落花生根内生真菌Fusarium oxysporum LHS-P1-3中恩镰孢菌素类化合物及生物活性研究

目的 研究落花生根内生真菌Fusarium oxysporum LHS-P1-3的次级代谢产物及其生物活性。方法 使用硅胶色谱柱、高效液相色谱等对代谢粗提物进行分离纯化,采用质谱、核磁共振等方法测定化合物的结构,采用CCK-8法测试化合物的抗肿瘤细胞活性,使用表面等离子共振实验（surface plasmon resonance,SPR）研究化合物与胆固醇转运蛋白1（niemann-pick c1-like 1,NPC1L1）相互作用关系。结果 从落花生根内生真菌Fusarium oxysporum LHS-P1-3分离得到6个化合物,包括1个新化合物（1）与5个已知化合物：白僵菌素（2）、恩镰孢菌素I（3）、恩镰孢菌素MK1688（4）、恩镰孢菌素H（5）及恩镰孢菌素B（6）。化合物1～4对HepG2细胞和HeLa细胞的IC₅₀均小于10 μmol/L,化合物2～4则对HCT116细胞的IC₅₀小于10 μmol/L,SPR研究表明化合物2、4在20 μmol/L浓度下,可与NPC1L1蛋白相互作用。结论 化合物1为新的恩镰孢菌素类化合物,命名为恩镰孢菌素W。化合物1～5具有抗肿瘤活性,化合物2、4与NPC1L1蛋白存在相互作用,可能是NPC1L1蛋白的潜在抑制剂。     

三烯霉素J——来自深海细菌Ochrobactrum sp.的新安莎霉素

目的探究深海来源细菌Ochrobactrum sp. OUCMDZ-2164中的细胞毒活性代谢产物。方法利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等手段对发酵产物进行分离纯化,运用紫外、红外、质谱、核磁共振及圆二色谱等方法鉴定化合物的结构,采用MTT和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法分别评价化合物对乳腺癌MCF-7细胞和肺癌A549细胞及慢性髓性白血病K562细胞的增殖抑制活性。结果从细菌Ochrobactrum sp. OUCMDZ-2164的发酵产物中分离获得了4个化合物,分别鉴定为3-O-去甲基三烯霉醇(1)、flazin(2)、flazin-3-carboxylicacid(3)和胸腺嘧啶(4)。化合物1在10μmol/L浓度下对MCF-7细胞的增殖抑制率为61.5%。结论化合物1为新的安沙霉素类化合物,命名为三烯霉素J,其具有一定的乳腺癌细胞毒活性。     

喜树碱-甾体新缀合物的设计合成及抗肿瘤活性

目的:设计合成喜树碱-甾体新缀合物,考察其抗肿瘤活性。方法:以喜树碱或者7-羟甲基喜树碱和一系列甾体酸为原料,采用EDCI-DMAP偶合法,合成喜树碱-甾体新缀合物;以喜树碱为阳性对照,采用MTT法进行初步的体外抗HepG2细胞活性筛选。结果:喜树碱-甾体新缀合物的结构通过1H-NMR,质谱和元素分析确认;化合物2a,3d对HepG2细胞的抑制活性明显高于喜树碱。结论:合成的喜树碱-甾体缀合物2a,3d有较好活性,值得进一步研究。     

一株海洋曲霉MDCW-15中的新烟曲霉素

目的 对海洋曲霉MDCW-15的次级代谢产物进行研究。方法 利用柱色谱等方法对菌株次级代谢产物进行分离纯化，运用核磁共振、质谱等波谱分析方法对化合物进行结构鉴定，采用药敏纸片法评价化合物的抗真菌活性。结果 从发酵产物中分离鉴定了1个新的烟曲霉素类化合物2''-顺式-富马霉素（1）及已知化合物fumagiringillin（2），对化合物进行了抑菌活性测试。结果显示化合物1和2对白色念珠菌的最小抑菌浓度（MIC）值均为32.0 μg/mL。结论 化合物1为新化合物；化合物1和2具有一定的抗真菌活性。     

海洋真菌Penicillium sp. H1中1个新的二萜糖苷类化合物

目的探究广西北部湾来源真菌Penicillium sp. H1中的活性天然产物。方法利用柱色谱等手段对发酵产物进行分离、纯化,运用紫外、质谱、核磁共振和比旋光等方法鉴定化合物的结构,采用药敏纸片法评价化合物的抗香蕉枯萎病菌活性。结果从真菌Penicilliumsp.H1的发酵产物中分离获得了3个二萜类化合物,分别鉴定为炭角菌素D(1)、BE-31405(2)和sordaricin(3)。化合物1和2对香蕉枯萎病菌有中等的抑制活性,最小抑菌浓度(MIC)分别为32.0、16.0μg/mL。结论化合物1为未见文献报道的新的二萜糖苷类化合物。     

