南方红豆杉不同部位紫杉烷类含量累积规律分析

目的:测定南方红豆杉不同组织器官紫杉烷类物质的含量,优选出最佳采收部位,为其开发利用提供依据。方法:分别采集南方红豆杉植株主干树皮、侧皮、根皮、须根、茎、叶六个组织器官材料,运用HPLC法检测紫杉烷类物质含量,确定其最佳利用组织器官。结果:南方红豆杉四种紫杉烷类在组织中的分布明显地受组织分化的影响,其中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ在叶中最多,7-表-10-去乙酰基紫杉醇在侧皮中最多,紫杉醇、三尖杉宁碱则在根中最多。结论:叶是合成紫杉醇前体物质的主要器官,而皮与根则是合成及积累紫杉醇的主要组织器官。     

孕烷X受体与炎症反应及中药干预机制研究进展

孕烷X受体(Pregnane X receptor,PXR)是核受体家族成员之一,可被多种内源性和外源性物质激活。PXR通过诱导药物代谢酶和转运体,在肝脏、肠道、皮肤和血管内皮中发挥重要的解毒作用。此外,PXR还具有调节糖脂代谢、胆固醇代谢、胆红素和胆汁酸代谢、免疫炎症反应等功能。研究证实,PXR已被公认为多种炎症性疾病的有效药物干预靶点,如炎性结肠炎、坏死性肠炎、肝炎、皮炎、糖尿病等。多种中药或其活性成分可以作为PXR受体激动剂通过核因子B(NF-κB)和尾部相关同源盒转录因子2(Cdx2)通路干扰炎症反应,如虎杖、木蝴蝶、黄芩、黄连、丹参、白芷、人参、香附、五味子、高良姜等。本文综述了近年来PXR调节炎症反应的最新研究成果以及中药激活PXR干预炎症反应的机制,以期为今后的研究提供参考。     

莱菔硫烷诱导线粒体裂变抑制血管生成

目的 探讨莱菔硫烷对血管生成的影响及其可能机制。方法 体外实验以原代人脐静脉血管内皮细胞为研究模型，以1‰ 二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）干预作为对照。应用WST-1试剂盒检测不同浓度莱菔硫烷（5～100μmol/L）对原代人脐静脉血管内皮细胞增殖活性的影响，采用小管形成实验和Transwell迁移实验分析莱菔硫烷干预（10μmol/L）对原代人脐静脉血管内皮细胞管腔生成、迁移能力的影响，采用Mito-Tracker Green FM染料标记线粒体结合共聚焦显微镜成像技术观察莱菔硫烷（10μmol/L）干预后线粒体形态学改变，以及蛋白免疫印迹法检测线粒体动态相关蛋白包括线粒体融合蛋白1/2、动力相关蛋白1表达水平，以及血管内皮生长因子的蛋白表达。结果 5μmol/L莱菔硫烷干预24h对人脐静脉血管内皮细胞增殖活性无显著影响，而 ≥ 10μmol/L 莱菔硫烷干预则抑制了人脐静脉血管内皮细胞活性，10、20、40、80、100μmol/L干预组抑制率分别为（17.82±5.80）%（P=0.009）、（35.33±6.26）%（P<0.001）、（65.29±4.26）%（P<0.001）、（66.82±3.94）%（P<0.001）及（68.05±2.54）%（P<0.001），IC50为38.15μmol/L。为避免过高干预剂量所致严重毒性效应，我们将选取10μmol/L作为主要干预剂量。与对照组相比，10μmol/L 莱菔硫烷干预显著抑制人脐静脉血管内皮细胞血管生成能力，其中迁移能力降低了（42.98±9.21）%（P=0.018），而管腔样结构形成能力，包括管腔数量、节点数和管腔总长度则分别降低了（83.94±18.36）%（P=0.011）、（59.22±25.60）%（P=0.021）及（50.49±23.44）%（P=0.025）。人脐静脉血管内皮细胞血管生成能力被莱菔硫烷抑制同时，伴有线粒体动态紊乱、线粒体裂变的发生。相对于对照组而言，10μmol/L 莱菔硫烷干预组线粒体网络数、纵横比显著减少（27.39±22.46）%（P=0.006）、（11.37±8.26）%（P<0.001），而圆度显著增加（11.97±12.07）%（P<0.001）。与此相对应的是，10μmol/L莱菔硫烷干预显著上调促裂变蛋白而抑制促融合蛋白表达，动力相关蛋白1表达相当于对照组的（1.71±0.039）倍（P<0.001），而线粒体融合蛋白1/2表达则分别相当于对照组的（59.30+1.50）%（P=0.006）和（74.75±11.84）%（P=0.031）。同时，血管内皮生长因子蛋白表达则相当于对照组的（65.66±9.49）%（P=0.003）。结论 莱菔硫烷具有抑制血管生成活性，其机制可能与其促进血管内皮细胞线粒体裂变有关。     

