胃痛宁片质量标准的研究

目的 建立胃痛宁片的质量标准.方法 采用TLC法对处方中龙胆粉进行定性鉴别,采用HPLC法测定蒲公英提取物中咖啡酸的质量分数.结果 在薄层色谱中可检出龙胆苦苷的特征斑点;咖啡酸回归方程为A=42.128 6ρ-19.133 2(r2=1),在6.29～ 62.9 μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率为96.4％,RSD为0.28％(n=6).结论 所建立的定性方法专属性强,定量方法简便、准确,能有效地控制胃痛宁片的质量.     

RP—HPLC法测定龙胆通窍丸中龙胆苦苷的含量

目的:建立龙胆通窍丸中龙胆苦苷的含量测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对龙胆通窍丸中的龙胆苦苷进行含量测定,色谱柱:Hypersil C18柱;流动相:甲醇-水(30∶70),流速:1.0mL/min;柱温:30℃ ;检测波长:270nm.结果:龙胆苦苷标准曲线的回归方程为:Y=291.6X+0.1147,r=0.9997,在0.02-0.32mg/mL质量浓度范围内线性关系良好,平均回收率为98.2%,RSD%=1.16%(n=5).结论:所建立的含量测定方法简便易行,专属性强,重现性好,可作为控制龙胆通窍丸质量的方法.     

正交试验法优选宁夏产秦艽醇提工艺

目的:优选宁夏产秦艽的最佳醇提工艺。方法:以测定秦艽中龙胆苦苷提取率作为考察指标,采用L9(34)正交试验,考察提取醇量、提取时间、提取次数、提取温度对龙胆苦苷提取率的影响。结果:各因素对检测指标影响大小顺序是:提取次数>提取醇量>提取时间>提取温度,宁夏产秦艽的最佳醇提工艺为当秦艽质量为0.5g时,溶剂用量为35mL,提取时间为15min,提取次数为3次,提取温度为40℃。结论:提取次数对龙胆苦苷提取影响显著。     

液质联用法测定龙胆水煎剂中三种环烯醚萜的含量

目的利用液质联用（LC／MS／MS）方法测定龙胆水煎剂中环烯醚萜类化合物龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和马钱苷的含量。方法色谱柱为J’Sphere ODS-H80（150mm×2．0mm，4μm）；流动相为甲醇-10mmol·L^-1醋酸铵溶液（30：70）；流速为200μl／min。样品经电喷雾离子源（ESI）正离子化后，通过三级四极杆串联质谱仪，采用多反应离子监测方式测定样品中龙胆苦苷（m／z 357．2-195．3）、獐牙菜苦苷（m／z 392．1→195．2）和马钱苷（m／z 408．4→229．1）浓度。结果在该分析条件下，3种化合物能够同时进行检测。龙胆苦苷浓度在200～5000ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=1．26×10^3X＋2．27×10^3，r=0．9983；獐牙菜苦苷浓度在20-500ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=360X＋144，r=0．9991；马钱苷浓度在20-500ng·ml^-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=782X＋42．6，r=0．9994。对照品峰面积精密度RSD分别为龙胆苦苷2．52％，獐牙菜苦苷2．77％和马钱苷2．89％；平均加样回收率分别为龙胆苦苷98．2％，獐牙菜苦苷99．1％和马钱苷99．7％。结论该方法灵敏、准确、特异性强。     

HPLC法测定肝舒片中龙胆苦苷的含量

目的:建立肝舒片中龙胆苦苷含量的测定方法。方法:采用HPLC法,ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-水(8∶92)作为流动相,流速为0.8 mL.min-1,柱温:30℃,检测波长:274 nm。结果:龙胆苦苷在0.009-0.180 g.mL-1范围内有良好的线性关系,平均加样回收率为99.2%,RSD%=0.75%。结论:本方法快速简便,结果准确,可用于该制剂中龙胆苦苷的定量分析。     

11种獐牙菜及近缘植物中有效成分的高效液相色谱测定

建立了獐牙菜中3种苦味甙,即獐牙菜苦甙(swertiamarin)、獐牙菜甙(sweroside)、龙胆苦甙(gentiopicroside)及一种　酮甙──獐牙菜　酮甙(swertianolin)的高效液相色谱定量分析方法(μ-BondpakC₁₈柱,水—甲醇—异丙醇—四氢呋喃=65:30:5:1作流动相);对11种獐牙菜及近缘植物椭圆叶花锚、坚龙胆进行了含量测定,并对他们之间的异同进行了比较。     