海洋曲霉Aspergillus ruber TX-M4-1的次级代谢产物研究

目的 对来自涠洲岛火山口的海洋曲霉Aspergillus ruber TX-M4-1的次级代谢产物进行研究。方法 利用硅胶、凝胶和高效液相等柱色谱方法进行分离纯化,运用紫外、红外、质谱和核磁共振波谱等分析方法对化合物进行结构鉴定,分别采用96孔板微量法、CCK-8法和DPPH法对化合物的抗菌活性、肿瘤细胞毒活性及抗氧化活性进行测试。结果 从海洋曲霉Aspergillus ruber TX-M4-1的发酵产物中分离鉴定了1个新的苯甲醛类化合物及10个已知结构的化合物,分别鉴定为5''-顺式-四氢金色灰绿曲霉素（1）、2-(1'',5''-庚二烯基)-3,6-二羟基-5-(3"-甲基-2"-丁烯基)苯甲醛（2）、异二氢金色灰绿曲霉素（3）、二氢金色灰绿曲霉素（4）、四氢金色灰绿曲霉素（5）、灰绿曲霉黄色素（6）、谷甾醇（7）、胆固醇（8）、链蠕孢素（9）、脱氢海胆灵（10）和新海胆灵A（11）。化合物1、5和6具有清除自由基活性,20 μmol/L浓度下其DPPH自由基清除率分别为61.9%、88.0%和91.9%。结论 化合物1为新的苯甲醛类化合物。化合物1、5和6具有强的抗氧化活性。     

田基黄石油醚提取物与5-Fu联用对HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的研究田基黄石油醚提取物与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联用对人肝癌HepG2细胞作用。方法用MTT法检测田基黄石油醚提取物和5-Fu单用和联用对HepG2细胞生长抑制的影响,用DAPI荧光染色法、Annexin-V/PI双染流式细胞术法和琼脂糖凝胶电泳法观察两药对HepG2细胞形态学,诱导凋亡和细胞DNA降解的影响。结果田基黄石油醚提取物及5-Fu均对HepG2细胞有生长抑制作用,且有协同增效作用;DAPI染色结果表明联合给药引起的细胞核凋亡现象较单独给药组更明显;Annexin-V/PI双染流式细胞术法和琼脂糖凝胶电泳法结果表明,联合给药诱导凋亡明显,有典型的凋亡"DNA梯形条带"。结论田基黄石油醚提取物与5-Fu联用后可提高HepG2细胞对5-Fu的敏感性,发挥促凋亡增效作用。     

载丹皮酚纳米纤维膜的制备、表征及性能评价

目的 以丹皮酚、聚己内酯（polycaprolactone）、明胶（gelatin）为原料,利用静电纺丝技术制备载药纤维膜,并进行结构表征及性能评价。方法 采用静电纺丝仪制备了聚己内酯/丹皮酚纤维膜、聚己内酯＋明胶/丹皮酚纤维膜以及三层纤维膜（上下层为聚己内酯膜,中间层为聚己内酯＋明胶/丹皮酚膜）。通过扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱仪、X射线衍射仪、差示量热扫描仪对单层纤维膜的形貌与结构进行表征。通过CCK-8实验和溶血率测定法对载药纤维膜的安全性进行初步评价;并测定了聚己内酯＋明胶/丹皮酚纤维膜的抗菌活性和抗氧化性;通过体外释放实验考察丹皮酚的释放规律。结果 丹皮酚成功负载于电纺纤维中,CCK-8实验测得聚己内酯＋明胶/丹皮酚纤维膜（载药量≤15%）对L929细胞存活率并无明显影响,溶血率实验测得样品纤维膜的溶血率都低于1%。聚己内酯＋明胶/丹皮酚纤维膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有良好的抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为（19.93±0.10）mm。聚己内酯＋明胶/丹皮酚载药纤维膜对羟自由基的清除力较强,当丹皮酚的质量浓度为1.1 mg/mL,载药纤维膜的清除率为78.72%。体外释放实验表明药物的释放先是经过一个快速释放阶段后进入缓慢释放过程。3层纤维膜的缓释效果最好,累积释放率为94.58%。结论 制备的丹皮酚纤维膜具有较好的生物相容性和抑菌活性及抗氧化活性,具有缓释性,其在生物医药领域的应用值得进一步研究。     

超声波法碱水提取叶下珠黄酮的研究

目的 研究超声波法碱水提取叶下珠黄酮的工艺.方法 以pH、处理时间、料液比为主要考察因素,以浸取样品中总黄酮的含量为主要考察指标,确定最佳提取条件.结果 最佳提取工艺为:Ca(OH)2的pH值为11,超声波提取时间为40 min,料液比为1:50.结论 与传统的乙醇提取法进行对比显示,用超声波提取法具有快速、高效等特点.     

青天葵4种提取物抗氧化活性与其总黄酮和总酚含量的相关性

目的考察青天葵Nervilia fordii(Hance)Schltr.氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇提取物抗氧化活性与其总黄酮和总酚含有量的相关性。方法 Al Cl3-HAc-Na Ac显色法和福林-酚比色法分别测定青天葵4种提取物中总黄酮和总酚含有量,通过测定DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、还原能力评价提取物抗氧化活性,SPSS17.0软件分析抗氧化活性与2种成分含有量的相关性。结果青天葵4种提取物的抗氧化活性均呈量效关系,乙酸乙酯提取物最强,而乙醇提取物最弱。其与总黄酮含有量有一定相关性(0.604r0.638),与总酚含有量相关性显著(r0.977)。结论青天葵乙酸乙酯提取物可用于天然抗氧化剂开发,总酚含有量是影响其抗氧化活性的主要因素。