莱菔硫烷促进神经胶质瘤细胞凋亡的机制探讨

目的探讨莱菔硫烷(SFN)促进神经胶质瘤细胞凋亡的作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法与流式细胞法检测不同浓度的SFN对神经胶质瘤U251细胞系生长的抑制作用,测定半数抑制浓度,空白对照设为对照组;采用Western blot研究SFN对U251细胞内Cyt-c的表达情况。结果不同浓度SFN组A值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度SFN均对U251细胞生长有一定抑制作用,12.5μmol/l、25μmol/l、50μmol/l、100μmol/l浓度的SFN对U251细胞生长抑制率逐渐增强,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。但100μmol/l与200μmol/l浓度的SFN对U251细胞生长抑制率比较无统计学意义(P>0.05)。不同浓度SFN诱导细胞凋亡率及Cyt-c蛋白表达均显著高于对照组,且随着SFN浓度递增,U251细胞凋亡率、Cyt-c蛋白表达逐渐增加,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SFN可能参与神经胶质瘤细胞的凋亡过程,表现为诱导凋亡U251细胞,可能与Cyt-c表达增高存在关系。     

多廿烷醇治疗老年高脂血症的临床研究

目的观察多廿烷醇治疗老年高脂血症的有效性及安全性。方法选择血脂异常老年患者34例,以多廿烷醇20 mg·d-1口服,疗程24周。用药前后检测患者空腹血糖,血脂变化,肝、肾功能等,观察多廿烷醇调脂疗效及安全性;行肱踝脉搏波传导速度(ba PWV)检查,了解其对大动脉弹性的作用;行SF-36量表检测,以评价药物对患者生活质量的影响。结果多廿烷醇治疗24周,血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)水平下降幅度分别为17.5%、23.6%和19.3%(P<0.05或P<0.01)。多廿烷醇治疗后,SF36值显著升高[125.32±13.93 vs.115.28±15.51(治疗前),P<0.05];用药治疗后除生理职能外,活力、生理机能、身体疼痛、总体健康、社会功能、情感职能和精神健康均有显著改善(P<0.05)。多廿烷醇治疗后ba PWV下降显著[1 527.87±232.09 vs.1 603.97±215.55(治疗前),P<0.01]。多廿烷醇治疗后血压、心率、肝功能、肾功能、肌酸激酶等均未发现显著变化(P>0.05);未有患者出现心肌激酶或丙氨酸转氨酶升高等不良事件。结论多廿烷醇治疗老年血脂异常患者,其调脂作用显著,可改善患者生活质量及大动脉弹性,安全性良好。     

