脑康冲剂治疗阿尔茨海默病的临床与实验研究

目的探讨益脑补肾中药复方脑康冲剂对阿尔茨海默病(AD)的临床疗效。方法临床研究选择120例AD患者随机分为脑康冲剂组90例和脑复康组30例,分别予脑康冲剂和脑复康;实验研究选择56只小鼠每日每只颈部皮下注射10%D-半乳糖0.1 m/10 g,连续60 d,制备AD小鼠模型,并随机分为模型组(灌胃自来水)、脑康冲剂Ⅰ组(6 g.kg-1.d-1)和Ⅱ组(12 g.kg-1.d-1)(给药量按所含生药量计算)、脑复康组(0.6 g.kg-1.d-1),以上每组14例,并设正常对照组(n=14,灌胃自来水),以上各组雌雄各半。。结果3个月后观察到,脑康冲剂对AD有明显改善作用,临床症状改善率达97.8%,其疗效优于脑复康,记忆商提高也明显优于脑复康。实验研究证实脑康冲剂不仅可以改善衰老造成的学习记忆功能衰退,而且可以降低脑组织中过氧化脂质(LPO)含量和B型单胺氧化酶(MAO-B)活性,从而减少超氧阴离子自由基对脑组织的损伤及拮抗衰老引起的脑组织内单胺类递质的减少,防止脑功能衰退。结论脑康冲剂对AD有很好的疗效。     

硒螺旋藻对大鼠肝叶切除术后肝细胞再生和抗氧化能力的影响

目的研究硒螺旋藻（Se—SP）对大鼠肝叶切除术后肝细胞再生和抗氧化能力的影响，以印证其生物利用价值。方法用Wistar大鼠复制67％肝叶切除动物模型，设Se—SP高剂量（H）和低剂量（L）治疗组，术前以Se—SP灌胃7d；另设生理盐水（C）及假手术对照组（S）。于手术前及其后24h取鼠肝细胞，检测硒（Se）、丙二醛（MDA）含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和超氧化物歧化酶（SOD）活性；利用免疫组化方法测定肝细胞增生核抗原（PCNA）表达指数，慧星实验检测过氧化氢诱导的肝细胞DNA损伤。结果与C，S组相比，H组、L组肝细胞中MDA水平明显降低（P〈0．05），而Se，GPx和SOD明显升高（P〈0．05）；肝细胞PCNA指数明显升高（P〈0．05），过氧化氢诱导的DNA损伤程度较轻。结论Se—SP对肝切除鼠肝细胞具有一定的抗氧化和促再生作用。     

过敏症免疫治疗的新策略

过敏症严重危及人类的健康和生命。近30年来，在世界范围内，特别是工业发达国家过敏症的发生率明显增加。其原因尚不明确，但人们对过敏症发生的分子机理和免疫学过程已经有了比较透彻的了解。过敏症免疫治疗主要分为特异性和非特异性治疗两大类：应用过敏原的制剂治疗，如过敏原提     

六耳铃化学成分研究

目的:研究六耳铃的化学成分.方法:采用柱色谱技术,分离六耳铃醇提物的乙酸乙酯萃取部位的化学成分;根据光谱分析和文献对照的方法鉴定分离所得化合物的结构.结果:分离并鉴定了5个化合物,分别为原儿茶酸(1)、香叶木素(2)、芹菜素(3)、4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸(4)、东莨菪素(5).结论:化合物1～5均为首次从该植物中分离得到,亦首次从艾纳香属植物中分离得到.     

HLA-A*0203-BSP的表达和复性及其四聚体的鉴定

目的：优化诱导条件大批量表达生物素化酶BirA底物肽（BSP）与HLA-A＊0203重链胞外域的融合蛋白（HLA—A＊0203、BSP），并制备负载HLA-A＊0203限制性EB病毒抗原肽EBNA3 596-604的四聚体（HIA—A}0203／SVR）。方法：以HLA—A＊0203-BSP原核表达载体转化E．coli BL21（DE3）菌株，优化诱导条件进行大批量重组蛋白的表达。通过稀释法复性可溶性HLA-A＊0203／SVR单体，然后以BirA对其进行生物素化，并以阴离子交换树脂纯化。将纯化的HLA-A＊0203／SVR单体与荧光素标记的链亲和素按4：1的比例混合形成四聚体，通过对特异性CTL进行染色验证其结合活性。结果：当IPTG的浓度为0．4mmol／L，于37℃诱导过夜后，融合蛋白的表达最多。该重组蛋白相对分子质量（Mr）为34003，与HLA—A＊0203-BSP的理论Mr相一致。该重组蛋白以包涵体形式存在于沉淀部分，约占菌体总蛋白的30％。负载抗原肽的可溶性HLA-A＊0203／SVR单体是在同时存在HLA-A＊0203，BSP、β2微球蛋白及HLA-A＊0203限制性抗原肽SVR的情况下通过稀释法复性而获得。该单体生物素化并纯化后与荧光素标记的链亲和素按4：1的比例混合后即形成四聚体。流式细胞术（FCM）分析证实，该四聚体具有与HLA—A2^＋供者特异性CTL结合的活性。结论：HLA—A＊0203-BSP融合蛋白在优化条件下获得高效表达。以此蛋白制备的HLA-A＊0203／SVR四聚体具有与HLA-A2^＋供者特异性CTL结合的活性，为研究HLA—A＊0203个体EB病毒特异性CTL的免疫应答打下了基础。     

