按法对大鼠脑卒中后肌痉挛的影响及其机理研究

目的:观察按法干预后脑卒中后肌痉挛大鼠血浆及脊髓L1-L3节段灰质前角组织中γ-氨基丁酸(GABA)和甘氛酸(Gly)含量的变化,探讨按法缓解脑卒中后肌痉挛的作用机制。方法:健康成年雄性Sprague-DawIey(SD)大鼠80只,随机抽取10只为空白组,其余70只造模。采用左颈外动脉插入线栓法建立大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血(MCAO)模型。Longa神经功能评定为2-3分,且改良Ashworth肌张力评分评定为;1+、1+及2级的30只大鼠纳入实验。用随机数字表法将30只造模成功的大鼠随机分为模型组、按肌腱组和按肌腹组。造模成功2 d后,按肌腱组及按肌腹组大鼠分别接受大鼠按法橾作治疗仪按股四头肌肌腱和按股四头肌肌腹治疗,压力控制在(350±50)g,按压频率为5s/次,每次15 min,每日1次,连续治疗5d。各组于治疗第5次后,采用改良Ashworth#挛评定标准对大鼠股四头肌的张力进行评定。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法观察大鼠血浆及脊髓L1-L3节段中Gly的含量变化,采用高效液相色谱法(HPLC)观察大鼠血浆及脊髓L1-L3节段中GABA的含量变化。结果:各组改良Ashworth量表肌张力评定中,按肌腱组大鼠肌张力下降较按肌腹组更为明显(P<0.01);按肌腱组血浆及香髓L1-L3节段组织中Gly及GABA的含量增加较按肌腹组更为明显(均P<0.01)。结论:基于腱器官“反牵张反射”理论,采用按法刺激腱器官诱发“反牵张反射”对大鼠肌痉挛状态的改善效果优于按压肌腹。大鼠血浆和脊髓L1-L3节段中Gly和GABA含量的增加,可能是按法刺激腱器官改善大鼠肌痉挛状态的作用机制之一。     

胆酸偶联喜树碱衍生物E2、G2的稳定性研究

目的考察胆酸偶联喜树碱衍生物20(S)-O-甘氨酸-脱氧胆酸喜树碱(E2)、20(S)-O-醋酸-脱氧胆酸喜树碱(G2)在大鼠血浆和人工胃肠液中的稳定性。方法建立并优化高效液相色谱法,测定并比较E2、G2和喜树碱在大鼠血浆和人工胃肠液中的稳定性。结果在血浆和人工胃肠液中三者均有不同程度的减少,但E2、G2减少量均低于喜树碱。相对于人工胃肠液,三者在大鼠血浆中减少最为明显。三者在3种生物基质中发生了相似的降解,E2、G2主要发生水解生成喜树碱,而喜树碱则主要发生了内酯环开环。结论通过偶联胆酸合成得到的喜树碱衍生物在生物基质中具有明显高于喜树碱的稳定性,有助于维持喜树碱药效团内酯环的稳定。     

RGD类肽抑制高转移舌癌细胞粘附、迁移的实验研究

目的　进行合成肽RGDS(精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸 丝氨酸 )抑制脑转移舌癌细胞转移机理方面的研究。方法　采用MTT法研究不同浓度的RGDS对Tb细胞粘附人工重组基底膜 (Matrigel)及纤维连接蛋白 (Fn)能力的影响 :细胞移动实验测定RGDS抑制Tb细胞在Matrigel及Fn上迁移的能力 ;明胶底物SDS PAGE电泳推测RGDS与基质金属蛋白酶的关系。结果　不同浓度的RGDS抑制了Tb细胞对Matrigel及Fn的粘附 ,并能抑制Tb细胞在Matrigel及Fn上的迁移。电泳结果表明RGDS能部分抑制由Fn诱导的基质金属蛋白酶的分泌。 结论　RGDS能抑制Tb细胞的粘附、迁移及抑制由Fn诱导的金属蛋白酶分泌 ,提示RGDS有抗肿瘤转移活性。     