龙胆苦苷对新生大鼠氧糖剥夺再灌注损伤海马神经元Caspase-3、Bax和Bcl-2表达的影响

目的探讨龙胆苦苷(GP)对新生大鼠氧糖剥夺再灌注损伤海马神经元的抗凋亡保护作用及机制。方法采用无糖培养基加缺氧法建立原代新生大鼠海马神经元氧糖剥夺再灌注损伤模型,同时给予不同浓度的龙胆苦苷进行干预。应用Hoechst 33342染色法检测神经细胞的凋亡,并计算凋亡率;化学比色法测定神经细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率;RT-PCR和Western blotting技术检测凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2 m RNA和蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组Hoechst 33342染色神经元凋亡率明显升高,LDH漏出率增加,Caspase-3、Bax m RNA和蛋白的表达水平上调,Bcl-2 m RNA和蛋白的表达水平下降。与模型组比较,龙胆苦苷(40、20、10mg/L)可显著降低氧糖剥夺再灌注损伤神经元的凋亡率和LDH漏出率;龙胆苦苷(40mg/L)可明显抑制Caspase-3、Bax m RNA和蛋白的表达,升高Bcl-2 m RNA和蛋白的表达。结论龙胆苦苷对新生大鼠海马神经元氧糖剥夺再灌注损伤所诱发的神经细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2表达,抑制Caspase-3、Bax表达有关。     

Effect of Feining on bleomycin-induced pulmonary injuries in rats

Ethnopharmacological relevance

The flowers of Gentiana veitchiorum has been widely used in decoction form in the traditional medicine of Tibet against tussis, tracheitis, angina for their anti-inflammatory, antimicrobial and alexipharmic properties.

Aim of the study

The aim of current study was to evaluate the therapeutic effects of Feining, a Chinese herbal formula (national invention patent: ZL200510042636.3) against pulmonary injuries and to clarify the mechanisms involved.

Materials and methods

Experimental pulmonary injuries were induced by bleomycin (BLM) in rats with or without subsequent treatment of Feining or prednisone as positive control. The pulmonary injuries were evaluated by histological analysis. Also, the levels of superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH) and hydroxyproline (Hyp) in the lung tissue were determined. To clarify one of the possible active principles responsible for Feining, high performance liquid chromatography-diode array detector-mass spectrometry (HPLC-DAD-MS) method was applied to identify the components of Gentiana veitchiorum, one of major ingredients of Feining.

Results

Feining significantly improved lung alveolitis scores and reduced the Hyp content of lungs, which is an index of collagen accumulation. Moreover, Feining played a role against the oxidative damages by decreasing the MDA level, whereas increasing SOD and GSH activity, which correlated with oxidation resistance and scavenging of free radicals. In addition, Feining alleviated inflammatory lung injury by decreasing tumor necrosis factor-α (TNF-α) expression. HPLC-DAD-MS analysis revealed that there was 1.97% gentiopicroside in Gentiana veitchiorum.

Conclusion

Feining has certain therapeutic effects against pulmonary injuries.     

不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量测定

目的：测定滇龙胆巾龙胆苦苷的含量，提供其种质资源及药材质量评价、种植区划规划的依据。方法：用高效液相色谱方法测定不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量，并根据测定结果进行品质评价。结果：不同产地46个滇龙胆样品中龙胆苦苷的含量在2．11％～8．24％之间，平均含量4．77％．结论：滇龙胆有效成分含量高，足我省品质优良的道地药材；滇龙胆种植规划应优先考虑昆明、红河、文山、楚雄、玉溪、临沧等地。     

双波长薄层扫描法测定东北龙胆中龙胆苦苷的含量

目的:建立东北龙胆中龙胆苦苷的测定方法。方法:采用双波长薄层扫描法测定东北龙胆中龙胆苦苷的含量。样品波长270nm,参比波长370nm。结果:回归方程为y=2159.4x 57.2,r=0.9998,平均回收率为99.2%,RSD为0.29%(n=6)。结论:本方法简便、快速,重现性好,可用于龙胆药材的质量控制。