克霉唑抗肝缺血-再灌注损伤凋亡机制的研究*

目的观察孕烷X受体(PXR)诱导药克霉唑对肝脏缺血-再灌注损伤后肝细胞凋亡影响,并探讨其机制。方法建立大鼠肝脏缺血-再灌注模型,32只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型对照组和克霉唑小剂量组、大剂量组进行肝缺血-再灌注损伤。TUNEL法检测肝组织中凋亡细胞,Western blot检测肝脏CYP3A1、Bcl-2、Bax、PARP表达水平。结果克霉唑小剂量组、大剂量组与模型对照组比较,细胞凋亡数减少,组织损伤减轻,凋亡细胞百分率明显降低,Bcl-2/Bax比值明显升高,抑制PARP剪切,提示有较好的抗凋亡作用,均差异有统计学意义;作为PXR特异性强诱导药克霉唑,与假手术组比,能明显诱导CYP3A1基因表达。结论PXR特异性强诱导药克霉唑可能通过促进Bcl-2表达及抑制Bax表达而拮抗肝细胞凋亡,从而减轻肝脏缺血-再灌注损伤,也与抑制PARP剪切有关。     

NOD鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素水平变化与吡格列酮的干预效应

目的:观察含0.02%吡格列酮的饲料对NOD鼠糖尿病发病率的影响,分析巨噬细胞在吡格列酮预防NOD鼠糖尿病中的作用。方法:实验于2003-01/2005-01在中南大学湘雅二医院动物实验室及中心实验室完成。4周龄NOD雌鼠56只,随机数字表法分为吡格列酮组(n=25)和对照组(n=26),分别摄食含0.02%吡格列酮的混合饲料和普通营养饲料。自10周龄开始,每周测尿糖1次,尿糖阳性后用血糖仪测血糖,连续两次血糖≥16.7mmol/L即诊断为糖尿病。两组各取12周龄NOD雌鼠15只,处死前4d腹腔注射30g/L的硫代乙醇酸钠2mL,麻醉后摘除眼球法处死小鼠后腹腔灌洗收集巨噬细胞,加入脂多糖共同培养24d后收集上清,ELISA法测细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平。结果:小鼠56只全部进入糖尿病发病率分析;进入腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的水平结果分析20只。①30周龄时,对照组25只小鼠有20只发生了糖尿病,发病率80.0%,平均发病时间为(139.2±38.2)d;吡格列酮组26只中有14只发生了糖尿病,发病率为53.8%,平均发病时间为(153.0±28.1)d,与对照组相比,吡格列酮组发病率明显降低(P<0.05)。②12周龄时对照组NOD鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平与吡格列酮组差异无显著性意义[(537.4±112.49),(448.9±92.18)ng/L;(551.2±108.23),(461.7±80.49)ng/L,P>0.05]。结论:吡格列酮在一定程度上预防和延缓NOD鼠糖尿病的发生;吡格列酮对NOD鼠糖尿病和胰岛炎的预防作用可能与巨噬细胞无明显关系。     

社区动脉粥样硬化高危人群中阿司匹林抵抗调查

目的：调查社区动脉粥样硬化高危人群中阿司匹林抵抗（AR）或半抵抗（ASR）的发生率及其流行病学特征,并探讨其与动脉粥样硬化危险因素的相关性.方法：筛选200例动脉粥样硬化高危患者服用阿司匹林（100 mg/d）至少7 d以上,用二磷酸腺苷（ADP）和花生四烯酸（AA）作诱导剂测定其前后血小板聚集功能变化及血清血栓烷B2（TXB2）水平测定.结果：200例动脉粥样硬化高危人群中AR发生率为4.5%,ASR者占20.7%.血清TXB2水平,AA、ADP诱导的血小板聚集率与健康对照组相比差异有显著性（P〈0.01）;血清TXB2水平与血小板聚集率有较好的相关性（r=0.871）.结论：社区动脉粥样硬化高危人群服用阿司匹林后部分患者产生AR或ASR;检测AA、ADP诱导的血小板聚集率,血清TXB2水平可作为动脉粥样硬化高危人群发生AR或ASR的评价指标.