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1.
人端粒酶RNA的cDNA探针制备及其对胃粘膜细胞端粒酶RNA表达的检测 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 建立人端粒酶RNA表达的检测方法。方法 制备人端粒酶RNA,(human telomeraseRNA,hTR)的cDNA探针,分别应用RNA斑点杂交与端粒重复序列扩增法(TRAP)分析检测不同胃粘膜的端粒酶RNA的表达与端粒酶活性。结果 人端粒酶RNA的cDNA探针制备成功。18例活检胃癌组织及45例手术胃癌组织RNA斑点杂交检测的阳性率均为l00%,相应TRAP分析的阳性率分别为88.89%、86.67%,低于RNA斑点杂交(P<0.05)。同时RNA斑点杂交结果提示在非癌胃组织中随着肠化程度增高人端粒酶RNA表达也增强。结论 RNA斑点杂交检测人端粒酶RNA,具有高度的敏感性和特异性,弥补了TRAP分析敏感性不足的缺点。 相似文献
2.
用AGPC法抽提幼年家兔视网膜总RNA,并应用了地高辛标记核酸探针的方法。经斑点杂交显示幼年家兔视网膜出现C—sis原癌基因表达。对实验方法以及C-sis原癌基因表达的意义进行了探讨。认为此方法快速、灵敏,检测C-sis原癌基因表达对深入研究视网膜生长发育及肿瘤等病变有一定意义。 相似文献
3.
用AGPC法抽提幼年家兔视网膜总RNA,并应用了地高辛标记核酸探针的方法,经斑点杂交显示幼年家兔视网膜出现C-sis原癌基因表达,对实验方法以及C-sis原癌基因表达的意义进行了探讨。认为此方法快速、灵敏,检测C-sis原癌基因表达对深入研究视网膜生长发育及肿瘤等病变有一定意义。 相似文献
4.
目的构建并产生肿瘤血管抑制肽alphastatin(Al)重组腺伴随病毒(rAAV)载体。方法将目的基因alphastatin插入载体质粒pSSHG-巨细胞病毒(CMV)的EcoRI和BamHI位点,构建重组质粒pSSHG-CMV/NT4-Al。用腺病毒辅助质粒pFG140代替野生型腺病毒,包装质粒pAAV/Ad及已构建的重组腺伴随病毒载体质粒,使用三质粒共转染法转染293细胞,包装得到腺伴随病毒(AAV)-Al。采用氯仿抽提、聚乙二醇沉淀回收纯化,斑点杂交方法测定重组病毒滴度。结果重组病毒rAAV-Al滴度约为2×1012颗粒/ml。结论成功制备了重组病毒rAAV-Al,提供了一种生产足量安全的rAAV-Al简单易行的方法,为肿瘤的基因治疗实验奠定了基础。 相似文献
5.
本文将含HPV重组质粒的大肠杆菌活化,扩增,提取,酶切回收,获得纯化的7.9kbHPV DNA片段,通过随机引物标记法制成Dig-HPVDNA探针。用此探针进行斑点杂交,Southern转印杂交检测女性生殖器活检组织标本中的HPVDNA,并检测其敏感生,特异性及重复性。133例活检组织标本中,经病理切诊断为尖锐湿疣的标本,其HPV6b和HPV11检出率为80.65%,非尖锐湿疣为6.93%。试验证 相似文献
6.
脑红蛋白(Ngb)是近期发现的一种携氧球蛋白,是继血红蛋白(Hb)和肌红蛋白(Mb)之后的第三种携氧球蛋白,主要存在于人和脊椎动物脑内。斑点杂交法研究证实Ngbm RNA和Ngb在脑内高表达,但在不同的脑区分布不同,并且在不同部位的表达程度与该区域对氧的敏感性呈负相关。Ngb的发现为研究神经保护提供了新的思路。现对近年来Ngb研究的最新进展作一简要介绍,并探讨其在神经疾病发病机制中可能的作用。 相似文献
7.
目的 探讨荧光定量多聚酶链反应 (FluorescencequantitativePCR ,FQ PCR)检测HBV DNA的可行性及优缺点。方法 采用FQ PCR、斑点杂交分别检测由ELISA定性的 2 0 3份血清样品 (大三阳、小三阳、乙肝疫苗免疫者、健康人 )。结果 FQ PCR和斑点杂交阳性检出率分别是 96 4 9%、2 8 2 4 % (大三阳 ) ,85 96 %、5 88% (小三阳 ) ,P <0 0 5 ;斑点杂交阴性血清FQ PCR定量高达4 7× 10 5COPY/ml。结论 FQ PCR检测HBV DNA灵敏、可靠 ,优于斑点杂交法 相似文献
8.
9.
本研究使用光生物素(PHOTOPROBE~(TM) Biotin)标记恶性疟原虫(P.f.)全基因组DNA,含P.f.cDNA片段的重组质粒DNA(C7)及克隆的P.f.cDNA片段(P9-25)等作为探针,并以斑点杂交试验检测靶DNA。实验结果显示,光生物素标记法简单、快速和安全;标记的探针活性较高,于-20℃贮存10个月无明显降低。用生物素化的P.f.全基因组DNA及C7探针分别可检出低至125pg和250pg的纯化的P.f.DNA。 相似文献
10.