复方阿胶浆质量标准提升研究

目的提升复方阿胶浆质量标准。方法基于中药复方制剂"整体鉴别"新模式,对复方阿胶浆中植物来源中药采用一板多鉴法,红参、党参使用同一供试品溶液、同一展开剂,采用对照品和对照药材双对照(红参使用人参皂苷Rg_1对照品和红参对照药材;党参使用党参炔苷对照品和党参对照药材)进行鉴别;熟地黄、山楂使用2种供试品溶液、同一展开剂,采用对照品和对照药材双对照(熟地黄使用毛蕊花糖苷对照品和熟地黄对照药材;山楂使用牡荆素鼠李糖苷对照品和山楂对照药材)进行鉴别。对复方阿胶浆中动物药阿胶建立L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸4种氨基酸含量测定。并采用一测多评法,以L-羟脯氨酸为内标,确定甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的相对校正因子并计算含量。结果建立了复方阿胶浆中植物药鉴别的"4-3-2-2"模式,即4味中药,3种供试品溶液制备方法、2种展开剂,2种对照物的双对照方法,斑点清晰且专属性强。建立了复方阿胶浆中动物药阿胶一测多评法含量测定,15批样品中L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的质量浓度分别为2.73～3.37、4.61～6.99、2.64～3.97、3.58～4.46 mg/mL。以L-羟脯氨酸为内标建立的甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的相对校正因子分别为0.651、0.958、0.857。采用t检验、相对偏差法和Pearson相关系数法对2种方法的含量测定结果进行比较分析,15批复方阿胶浆一测多评法计算值与外标法实测含量值无显著差异。结论建立了复方阿胶浆中植物药来源中药鉴别的"4-3-2-2"模式。对处方中动物来源中药阿胶建立了4种氨基酸的一测多评法含量测定。通过"一板、一测",达到"多鉴、多评"整体药味质量控制的目的,科学合理地提升复方阿胶浆的质量标准。     

补阳还五汤治疗中风后肢体痉挛的随机单盲对照研究

目的:探究补阳还五汤治疗中风后肢体痉挛的临床效果,研究作用机制、提高疗效、改善患者生命质量。方法:选取2015年8月至2018年7月南宁市中医医院收治的中风后肢体痉挛患者112例作为研究对象,按照入组先后顺序分成对照组和观察组,每组56例。2组均营养脑细胞、控制血压、调节血脂治疗,对照组辅助康复治疗,观察组加用补阳还五汤治疗,均治疗4周,观察治疗前、完成治疗后Fugl-Meyer功能量表、日常生活能力积分(ADL)、神经功能缺损程度(NDS)、改良Ashworth量表、肌电图、血液流变学(包括全血黏度、血浆黏度、纤维蛋白原、血小板聚集指数、红细胞变形指数)、神经元指标甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)变化并比较,完成治疗后总结疗效情况。结果:1)完成治疗后2组Hmax、Mmax、H/Mmax较治疗前均显著下降(P0.05),完成治疗后观察组以上指标均显著低于对照组(P0.05)。2)完成治疗后2组Fugl-Meyer功能量表、ADL较治疗前均显著升高,NDS、改良Ashworth量表较治疗前显著下降(P0.05),完成治疗后观察组NDS评分、改良Ashworth量表显著低于对照组,余显著高于对照组(P0.05)。3)完成治疗后2组全血黏度、血浆黏度、纤维蛋白原、血小板聚集指数、红细胞聚集指数较治疗前均显著下降(P0.05),完成治疗后观察组以上指标均显著低于对照组(P0.05)。4)完成治疗后2组Gly、GABA较治疗前均显著下降(P0.05),完成治疗后观察组以上指标均显著低于对照组(P0.05)。5)完成治疗后观察组治愈率、总有效率显著高于对照组(P0.05)。结论:补阳还五汤能提高中风肢体痉挛神经元生长水平,促进血液循环,从而缓解痉挛症状,提高生命质量。     