人工合成VEGF表位模拟7肽的生物学功能研究

目的: 检测人工合成血管内皮细胞生长因子(VEGF)表位模拟 7肽特异抑制VEGF促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的活性。方法: 通过噬菌体展示技术, 筛选获得了表达模拟肽的阳性噬菌体克隆, 经测序得到VEGF表位模拟肽序列: GWYYDAX。人工合成该短肽, 用体外细胞培养的方法检测其对HUVEC的生长抑制作用。结果: 表位模拟肽GWYYDAX可剂量依赖性抑制VEGF促进HUVEC生长的活性。结论: VEGF表位模拟肽可能模拟了VEGF的部分结构, 竞争结合HUVEC细胞VEGF受体 (KDR), 阻断了VEGF VEGFR的信号传递而抑制细胞生长, 具有潜在的应用前景。     

先天性糖基化病的研究进展

先天性糖基化病 (ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｄｉｓｏｒｄｅｒｓｏｆｇｌｙｃｏｓｙｌａ ｔｉｏｎ,ＣＤＧ) ,旧称为糖类缺陷性糖蛋白综合征 (ｃａｒｂｏ ｈｙｄｒａｔｅ-ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｙｎｄｒｏｍｅｓ,ＣＤＧＳ) ,是一类由于聚糖的合成和结合到其他复合体 (蛋白质和脂质 )过程的缺陷引起的常染色体隐性遗传病[1,2 ] 。绝大多数ＣＤＧ患者有多种系统病变且均有不同程度的精神发育迟缓。迄今发现的ＣＤＧ主要是由于人体内蛋白Ｎ -糖基化途径缺陷引起的 ,不同酶的缺陷产生不同的ＣＤＧ类型。最新的命名系统将脂联寡…     

桃仁红花煎治疗无症状性高脂血症的作用研究

目的:探讨活血化淤理气通络经典方剂“桃仁红花煎”对无症状性高脂血症的治疗作用。方法:使用ShimadiuCL-7200型自动生化分析仪检测各组治疗前后患者血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、载脂蛋白A(APoA)、载脂蛋白B(APoB)水平,使用Griess法检测治疗前后患者血浆一氧化氮(NO)水平,使用邻苯三酚法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,使用巴比妥法检测血清丙二醛(MDA)含量。结果:治疗后,治疗组患者血浆TC、TG、LDL、MDA水平明显降低(P<0.05),而ApoA、HDL、NO水平,及SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01),APoB治疗前后无明显变化(P>0.05);对照组给予洛伐它丁治疗后,TC、TG、LDL水平明显降低(P<0.05),ApoA、HDL水平明显升高(P<0.05),而MDA、NO、ApoB含量及SOD活性无明显变化。结论:活血化淤理气通络中药可以降低血脂,并有可能防治高脂血症对血管造成损害.     

SARS-CoV-2 PLpro在对IFN-α应答的肝细胞中独立诱导过度炎症相关坏死性死亡

目的：探讨新型冠状病毒（SARS-CoV-2）木瓜蛋白酶样蛋白酶（PLpro）在对干扰素α(IFN-α)应答的肝细胞中所介导的功能蛋白质组改变及其效应机制。方法：构建稳定表达PLpro的三株单克隆Huh7肝细胞（PLpro1～3）和对应的空载细胞（NC）,分别以IFN-α刺激各株细胞建立处于IFN-α应答状态的肝细胞模型,采用数据非依赖质谱分析PLpro和NC组的定量蛋白质组,以生物信息学分析,预测PLpro对IFN-α应答性肝细胞的作用机制,并采用RT-qPCR、Western blot、细胞促炎因子水平分析、乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性分析和Annexin V-Alexa Fluor 647/PI凋亡检测等方法对上述机制进行生物学验证。结果：IFN-α可显著上调空载Huh7细胞株（NC细胞）中的ISG化蛋白（P<0.01）,而相同条件下,PLpro细胞蛋白的ISG (IFN-stimulated gene)化修饰被显著下调（P<0.01）,表明PLpro细胞株表达了具去ISG化活性PLpro,提示本研究成功建立了细胞模型。质谱分析鉴定和定量得到5 619个交集蛋白质和1...     

叶酸缺乏孕鼠子代血细胞形态学改变及脑额区皮层超微结构表现

探讨叶酸缺乏对胎鼠宫内脑发育的影响、研究叶酸缺乏孕鼠子代胎鼠脑组织超微结构的改变及为叶酸缺乏造成脑发育障碍提供细胞水平的依据 ,及采用雌性SD大鼠实验组 30只、对照组 2 0只 ,分别饲以不含叶酸和含 2mg叶酸 kg的纯合饲料 ,两周后与雄鼠交配 ,于怀孕第 2 0天对孕鼠剖腹取胎 ,对模型进行评价并观察叶酸缺乏对胎鼠发育的影响 ,应用透射电镜观察胎鼠额区皮层超微结构的改变。结果显示 :1 .实验组孕鼠交配前及妊娠晚期末血清叶酸均明显低于对照组 ,外周血出现多分叶核粒细胞。实验组胎鼠血清叶酸也明显低于对照组 ,出现巨幼红细胞 ,RBC和HB均低于对照组 ,且伴有宫内生长限制。 2 .实验组胎鼠额区皮层超微结构观察示 :神经元出现核切迹、局灶性核周腔扩张、异染色质减少、胞质内细胞器肿胀、核糖体减少 ;某些胶质细胞亦见类似改变 ;神经毡膜性结构不完整。结论 :1 .交配前两周开始限食叶酸直至妊娠期结束 ,所建立的叶酸缺乏孕鼠动物模型处于叶酸缺乏第三阶段 ,其胎鼠宫内生长限制 ,红细胞出现巨幼变 ,但没有产生神经管闭合的异常。这是较理想的妊娠中晚期叶酸缺乏的孕鼠动物模型。 2 .母体叶酸缺乏能造成胎鼠皮层脑组织超微结构的改变 ,可能导致神经元功能的紊乱和丧失 ,以致防碍脑结构和脑功能的正?