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目的 构建表达小鼠核糖体蛋白S3a 特异性RNA干扰重组慢病毒载体(Lenti-shmRPS3a),分析其对细胞凋亡的影响。方法 设计针对小鼠RPS3a mRNA 4条干扰序列,合成相应的发夹序列,连接入慢病毒载体系统 pLLU2G-eGFP中构建重组质粒,将重组质粒与辅助包装质粒共转染293T细胞组装病毒,检测病毒滴度。病毒感染RAW264.7细胞后,RT-PCR和Western blot检测干扰效果,流式细胞术分析其对凋亡的影响。结果 PCR和测序证明成功构建出Lenti-shmRPS3a慢病毒载体,病毒滴度为6-9×107TU/ml;RT-PCR表明Lenti-shmRPS3a的沉默效率高达72.64%、Western Blot证明RPS3a蛋白水平表达降低;流式细胞术证明感染了Lenti-shmRPS3a慢病毒载体的细胞凋亡率较对照组明显升高。结论 表达小鼠核糖体蛋白S3a shRNA慢病毒载体能有效沉默RPS3a基因表达,促进细胞凋亡。 相似文献
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肿瘤坏死因子(TNF)信号通路是很有价值的治疗靶标,抗TNF药物已成功治疗自身免疫和炎症疾病,但传统的抗TNF药物完全封闭TNF信号通路,导致影响自身的免疫调节和监视功能而增加感染、致癌的风险和产生新的自身免疫疾病。选择性抑制sTNF/TNFR1而保留mTNF/TNFR2传导的信号能减少副作用而不降低治疗效果。该文探讨了选择性抑制TNFR1介导的信号通路对治疗TNF相关疾病的意义,分析TNF识别并激活肿瘤坏死因子受体(TNFR)的作用机制,可能会为设计新药提供新的思路。 相似文献
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目的:探讨苦参碱衍生物M19对于肝细胞癌和黑色素瘤细胞转移的抑制作用。方法:肝癌细胞Hep3B、MHCC-LM3和黑色素瘤细胞B16F10经M19处理后,检测肿瘤细胞体外迁移能力。建立C57BL/6小鼠黑色素瘤B16F10和裸鼠肝细胞癌MHCC-LM3转移模型,经M19体内给药后,观察肿瘤细胞肝、肺转移情况。结果:M19能浓度依赖性地抑制肝癌细胞和黑色素瘤细胞迁移。M19体内给药使B16F10细胞在小鼠肺的转移减少,且还能抑制MHCC-LM3细胞在裸鼠肺和肝的转移。结论:M19能在体内外抑制肝细胞癌和黑色素瘤细胞的转移。 相似文献
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20世纪中叶,特别晃80~90年代,以基因工程技术为代表的新的医药革命掀起了一场大的技术进步,基因治疗ADA综合症、转基因动物、动物体细胞克隆成功使这场生命科学领域的观念、新思维不断更新传统的医药概念。面临新世纪,特别是前10~20年内,这场革命将会越来越对传统的观念发起挑战,其领域涉及动物、植物、医药、食品、农业街道中个方面。本综述就此进行回顾与展望,特别是就研究策略与对策进行分析,提出我们的发 相似文献
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DNA 芯片--逆向点杂交技术 总被引:1,自引:0,他引:1
郭葆玉 《第二军医大学学报》2000,21(8):789-790
自1995年斯坦福大学的Schena M 和Brown PO 等[1] 发表第1篇基因表达阵列芯片以来,国内外兴起了一股微点阵(microarrays)技术--DNA芯片大浪潮.DNA芯片技术的开发与应用已在世纪末为研究AIDS、癌症过程、某些疾病诊断、基因治疗、新食品开发、新药研制及生命科学开辟了一条全新的璀璨大道.虽然,目前就预言芯片技术对于生命科学所造成的冲击可能为时尚早.但是,可以展望在不久的将来,DNA芯片技术可以取代DNA自动化测序,广泛应用于新药研制和代替PCR技术对疾病做出诊断.从这个意义上说,微点阵技术完全可以与单克隆抗体(McAb)技术、PCR技术、重组DNA技术相媲美,从而成为21世纪生命科学研究的主要手段. 相似文献
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绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一种来源于水母的生物发光蛋白。GFP基因作为报告基因已被广泛应用于各种生物的研究中。白念珠菌感染在临床真菌感染中占有很大的比例,因此对白念珠菌进行深入研究具有重要意义。GFP在白念珠菌的研究中已得到广泛的应用。GFP基因可与目的基因融合形成融合基因,融合基因可表达融合蛋白,该融合蛋白可发出荧光信号,进行基因表达和蛋白定位等方面的研究。本文综述了GFP在白念珠菌研究中的应用。 相似文献
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趋化因子受体5(CCR5)作为一个辅助受体在HIV-1进入巨噬细胞的过程中发挥重要作用.在不同人种中,CCR5存在天然的突变基因型,其中包括纯合子和杂合子基因型,它们对HIV-1的易感性也各不相同.实验室中膜外袢的点突变、缺失突变、插入及膜内基元的信号转导研究从分子水平揭示了一些氨基酸和空间结构对辅助受体的功能起关键性的作用,这对深入了解HIV-1与受体作用的分子机制,为寻找有效的阻断途径无疑是必需的和重要的. 相似文献
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基因工程药物课程内容庞杂,理论体系复杂且实践性强,单纯采用传统课堂讲授式教学难以达到理想的教学效果.介绍了在基因工程药物教学中引入课题式教学法以提高教学质量的一些做法,不仅可以使学生更加深刻地理解基因工程药物相关的概念、原理,还可以提高获取知识的兴趣和能力,培养科学研究的思维和创新意识,增强交流沟通、团队合作等多方面的综合素质. 相似文献