RGD三肽的临床应用进展

整合素是一个异源二聚体组成的膜受体蛋白家族,能特异性识别精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列。整合素在肿瘤细胞和新生血管高表达。利用它们3者之间特殊关系,将RGD作为载体,与放射性示踪剂、抗肿瘤药物以及其他物质结合,使其具有亲肿瘤显像、靶向抗肿瘤治疗、抗感染、抗抑郁和骨骼及神经修复等作用。     

低温对脑缺血的保护机制研究新进展

低温对脑缺血保护作用的机制是复杂的。目前的研究认为,低温可降低神经细胞外兴奋性氨基酸尤其甘氨酸的释放,增加神经元内泛素的合成,保存腺苷酸池,改善能量代谢状态,抑制氧自由基产生,从而对脑缺血呈现保护作用。     

CXCR4参与调控慢性神经病理性疼痛的机制研究

目的:探究CXCR4在外周神经损伤引起的神经病理性疼痛发生发展中的作用及其可能的机制。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为3组(n=12):假手术组(Sham组),对照组(SNI组)、治疗组(AMD组)。采用保留性坐骨神经损伤术(Spared nerve injury,SNI)建立疼痛模型,AMD组鞘内连续注射CXCR4特异性拮抗剂AMD3100(1μg/10μl,每天一次,连续两周),Sham组和SNI组在同时间点鞘内注射等量生理盐水,采用von-Frey细丝测量大鼠患肢机械刺激缩足阈值(Paw withdrawal threshold,PWT)。于术后第14天、21天取大鼠L4~6脊髓,采用免疫荧光及western blotting技术检测脊髓CXCR4、甘氨酸受体α3亚单位(Gly Rα3)及蛋白激酶p-ERK的表达。结果:与Sham组相比,SNI组大鼠PWT值术后明显降低(P<0.01),脊髓CXCR4表达增高(P<0.01),同时伴有Gly Rα3表达下调(P<0.01)。鞘内连续注射AMD3100可显著提高大鼠PWT(P<0.05),并上调Gly Rα3的表达(P<0.01)。结论:CXCR4可能通过调控中枢敏化参与慢性神经病理性疼痛的发生和发展。     

不同冻干保护剂对利巴韦林冻干粉针的影响研究

目的研究Emprove低内毒素蔗糖、无水乳糖、Emprove低内毒素葡萄糖、Emprove低内毒素甘露醇、Emprove低内毒素山梨醇、Emprove低内毒素氯化钾、Emprove低内毒素甘氨酸7种不同类型常用冻干保护剂对利巴韦林冻干粉针性能的影响。方法以外观和复溶效果为指标,考察了预冻时间、冻干保护剂用量、冻干时间的影响。测定了空白粉针剂和利巴韦林粉针剂冻干后含水量、p H值和利巴韦林质量分数。结果以无水乳糖为冻干保护剂,预冻时间6 h,冻干时间9 h,保护剂用量4%;以Emprove低内毒素氯化钾为冻干保护剂,预冻时间9 h,冻干时间9 h,保护剂用量4%;以Emprove低内毒素甘露醇为冻干保护剂,预冻时间6 h,冻干时间6 h,保护剂用量4%;以Emprove低内毒素甘氨酸为冻干保护剂,预冻时间12 h,冻干时间9 h,保护剂用量4%。所得冻干粉针外观饱满、平整,迅速、完全复溶。结论无水乳糖、Emprove低内毒素氯化钾、Emprove低内毒素甘露醇、Emprove低内毒素甘氨酸4种冻干保护剂更适合制备利巴韦林冻干粉针,可为水溶性药物冻干粉针剂的制备提供了参考。