B、C、D4种血液分析仪与手工法的血小板计数结果差异无统计学意义（P〉0．05）;McV〈70fL组A、B、C3种血液分析仪与手工法的血小板计数结果差异有统计学意义（P〈0．01）,而血液分析仪D与手工法的血小板计数结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论对有小红细胞的异常标本,血小板计数光学法血液分析仪优于电阻抗法。     

经尿道前列腺电切术高危患者术中超声监测的临床价值

目的 探讨经腹超声监测对经尿道前列腺电切术（TURP）高危患者的应用价值.方法 267例良性前列腺增生（BPH）行TURP高危患者随机分成观察组115例和对照组152例,术前行国际前列腺症状评分（IPSS）和生活质量评分（QOL）,测定残余尿量（PVRU）和最大尿流率（Qmax）、前列腺特异性抗原（PSA）等.观察组采用经腹超声监测下行TURP,对照组采用传统TURP,记录两组手术时间、切除腺体质量等.术后第3、6、12个月随访,采集IPSS、QOL、PVRU、Qmax等数据并记录并发症的发生情况.结果 两组年龄、IPSS、残余尿量、超声测定的前列腺质量和手术切除腺体质量均无统计学差异（P均＞0.05）.观察组手术时间较对照组明显缩短（P＜0.05）.术后随访两组IPSS、QOL评分和残余尿量较术前明显改善.观察组术后并发症较对照组明显减少（P＜0.05）.结论 经腹超声监测下行TURP可缩短手术时间,提高手术效率.     

孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异型哮喘的临床观察

目的 观察孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异性哮喘(CVA)的临床疗效.方法小儿咳嗽变异性哮喘患儿70例,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组35例.观察组给予布地奈德吸入治疗和孟鲁司特口服治疗,对照组只给予布地奈德吸入治疗,观察两组患儿的临床疗效.结果 观察组显效27例,有效7例,无效1例;对照组显效17例,有效10例,无效8例,观察组疗效好于对照组 (P<0.05).观察组治疗后咳嗽缓解时间、咳嗽消失时间均短于对照组(P<0.05).结论 孟鲁司特治疗小儿咳嗽变异型哮喘,效果显著,是治疗小儿咳嗽变异型哮喘的有效方法之一.